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文档简介
1、实验一、显微镜油镜的使用和保养 实验目的 1. 学会显微镜油镜的使用与保养方法。2. 学会认识细菌的基本形态与特殊结构。油镜的原理 由于油镜的透镜很小, 自标本玻片透过的光线因介质密度(从载物玻片到空气,再进入油镜)的不同,部分光线因发生折射而散失(如下图 A A ),不能进入透镜, 致使射入的光线较少, 物像呈现不清。 当在油镜与标本片之间加镜油后(镜油的折光率为 1.515和玻璃的折光率 1.52相近似),从而减少了光线通过标本片与油镜之间空气(折光率 1.0)引起的散光现象,增加了进入透镜的光线(如下图中 CC ),使视野的明亮度加强,物像可看清楚,此外,加用镜油能增加油镜的数值孔径,提
2、高显微镜分辨能力。油镜加香柏油的原理 实验内容 (一)显微镜的使用材料显微镜,镜油(香柏油),擦镜纸,玻片标本。方法1检查:使用前必须对所用显微镜进行详细检查,如发现问题应及时向老师报告。2调光:检查未染色标本时,以弱光线为宜,此时可将集光器下降或缩小光栅,检查染色标本时,以光线强为宜,此时应适当升高集光器或将光栅打开。3标本观察:将标本置于载物台上,先用低倍镜观察。用粗调节器调至看出物象后,再调节细调节器,使物像更加清晰。在换高倍镜观察前,鉴于高倍镜视野范围比低倍镜小,故须将被观察内容移至视野中央后再换之。(二)油镜的使用和保养1油镜头的识别:油镜头上一般刻有100×、或 Oil
3、、油等标记。2油镜的使用方法:(1)将显微镜直立于桌上,不要扳动倾斜关节,使载物台保持水平。(2)对光:用低倍镜对光,检查染色标本时光线宜强。要抬高集光器,放大光圈。(3)滴加香柏油一小滴于染色标本片上,将标本置于载物台上,移置待检部分于接物镜下。(4)换用油镜,眼睛从侧面看着物镜,转动粗调节器,使镜筒下降至油镜头浸入镜油并几乎接触标本片。(5)左眼看接目镜,一面观察,一面缓慢转动粗调节器,使镜筒上升,直到观察到模糊的物像时,再适当转动细调节器,使物像完全清晰,即可正式观察。注意 切不可在眼看目镜时向下转动粗调节器,以免压碎标本片及损坏镜头。观察标本时养成左眼看接目镜的习惯。(三)油镜的保养1
4、标本观察完毕,向上转动粗调节器将镜筒提起,取下标本,用擦镜纸将镜头上的油擦净。若油已干,可用擦镜纸沾少许二甲苯擦去油迹,随即用擦镜纸擦去二甲苯。因二甲苯能溶解粘固透镜的胶质,如不擦去二甲苯,日久后镜片会脱落。2将物镜转成“八字形,以免损坏油镜。降低集光器,竖起反光镜,将显微镜放入镜箱。3填写显微镜使用登记卡。注意事项:1细调节器是显微镜最精细、最脆弱的机械部分,每旋转一周使镜筒上升或下降 0.1 毫米,只能做往返回转,不要向单一方向转动数周。2观察滴片标本时,载物台应放平,注意勿将物镜镜头接触粪液。3观察封片标本时,勿使镜头与盖玻片接触,以免压坏标本或损伤镜头。4观察血涂片标本时,必须按一定顺
5、序,逐个视野检查,以免遗漏。实验二、细菌的形态检查细菌在适宜的环境条件下,保持着一定的形态。细菌的正常形态基本上分为球菌、杆菌和螺形菌三类。球菌按其分裂方向与分裂后排列情况又分成双球菌、链球菌、四联球菌、八迭球菌、葡萄球菌等;杆菌也有球杆菌、链杆菌、分枝杆菌、棒状杆菌等之分;螺形菌中菌体仅有一个弯曲,呈逗点状者叫弧菌,菌体有 2 3个回转,且较坚硬者为螺菌。细菌除具有基本结构外,某些细菌在一定条件下尚具有某些特殊结构,如荚膜、鞭毛、芽胞、菌毛。细菌特殊结构除菌毛须用电镜观察外,荚膜、鞭毛、芽胞均可用光镜观察。材料葡萄球菌、链球菌、脑膜炎双球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌示教片。鞭毛(伤寒杆菌)、荚膜(肺炎链球菌)、芽胞(破伤风杆菌)示教片。方法1. 细菌基本形态的观察注意细菌菌体大小、形状、排列特点及染色性。球菌:葡萄球菌革兰染色标本片。杆菌:大肠埃希菌标本片。螺形菌:霍乱弧菌标本片。2. 特殊结构的观察荚膜:肺炎链球菌荚膜标本片。注意荚膜的厚薄。芽胞:破伤风梭菌芽胞标本片。注意
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