华理分析化学课件-色谱分析理论

1、色谱分析法Chromatography第一章 色谱分离理论基础一、色谱分析概论一、色谱分析概论问题问题问题问题1：什么是色谱法？：什么是色谱法？问题问题2：为什么色谱法能将混合物分开？：为什么色谱法能将混合物分开？问题问题3：色谱法的分类？：色谱法的分类？问题问题4：各种色谱法的应用范围？：各种色谱法的应用范围？1、什么是色谱法？茨维特的实验茨维特的实验茨维特：茨维特： 俄国植物学家，主要从事植物色素的俄国植物学家，主要从事植物色素的研究工作，在研究工作，在1906 年发表的文章中，年发表的文章中，首次提出了色谱的概念。首次提出了色谱的概念。茨维特的实验因此因此 色谱法是一种色谱法是一种分离分

2、离方法。方法。 它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相，它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相，两相作相向运动。两相作相向运动。 Chromatography 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。 色谱分析是一种分离、分析法。色谱分析是一种分离、分析法。 2、色谱法分离原理 当流动相中所携带的混合物流过固定相当流动相中所携带的混合物流过固定相时，就会和固定相发生作用时，就会和固定相发生作用(力的作用力的作用)。由于混合物中各组分在由于混合物中各组分在性质和结构性质和结构上有上有差异，与固定相发生差异，与固定相发生作用的大小作用的大小也有差也有差异。因

3、此在同一推动力作用下，不同组异。因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出而按先后不同的次序从固定相中流出。3、色谱法的分类 按流动相状态的不同，可分为按流动相状态的不同，可分为气相色谱法气相色谱法 (GC)液相色谱法液相色谱法 (LC)超临界流体色谱超临界流体色谱 (SFC)什么是气相色谱法？ 以气体为流动相的色谱法以气体为流动相的色谱法 Gas Chromatogaphy，简称简称GC 按固定相状态的不同可分为：按固定相状态的不同可分为： 气固色谱气固色谱(GSC) 气液色谱气液色谱(GLC) 适合适合

4、分离分析分离分析易汽化易汽化（在（在- 190-500范围内有范围内有0.2-10mmHg的蒸气压的）的蒸气压的）稳定、不易分解、不易反稳定、不易分解、不易反应应的样品，特别适合用于的样品，特别适合用于同系物、同分异构体同系物、同分异构体的分的分离。离。应用举例（应用举例（GC）什么是液相色谱法？ 以液体为流动相的色谱法以液体为流动相的色谱法 Liquid Chromatogaphy，简称简称LC 适合分离分析高沸点、热不稳定、适合分离分析高沸点、热不稳定、离子型的样品。离子型的样品。应用举例应用举例(HPLC)按固定相使用的形式可分为按固定相使用的形式可分为柱色谱（柱色谱（Column Ch

5、romatography） 将固定相装在色谱柱内将固定相装在色谱柱内纸色谱（纸色谱（Paper Chromatography） 用滤纸做固定相或固定相载体的色谱用滤纸做固定相或固定相载体的色谱薄层色谱（薄层色谱（Thin Lay Chromatography） 固定相均匀涂在玻璃板或塑料板上固定相均匀涂在玻璃板或塑料板上 4. 色谱相关术语 关于色谱峰关于色谱峰 关于保留值关于保留值 关于分配平衡关于分配平衡n 关于色谱峰的术语峰峰高基线峰宽半峰宽峰面积标准偏差p峰底宽、半峰宽及标准偏差三者的关系为峰底宽、半峰宽及标准偏差三者的关系为：p W=4，Wh/2=2.354p拖尾峰拖尾峰p伸舌峰伸舌

6、峰p鬼峰、假峰鬼峰、假峰p畸峰畸峰p峰底峰底p基线漂移基线漂移p基线噪声基线噪声p谱带扩张谱带扩张n 关于保留值的术语p 死时间死时间( (tM): ): 无保留组分出峰时间无保留组分出峰时间p 保留时间保留时间( (tR):):p 调整保留时间调整保留时间( (tR):):p 死体积死体积( (VM):):p 保留体积保留体积( (VR):): p 调整保留体积调整保留体积( (VR):):0FtVMMMRRttt0FtVRR00)(FttFtVMRRRp相对保留值相对保留值(ri,s):p保留指数保留指数(I)：又叫：又叫Kovats，它规定正构烷烃的保，它规定正构烷烃的保留指数是其碳数的

7、留指数是其碳数的100倍，其它物质的保留指数倍，其它物质的保留指数在实际色谱条件下测定。选取与被测物相邻的两在实际色谱条件下测定。选取与被测物相邻的两种正构烷烃做参照系，其中一种碳数为种正构烷烃做参照系，其中一种碳数为Z，另一种另一种为为Z+1，被测物的保留指数由下式计算，被测物的保留指数由下式计算：,RsRiRsRisiVVttrZttttIRzzRRzR100lglglglg100) 1(n 关于分配平衡p 分配系数分配系数K (distribution coefficient )p 分配比分配比k又称为容量因子、容量比、分配容量，是指在一又称为容量因子、容量比、分配容量，是指在一定温度和

8、压力下，平衡状态时组分在固定相中的量与在定温度和压力下，平衡状态时组分在固定相中的量与在流动相中的量之比值。流动相中的量之比值。是衡量柱子对组分保留能力的重是衡量柱子对组分保留能力的重要参数要参数。（柱温）量每毫升流动相上溶质的溶质的量或吸附每毫升固定相上溶解.)(KMRMSttVVKkp相比相比 色谱柱内固定相和流动相体积之比色谱柱内固定相和流动相体积之比 是柱型及结构的重要特征。是柱型及结构的重要特征。 kKVVSM二、色谱分析法基本理论 研究理论的目的研究理论的目的解决色谱峰的分离问题解决色谱峰的分离问题 三个色谱基本理论问题三个色谱基本理论问题 色谱热力学问题色谱热力学问题发展高选择性

9、色谱柱发展高选择性色谱柱 色谱动力学问题色谱动力学问题发展高效能色谱柱发展高效能色谱柱 分离条件的最优化问题分离条件的最优化问题分离条件优化分离条件优化1、色谱动力学理论 研究流出曲线展宽的本质及曲线形状变研究流出曲线展宽的本质及曲线形状变化的影响因素化的影响因素塔板理论塔板理论速率理论速率理论（1）塔板理论 推导推导 塔板理论将色谱柱比作精馏塔，通过概率理论得塔板理论将色谱柱比作精馏塔，通过概率理论得到流出曲线方程到流出曲线方程：nteCCRttR222)(02 为标准偏差为标准偏差 当当t=tR时，时，C=Cmax，峰高正比于进样量，峰高正比于进样量C0，是，是峰峰高定量高定量的理论基础。

10、的理论基础。 当当n越大，柱效越大，越大，柱效越大，Cmax/ C0越大。即保留时间越大。即保留时间一定时，一定时，塔板数越多，峰越高塔板数越多，峰越高。 Cmax反比于反比于tR，tR小，小，Cmax大，大， 保留时间小的组分保留时间小的组分峰高且窄峰高且窄。tR大，大，Cmax小，小， 保留时间大的组分峰保留时间大的组分峰低且宽低且宽。222)(02RtteCCn 对色谱流出曲线方程的讨论n 柱效 由流出曲线方程导出由流出曲线方程导出： H=L/n n是峰相对展宽的量度是峰相对展宽的量度 n是柱效的量度是柱效的量度 n是常数时，是常数时，Y与与tR 成正比成正比 n越大，越大，h越小，表明

11、组分在柱中达到的分配平衡越小，表明组分在柱中达到的分配平衡次数越多，对分离越有利，但还不能预言各组分次数越多，对分离越有利，但还不能预言各组分有被分离的可能性。有被分离的可能性。222/122/1)(16)(54.5)(2ln8YtYtYtnRRRn 塔板理论的贡献 塔板理论有助于我们形象的理解色谱的塔板理论有助于我们形象的理解色谱的分离过程。分离过程。 导出色谱流出曲线方程，它符合高斯分导出色谱流出曲线方程，它符合高斯分布，与实验现象相吻合。布，与实验现象相吻合。 导出理论塔板数的计算公式，作为柱效导出理论塔板数的计算公式，作为柱效的评价指标的评价指标。 n 塔板理论的局限 塔板高度塔板高度

12、H是一个抽象的物理量，它的色谱本是一个抽象的物理量，它的色谱本质是什么？它与哪些参变量有关，又怎样影响质是什么？它与哪些参变量有关，又怎样影响峰的扩张？对实验的指导意义有限。峰的扩张？对实验的指导意义有限。 不能解释流速对理论塔板数的影响。不能解释流速对理论塔板数的影响。 有些假设不合理，如没有考虑纵向扩散对色谱有些假设不合理，如没有考虑纵向扩散对色谱分离的影响等。分离的影响等。（2）速率理论 概述概述 速率理论是速率理论是1956年荷兰学者年荷兰学者Van Deemter等提出，等提出，因此又称作范第姆特方程。因此又称作范第姆特方程。 运用运用流体分子规律流体分子规律研究色谱过程中产生研究色

13、谱过程中产生色谱峰扩展色谱峰扩展的因素，导出了理论塔板高度与流动相线速度的关的因素，导出了理论塔板高度与流动相线速度的关系，揭示了影响塔板高度的动力学因素。系，揭示了影响塔板高度的动力学因素。n 气相色谱中速率方程的导出 根据塔板计算公式：根据塔板计算公式： n=5.54(tR/Y1/2)2 速率理论讨论的是色谱峰展宽原因，即影速率理论讨论的是色谱峰展宽原因，即影响塔板数响塔板数n的因素，也就是影响塔板高度的因素，也就是影响塔板高度H的因素。的因素。 H=A+B/u+Cu涡流扩散项A=2dp涡流扩涡流扩散项散项均匀性均匀性因子因子粒径粒径 涡流扩散项涡流扩散项A 由不等路径造成的色谱峰扩展由不

14、等路径造成的色谱峰扩展。由于柱填料粒径。由于柱填料粒径大小不同，粒度分布范围不一致及填充的不均匀，形大小不同，粒度分布范围不一致及填充的不均匀，形成宽窄、长短不同的路径，因此流动相沿柱内各路径成宽窄、长短不同的路径，因此流动相沿柱内各路径形成紊乱的涡流运动，有些溶质分子沿较窄且直的路形成紊乱的涡流运动，有些溶质分子沿较窄且直的路径运行，以较快的速度通过色谱柱，发生分子超前，径运行，以较快的速度通过色谱柱，发生分子超前，反之，有些分子发生滞后，从而使色谱峰产生扩散。反之，有些分子发生滞后，从而使色谱峰产生扩散。 分子扩散项B/u项项其中其中B=2Dg弯曲因子扩散系数 分子扩散项分子扩散项 由于分

15、子的纵向扩散造成的色谱峰扩展。由于分子的纵向扩散造成的色谱峰扩展。即由于试样组分被载气带入色谱柱后，是以塞即由于试样组分被载气带入色谱柱后，是以塞子的形式存在于色谱柱的很小一段空间中，由子的形式存在于色谱柱的很小一段空间中，由于在塞子前后存在浓度梯度，因此使运动着的于在塞子前后存在浓度梯度，因此使运动着的分子产生纵向扩散，引起色谱峰扩展。分子产生纵向扩散，引起色谱峰扩展。 传质阻力项 平衡浓度固定相传质阻力引起非平衡过程示意图实际浓度分界面流动相由气相传质阻力和液相传质阻力两项组成 气相传质阻力项气相传质阻力项C Cg g u u 试样组分从气相移动到固定相表面的过程中，由试样组分从气相移动到

16、固定相表面的过程中，由于质量交换过程需要一定时间（即传质阻力）而使分于质量交换过程需要一定时间（即传质阻力）而使分子有滞留倾向。子有滞留倾向。在此过程中，部分组分分子随流动相在此过程中，部分组分分子随流动相向前运动，发生分子超前，引起色谱峰扩展。向前运动，发生分子超前，引起色谱峰扩展。 DgdkkCgp222)1 (01. 0容量因子 液相传质阻力项液相传质阻力项CL u u 试样组分从固定相表面移动到固定相内部的过程中，试样组分从固定相表面移动到固定相内部的过程中，由于质量交换过程需要一定时间（即传质阻力）而使分由于质量交换过程需要一定时间（即传质阻力）而使分子有滞留倾向。子有滞留倾向。在此

17、过程中，部分组分分子先离开固定在此过程中，部分组分分子先离开固定相表面，发生分子超前，引起色谱峰扩展。相表面，发生分子超前，引起色谱峰扩展。 LfLDdkkC22)1 (32液相扩散系数液膜厚度气相色谱中的速率方程uDdkkDgdkkuDgdpHLfp22222)1 (32)1 (01. 022n 速率方程给我们的什么启示？ 为柱型的研究和发展提供理论依据为柱型的研究和发展提供理论依据 为操作条件的选择提供理论指导为操作条件的选择提供理论指导 为色谱柱的填充提供理论指导为色谱柱的填充提供理论指导对柱型研究和发展的影响（1）A=0?Golay1957年提出年提出毛细管柱毛细管柱的概念的概念（op

18、entube）毛细管柱毛细管柱A=0，H=B/u+CuH，N，分离能力大大提高分离能力大大提高对柱型研究和发展的影响（2）B=0?溶质在液体中的扩散系数溶质在液体中的扩散系数DL10-5cm2/s溶质在气体中的扩散系数溶质在气体中的扩散系数Dg10-1cm2/sDL Dg当采用液体作流动相时当采用液体作流动相时 B0液体作流动相时可用更细的固定相，液体作流动相时可用更细的固定相，A HPLC柱效比柱效比GC要高要高23个数量级个数量级操作条件对柱效的影响（1） u/cm.s-1 H-u H-u 曲线曲线载气线速度（流速）的影响 最佳流速：最佳流速：u=(B/C)1/2 实用最佳流速实用最佳流速

19、：比最佳流速更快：比最佳流速更快 A与流速无关与流速无关 B/u：当流速小时，对：当流速小时，对H的大小起主导作用的大小起主导作用 Cu：当流速大时，对：当流速大时，对H的大小起主导作用的大小起主导作用容量因子k的影响 不同组分不同组分k不同不同，测出的柱效不同测出的柱效不同 在气相传质阻力相中，在气相传质阻力相中，k ，Cg 理论上说理论上说k越小柱效越高，越小柱效越高，实际不可取实际不可取 在液相传质阻力相中，在液相传质阻力相中，k ，Cl先先， 后后当当k=1时，时，最大。最大。 希望希望k在一个合适的范围内，通过改变柱温、固定相、在一个合适的范围内，通过改变柱温、固定相、柱型参数等可实

20、现。柱型参数等可实现。柱温的影响 间接影响、十分复杂间接影响、十分复杂 对对k影响，对扩散系数影响，从而对柱效产生影响，影响，对扩散系数影响，从而对柱效产生影响，但影响情况难以判断但影响情况难以判断对色谱柱的填充提供理论指导（1） 柱径：柱径越小，固定相越难填充均匀。柱径：柱径越小，固定相越难填充均匀。 柱长柱长L：柱长增加，总塔板数增加，但分离时间将：柱长增加，总塔板数增加，但分离时间将增加。增加。 固定相粒径固定相粒径dp：根据速率方程，粒径减小，：根据速率方程，粒径减小，A项减项减小，小，C项减小，柱效增加。但粒径太小，不易填充项减小，柱效增加。但粒径太小，不易填充均匀，均匀，A项又增大

21、。项又增大。对色谱柱的填充提供理论指导（2） 液膜厚度液膜厚度df：从柱效角度考虑，液膜越薄，柱效越高：从柱效角度考虑，液膜越薄，柱效越高（根据速率方程），但允许的进样量减小。固定液与（根据速率方程），但允许的进样量减小。固定液与担体的配比一般在担体的配比一般在5:100-25:100之间，但现在更低配之间，但现在更低配比的固定相也应用广泛。比的固定相也应用广泛。 更重要的是更重要的是：不同沸点的物质，应采用不同配比的：不同沸点的物质，应采用不同配比的固定相固定相。n 影响谱带扩张的其他因素 非线性分配色谱非线性分配色谱 载体表面活性吸附中心造成的拖尾载体表面活性吸附中心造成的拖尾 柱外效应柱

22、外效应色谱柱外引起色谱峰扩展的因素：如进样系色谱柱外引起色谱峰扩展的因素：如进样系统及进样方式、系统连接管、检测器死体积，统及进样方式、系统连接管、检测器死体积，检测器响应时间常数等因素引起的谱带宽展。检测器响应时间常数等因素引起的谱带宽展。n 速率理论方程式的偶合式 H=(1/A+1/Cgu)-1+B/u+Clu A= (1/A+1/Cgu)-1为偶合项为偶合项 已被普遍接受已被普遍接受2. 色谱分离基本方程对于常规分析工作，一般选用： 选择性系数选择性系数（相对保留值）与（相对保留值）与保留指数保留指数I来评价固定液来评价固定液 有效塔板数有效塔板数N有效有效来评价色谱柱与分离条来评价色谱

23、柱与分离条件件 以以分离度分离度R作为柱的总分离效能指标作为柱的总分离效能指标（1）几个概念选择性系数 定义与相对保留值(ri,s)基本相同 不同之处在于选择性系数是两个相邻峰的调整保留值之比（后峰比前峰，1），而不是被测物与标准物质的调整保留值之比（可小于1） 它是评价固定液选择性的指标。选择性系数越大，该柱对此相邻峰的分离越好。 几个概念有效塔板数N有效 在气相色谱中在气相色谱中，通常用有效塔板数，通常用有效塔板数N N有效和有效和有效塔板高度塔板高度H有效来评价柱子的分离效能，它扣除来评价柱子的分离效能，它扣除了死体积对分离的影响，更好地反映了柱子的了死体积对分离的影响，更好地反映了柱子

24、的实际分离效能。实际分离效能。 柱效越高，该柱的分离能力越好。柱效越高，该柱的分离能力越好。22/122/154.554.5YtYttRMRN有效几个概念分离度R)(2121)1()2(YYttRRR)(21)2(2/1)1(2/1)1()2(2/1YYttRRR(2) 色谱分离基本方程（Purnell方程）kttkmmmRuuttuLtuLtMRMSMSSRMMSR111，n 公式推导公式推导)1)(1(41/114114141161)2()2()1()2()1()2(21212kknRtttttknRttktnRRkkkYYYtnYYtnkttRMRRRRRMRRMR理论的定义中带入，设（

25、3）色谱分离基本方程的启示要改善物质对的分离（提高要改善物质对的分离（提高R），即提高两相），即提高两相邻物质的分离度，可以采取以下措施：邻物质的分离度，可以采取以下措施： 提高柱效提高柱效N 提高选择性系数提高选择性系数 增大容量因子增大容量因子kkknR114N的影响，如何提高N？ 分离度分离度R与理论塔板数与理论塔板数N的平方根成正比关系，的平方根成正比关系，增加塔板数，有利于提高分离度。增加塔板数，有利于提高分离度。 增加柱长可增加增加柱长可增加N，改善分离，但分析时间将，改善分离，但分析时间将大大延长，峰产生扩展。大大延长，峰产生扩展。 减小塔板高度减小塔板高度H： 根据根据速率方程

26、速率方程的启示制备一根性能优良的色谱柱是的启示制备一根性能优良的色谱柱是十分重要的。十分重要的。 根据根据速率方程速率方程选择合适的色谱条件同样有效。选择合适的色谱条件同样有效。K的影响，如何改变k？ 分离度与容量因子有关，容量因子越大，分离越好。分离度与容量因子有关，容量因子越大，分离越好。 k 1 3 5 7 9 11 13 k/k+1 0.50 0.75 0.83 0.88 0.90 0.92 0.93 1.00 但当容量因子大于但当容量因子大于10，k/(k+1)的改变不大，而分析的改变不大，而分析时间将大大延长。因此，时间将大大延长。因此，k的最佳范围是的最佳范围是1k300 低于低

27、于bp100-200 1-3%200-300 低于低于bp100 5-10%100-200 平均平均bp的的2/3 10-15%气体气体 室温室温 15-25% 吸附剂吸附剂沸程范围沸程范围100 程序升温程序升温具体的汽化温度 一般进样方法下，汽化温度比柱温高一般进样方法下，汽化温度比柱温高30-70。 进样量大时高一些好，保证瞬间汽化。进样量大时高一些好，保证瞬间汽化。 保证不可超过试样的分解温度。保证不可超过试样的分解温度。 其它气化温度与具体进样方式有关。其它气化温度与具体进样方式有关。检测器温度 一般大于或等于柱温，具体与检测器种类一般大于或等于柱温，具体与检测器种类有关。有关。进样

28、量 液体试样一般进样量液体试样一般进样量0.1-5l。 气体试样一般进样量为气体试样一般进样量为0.1-10ml。 具体视柱类型，固定液含量（不能超过具体视柱类型，固定液含量（不能超过柱容量）柱容量） 、进样方式、检测器的灵敏度、进样方式、检测器的灵敏度和线性范围等确定。和线性范围等确定。流动相（载气）种类 流动相的种类要视检测器种类确定。流动相的种类要视检测器种类确定。 常用的有氢气（热导用）、氮气（氢火焰常用的有氢气（热导用）、氮气（氢火焰用）、氦气（均可用，但价格较高）。用）、氦气（均可用，但价格较高）。 氢气和氦气适合于快速分析。氢气和氦气适合于快速分析。 氮气做载气峰型较好，柱效较高

29、。氮气做载气峰型较好，柱效较高。固定相种类 三、色谱定性与定量方法1. 色谱定性分析(1) 利用保留值及其规律定性 各物质在一定的色谱条件下均有确定不变的保留值，因此保留值可作为定性指保留值可作为定性指标标。利用纯物对照定性利用文献值对照定性纯物质对照定性 实现方法利用保留时间和保留体积定性 用相对保留值定性 用已知物增加峰高法定性用已知物增加峰高法定性 ,RsRiRsRisiVVttr 应用范围：适用于简单混合物，对该样品已有了解并具有纯物质的情况。 优点：应用简便，不需要其他仪器。 缺点：定性结果的可信度不高。提高可信度的方法：双柱、双体系定性文献值对照定性分析 （GC） 实现方法测定相对

30、保留值ri,s测定保留指数I 优点：无需纯物质；保留指数具有较好的重现性和精密度；只与固定相和柱温有关。只与固定相和柱温有关。 缺点：对结构复杂的物质，缺乏数据。 适用范围：适用于简单混合物，无需纯物质。(2) 与其它仪器或化学方法联合定性 离线联用方式化学法仪器法 在线联用方式化学法仪器法离线联用方式收集方法：GC中一般采用液氮冷阱冷却后收集 应用范围：无标准物时，可对较为复杂的混合物进行定性分析缺点：麻烦在线联用方式用化学方法辅助定性柱前反应柱前反应：在色谱柱前装上预处理柱，带有某些官能团的化合物在预柱中发生物理化学变化，其色谱峰会消失或移动，与反应前色谱图比较，可初步判断试样中含那些官能

31、团。柱后反应柱后反应：在色谱柱后装上型毛细管分流器，将各组分导入官能团试剂反应管，利用官能团反应对组分进行定性。与其它仪器联用定性 混合物经色谱分离后，将各组分直接由接接口口导入其它仪器中进行定性。常用的联用方法有：GC-MS、GC-FTIR、LC-MS 其它仪器相当于色谱仪的检测器。色谱仪的检测器。使用范围：复杂样品的定性。优点：不需要标准物，定性结果可信度高，操作方便。缺点：需要特殊仪器或设备。GC-MS2 色谱定量分析(1) 色谱定量基础 色谱定量分析是基于被测物质的量与峰面色谱定量分析是基于被测物质的量与峰面积成正比积成正比。在一定色谱条件下有：.,是峰面积是绝对质量校正因子其中iii

32、iiAfAfm （2）定量要解决的问题）定量要解决的问题 峰面积的测量和计算 校正因子的测量与计算 色谱定量方法及其应用峰面积的测量与计算 积分仪或色谱工作站积分仪或色谱工作站 简便、速度快，精度高，可达0.2-2%，对小峰及不对称峰的结果准确，是色谱发展趋势。 手动测量与计算手动测量与计算峰高乘半峰宽法：适于对称峰峰高乘峰底宽度法：适于矮宽峰峰高乘平均峰宽法：适于不对称峰峰高乘保留值法：适于狭窄峰，快速简便，常用于工厂控制分析。)2(85. 015. 0YYhA2/12065. 1YhAYhA1.0204RthAn重叠峰的测量切线分峰垂线分峰连线分峰计算机拟合分峰校正因子的测量与计算 相对校正因子相对校正因子 由于绝对校正因子与仪器的灵敏度有关，又由于灵敏度与实验条件相关，且每一检测器的灵敏度都是不同