实验6-胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响

1、掌握血糖掌握血糖(blood sugar)的测定方法及的测定方法及 激素激素(hormone)对对血糖浓度的影响。血糖浓度的影响。了了解血糖测定的临床意义。解血糖测定的临床意义。机体的血糖水平受多种激素的调节而维持稳定机体的血糖水平受多种激素的调节而维持稳定影响血糖的激素分为两类：影响血糖的激素分为两类：降低血糖的激素：胰岛素降低血糖的激素：胰岛素(insulin)升高血糖的激素：肾上腺素升高血糖的激素：肾上腺素(adrenaline)、胰升糖素、胰升糖素、 糖皮质激素和生长激素糖皮质激素和生长激素 血浆血浆(plasma)：全血经抗凝处理后得到的液体成分，：全血经抗凝处理后得到的液体成分，

2、含有凝血因子、纤维蛋白原等含有凝血因子、纤维蛋白原等血清血清(serum)：全血凝固后析出的液体，：全血凝固后析出的液体， 不含纤维蛋白原不含纤维蛋白原620 nm测定待测血样的吸光度测定待测血样的吸光度(A)与同样处理的葡萄糖标准溶液比较与同样处理的葡萄糖标准溶液比较(标准管法标准管法)即可求得血样中葡萄糖的含量。即可求得血样中葡萄糖的含量。酸性、加热酸性、加热 -3 H2O羟羟甲基糠醛甲基糠醛邻甲苯胺邻甲苯胺 醛亚胺（蓝色）醛亚胺（蓝色）葡萄糖葡萄糖(glucose)2、血样的采集、血样的采集 1）心脏内取血）心脏内取血5ml，加入抗凝剂（草酸钠）【胰，加入抗凝剂（草酸钠）【胰-1、肾、肾

3、-1】 2）皮下注射）皮下注射 胰胰岛素岛素0.5ml/kg（2U/kg），），1小时后小时后 1%肾上腺素肾上腺素0.4ml/kg，半小时后，半小时后 3）心脏内取血）心脏内取血5ml，加入抗凝剂【胰，加入抗凝剂【胰-2、肾、肾-2】1、动物的准备、动物的准备 家兔两只，禁食一晚。标记后，测量体重并记录。家兔两只，禁食一晚。标记后，测量体重并记录。4、邻甲苯胺法测定血糖浓度、邻甲苯胺法测定血糖浓度 1）取大试管，按）取大试管，按Page78表格添加试剂表格添加试剂 2）混匀各管，沸水浴中加热）混匀各管，沸水浴中加热10min后取出，流水冷却。后取出，流水冷却。 3）用空白管校正吸光度零点，读

4、取各管）用空白管校正吸光度零点，读取各管620nm的的吸光度。吸光度。3、血浆的制备、血浆的制备 血样采集后，血样采集后，2000rpm离离心心5min，取上清。，取上清。空白空白对照对照注射激素前注射激素前注射激素后注射激素后胰岛素组胰岛素组胰胰-1胰胰-2肾上腺组肾上腺组肾肾-1肾肾-2G胰胰-1 G胰胰-2G肾肾-1 G肾肾-2A测定：测定：m胰胰-1、m胰胰-2、m肾肾-1、m肾肾-2 A测定测定 m标准标准 A标准标准血糖浓度血糖浓度 = 1000 V测定测定 180 g/mol1、邻甲苯胺试剂中含冰乙酸，、邻甲苯胺试剂中含冰乙酸，谨防腐蚀分光光度计谨防腐蚀分光光度计2、分光光度计的

5、使用方法、分光光度计的使用方法3、微量移液器的使用、微量移液器的使用4、离心机使用前必须配平：质量配平、离心机使用前必须配平：质量配平&位置配平位置配平5、电磁炉使用前、电磁炉使用前10min打开；绝对不可干煮；打开；绝对不可干煮； 加加热完成后，用夹子取出试管，绝对不可用手拿热完成后，用夹子取出试管，绝对不可用手拿6、兔子的抓取、固定、心脏采血、皮下注射方法、兔子的抓取、固定、心脏采血、皮下注射方法1、打开电源，调节旋钮至需要的波长，预热、打开电源，调节旋钮至需要的波长，预热2030min2、1档（空白管），档（空白管），T模式下调模式下调100%，显示，显示“Blank”、“100

6、”3、拉杆拉至、拉杆拉至1.5档，档，T模式下调模式下调0%，显示，显示“0.00”4、换到、换到A模式，拉至模式，拉至2、3、4档，读取各个样品的吸光度档，读取各个样品的吸光度拉杆，拉杆，0-4档档样品池样品池读数读数波长波长毛面毛面光面光面1、分清光面、毛面。手应接触毛面，光线从光面通过、分清光面、毛面。手应接触毛面，光线从光面通过2、用溶液润洗、用溶液润洗2-3次，装至次，装至2/3至至4/5体积体积3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面、粗纸吸水、柔纸擦亮光面比色杯比色杯血糖升高血糖升高 1、糖尿病、糖尿病 2、内分泌疾病：甲亢、肾上腺皮质功能亢进、嗜铬细胞瘤、内分泌疾病：甲亢、肾上腺皮质功能亢进、嗜铬细胞瘤、 胰高血糖素瘤胰高血糖素瘤 3、妊娠高血糖、妊娠高血糖 4、胰腺疾病：坏死性胰腺炎、胰腺手术、原发胰腺癌、胰腺疾病：坏死性胰腺炎、胰腺手术、原发胰腺癌 5、应激性高血糖、应激性高血糖血糖降低血糖降低 1、胰岛、胰岛 细胞瘤或增生细胞瘤或增生 2、内分泌疾病：垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减低、内分泌疾病：垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减低 3、肝源性低血糖，各种肝病致肝功能衰竭、肝源性低血糖，各种肝病致肝功能衰竭测试时间：测试时间：515