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文档简介
1、HPLC峰值故障排除指南 HPLC故障排除指南-峰值 峰形问题 峰拖尾 与活性硅醇的相互作用 1.使用超高纯度硅基(硅胶基质)固定相 (见1.1) 2.添加碱性流动相添加剂(如TEA)-超高纯度相则不需要 在固定相中与金属离子螯合 同上 错误的流动相pH值(流动相pH值不当) 1.降低流动相pH值以抑制硅烷醇电离(见1.2) 2.增加缓冲液浓度(见1.2) 玻璃料阻塞(筛板堵塞) 1.倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2) 2.使用串联(在线)过滤器(见1.3、4.2) 柱无效(色谱柱失效) 1.倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2) 2.更换柱(色谱柱) 死体积未清扫(过大) 1.尽量减少连接器数量
2、 2.使用较短的连接管 3.检查所有配件是否紧固 分裂峰 保护柱或分析柱入口(进样)端污染 1.拆下保护柱卡套(卸除保护柱芯)并进行分析-必要时更换保护柱 2.倒冲洗(反冲)分析柱(见5.2) 3.对于顽固残留(强保留污染物),应尝试再生法(对色谱柱进行再生)(见5.2) 4.更换柱 玻璃料阻塞 (筛板堵塞) 1.倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2) 2.使用串联(在线)过滤器(见1.3、4.2) 样品溶剂与流动相不兼容 1.在流动相中注入样品 (用流动相溶解样品) 同时洗脱第二组分 1.注射前使用样品清理(进样前先净化样品) 2.通过改变流动相或柱相(色谱柱固定相) 来改变选择性 柱超载(色谱柱过载) 1.使用更高容量的固定相 2.增加柱的直径(增加色谱柱内径) 3.减少样本(样品)量 柱中通道的形成 (色谱柱内形成通道) 1.更换柱(色谱柱) 2.在建议的色谱柱(色谱柱建议的)pH值范围内操作(见1.5) 柱超载 (色谱柱过载) 1.注入更少量或更稀释的样品溶液(减少进样体积或进一步稀释样品) 2.使用更高容量的固定相 样品溶剂与流动相不兼容 1.在流动相中注入样品(用
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