气相色谱的分离条件选择

1、1柱长的选择柱长的选择 固然增加柱长可使理论塔板数增大，但同时使峰宽加大，分析时间延长。因此，填充柱的柱长要选择适当。过长的柱子，总分离效能也不一定高。一般情况下，柱长选择以使组分能完全分离，分离度达到所期望的值为准。具体方法是选择一根极性适宜，任意长度的色谱柱，测定两组分的分离度，然后根据基本色谱分离方程式，确定柱长是否适宜。 即在其他操作条件不变的条件下，色谱柱长要选择5m左右才能使分离度达R=1.5,组分达到完全分离。2121221)(LLnnRRmmmRRLL587.4)68.05 .1(1)(221212 柱温是一个重要的操作参数，直接影响分离效能和分析速度。提高柱温可使气相、液相传

2、质速率加快，有利于降低塔板高度，改善柱效一但增加柱温同时又加剧纵向扩散，从而导致柱效下降。另外，为了改善分离，提高选择性，往往希望柱温较低，这又增长了分析时间。因此，选择柱温要兼顾几方面的因素。一般原则是：在使最难分离的组分有在使最难分离的组分有尽可能好的分离前提下，采取适当低的柱温，但尽可能好的分离前提下，采取适当低的柱温，但以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。以保留时间适宜，峰形不拖尾为度。具体操作条件的选择应根据实际情况而定。 另外，柱温的选择还应考虑固定液的使用温度，柱温不能高于固定液的最高使用温度，否则固定派挥发流失，对分离不利。 对于宽沸程的多组分混合物，可采用程序升温法，即在分析过程

3、中按一定速度提高柱温，在程序开始时，柱温较低，低沸点的组分得到分离，中等沸点的组分移动很慢，高沸点的组分还停留于柱口附近；随着温度上升，组分由低沸点到高沸点依次分离出来。图19-13是正构烷烃恒温和程序升温色谱图比较。 由图19-13不难看出，采用程序升温后不仅改善分离，而且可以缩短分析时间，得到的峰形也很理想。 5进样量的选择进样量的选择 在实际分析中最大允许进样量应控制在使半峰定基本不变，而峰高与进样量成线性关系。如果超过最大允许进样量，线性关系遭破坏。一般说来，色谱柱越粗、越长，固定液含量越高，容许进样量越大。 气相色谱分析对象是在气化室温度下能成为气态的物质。除少数外，大多数物质在分析

4、前都需要预处理。例如，样品中含有大量的水，乙醇或被强烈吸附的物质，可导致色谱柱性能变坏。一些非挥发性物质进人色谱柱，本身还会逐渐降解，造成严重噪声。还有些物质，如有机酸，极性很强，挥发性很低，热稳定性差。必须先进行化学处理，才能进行色谱分析。 气相色谱法是一种高效、快速的分离分析技术，它可以在很短时间内分离几十种甚至上百种组分的混合物，这是其他方法无法比拟的。但是，由于色谱法定性分析主要依据是保留值，所以需要标准样品。而且单靠色谱法对每个组分进行鉴定，往往不能令人满意。1. 1.用已知纯物质对照定性用已知纯物质对照定性 这是气相色谱定性分析中最方便，最可靠的方法。图19-14是进行对照定性的示

5、意图。这个方法基于在一定操作条件下，各组分的保留时间是一定值的原理。如果未知样品。较复杂，可采用在未知混合物中加入已知物，通过未知物中哪个峰增大，来确定未知物中成分。 当没有待测组分的纯标准样时，可用文献值定性，或用气相色谱中的经验规律定性。（l）碳数规律 大量实验证明，在一定温度下，同系物的调整保留时间的对数与分子中碳，原子数成线性关系，即11lgCnAtr式中A1和C1是常数，n为分子中的碳原子数（n3）。该式说明，如果知道某一同系物中两个或更多组分的调整保留值，则可根据上式推知同系物中其它组分的调整保留值 （2）沸点规律 同族具有相同碳数碳链的异构体化合物，其调整保留时间的对数和它们的沸

6、点呈线性关系，即22lgCTAtbr式中A2和C2均为常数，Tb为组分的沸点（K）。由此可见，根据同族同数碳链异构体中几个已知组分的调整保留时间的对数值，可求得同族中具有相同碳数的其他异构体的调整保留时间。 4.根据保留指数定性根据保留指数定性 保留指数又称Kovasts指数，是一种重视性较其他保留数据都好的定性参数，可根据所用固定相和柱温直接与文献值对照，而不需标准样品。 )(lg)(lg)(lg)(lg1001nrnrnrrxCtCtCtxtnI解 已知n=76.7750.174lg4.373lg0.174lg0.310lg7100 xI即乙酸正丁酯的保留指数为7756。在与文献值对照时，

7、一定要重视文献值的实验条件，如固定液、柱温等。而且要用几个已知组分进行验证。 6与其他方法结合与其他方法结合 气相色谱与质谱、Fourier红外光谱、发射光谱等仪器联用是目前解决复杂样品定性分析最有效工具之一。 气相色谱定量分析是根据检测器对溶质产生的响应信号与溶质的量成正比的原理，通过色谱图上的面积或峰高，计算样品中溶质的含量。1.1.峰面积测量方法峰面积测量方法 峰面积是色谱图提供的基本定量数据，峰面积测量的准确与否直接影响定量结果。对于不同峰形的色谱峰采用不同的测量方法。（l）对称形峰面积的测量峰高乘半峰宽法 理论上可以证明，对称峰的面积 A=1065hW12 （2）不对称峰面积的测量一

8、峰高乘平均峰宽法 对于不对称峰的测量如仍用峰高乘半峰宽，误差就较大，因此采用峰高乘平均峰宽法。 A=1/2h（W0.15W0.85） 式中W0.15和 W0.85分别为峰高015倍和085倍处的峰宽。 （l） 定量校正因子 其定义色谱定量分析是基于峰面积与组分的量成正比关系。但由于同一检测器对不同物质具有不同的响应值，即对不同物质，检测器的灵敏度不同，所以两个相等量的物质得不出相等峰面积。或者说，相同的峰面积并不意味着相等物质的量。因此，在计算时需将面积乘上一个换算系数，使组分的面积转换成相应物质的量，即 wi=fiAi 式中Wi为组分i的量，它可以是质量，也可以是摩尔或体积（对气体）；Ai为

9、峰面积，fi为换算系数，称为定量校正因子。它可表示为 fi=Wi/Ai 定量校正因子定义为：单位峰面积的组分的量。检测器灵敏度Si与定量校正因子有以下关系式 fi=1/Si （2）相对定量校正因子 由于物质量wi不易准确测量，要准确测定定量校正因子fi不易达到。在实际工作中，以相对定量校正因子fi代替定量校正因子fi。 相对定量校正因子fi定义为：样品中各组分的定量校正因子与标准物的定量校正因子之比。用下式表示 siissiimAmAmfmfmf)()()(式中m和A分别代表质量和面积，下标i和s分别代表待测组分和标准物。一般来说，热导池检测器标准物用苯，火焰离子检测器用正庚烷。fi(m)表示

10、相对质量校正因子，由于进入检测器的物质量也可以用摩尔或体积表示，因此也可用相对摩尔校正因子fi(M)和相对体积校正因子fi(V)表示。 式中Mi和Ms分别为待测组分和标准物的相对分子质量。 isiisisissssiiisiiMMmfMmAMmAAMmAMmMfMfMf)(/)()()()(/4 .22/4 .22)()()(MfMmAMmAAMmAMmVfVfVfiisisissssiiisii（3）相对校正因子的测量 凡文献查得的校正因子都是指相对校正因子，可用fM,fm分别表示摩尔校正因子和质量校正因子（通常把相对二字略去）。 表19-9列出一些化合物的校正因子。由于以体积计量的气体样品

11、，lmol任何气体在标准状态下其体积都是224L（升），所以摩尔校正因子就是体积校正因子。相对校正因子只与试样、标准物质和检测器类型有关，与操作条件、柱温、载气流速、固定液性质无关。 校正因子测定方法：准确称量被测组分和标准物质，混合后，在实验条件下进样分析（注意进样量应在线性范围之内），分别测量相应的峰面积，然后通过公式计算校正因子，如果数次测量数值接近，可取其平均值。（l l）归一化法）归一化法 归一化法是气相色谱中常用的一种定量方法。应用这种方法的前提条件是试样中各组分必须全部流出色谱柱，并在色谱图上都出现色谱峰。当测量参数为峰面积时，归一化的计算公式为 式中Ai为组分i的峰面积，fi为

12、组分i的定量校正因子。 归一化的优点是简便准确，当操作条件如进样量、载气流速等变化时对结果的影响较小。 适合于对多组分试样中各组分含量的分析。 %1002211nniiifAfAfAfAx（2 2）外标法）外标法 外标法是所有定量分析中最通用的一种方法，即所谓校准曲线法。外标法简便，不需要校正因子，但进样量要求十分准确，操作条件也需严格控制。它适用于日常控制分析和大量同类样品的分析。（3 3）内标法）内标法 为了克服外标法的缺点，可采用内标校准曲线法。这种方法的特点是：选择一内标物质，以固定的浓度加入标准溶液和样品溶液中，以抵消实验条件和进样量变化带来的误差。内标法的校准曲线（见图19-16）是用AiAs对xi作图，其中As为内标物的峰面积。通过原点的直线可表示为 %100siiiAAKx 对内标物的要求是： 样品中不含有内标物质； 峰的位置在各待测组分之间或与之相近；稳定、易得纯品； 与样品能互溶但无化学反应； 内标物浓度恰当，使其峰面积与待测组分相差不太大。isiissiimmfmmffK思考题 1. 气相色谱的基本设备包括那几部分,各有什么作用? 2试以塔极高度H做指标讨论气相色谱操作条件的选择。 3. 试述速率方程式中A、B