试验五血液分析仪的使用和结果分析

1、实验五血液分析仪的使用和结果分析Usage and Result Assessment of Hematology Analyzer实验原理电阻抗型血细胞分析仪原理： 仪器的小孔管有内外两个电极， 在接通电源的电解质溶液中， 内、外电极之间形成一个稳定的电流。 细胞悬液经负压吸引通过小孔管上的宝石计数小孔时， 由于血细胞具有相对非导电的特性， 使电路中小孔感应区内的电阻突然增大， 引起瞬间电压变化而形成脉冲信号。 这些脉冲信号经过放大、阈值调节、甄别、整形、计数及自动控制保护系统，完成对血细胞进行计数和体积的测定， 自动打印出结果。 脉冲信号的强弱反映细胞体积的大小， 脉冲信号的多少反映细胞的

2、数量。仪器的光电比色装置可测定血红蛋白浓度。1红细胞分析（1）细胞计数：与血小板在同一通道进行检测。采用阈值调节和浮动界标法区分红细胞与血小板。通道内的细胞介质为等渗、近中性的电解质溶液。（2）血红蛋白测定：在白细胞通道内进行。红细胞被溶血剂破坏后，释放出的血红蛋白转化为血红蛋白衍生物， 吸收峰在 530nm 550nm 之间，仪器内有流动比色装置进行测定。因 ICSH 推荐使用 HiCN 法进行仪器矫正，故采用的溶血剂中多含氰化物， 形成氰化血红蛋白； 为避免环境污染， 也可以采用不含氰化物的溶血剂，如 SLS-Hb 法。（3）红细胞参数分析： MCV 、 RDW ：仪器取自近万个红细胞体积

3、的检测数据，由统计学运算得到的平均值和变异系数。 HCT ：MCV 与红细胞计数的乘机。 MCH 、MCHC ：计算方法与手工法相同。2白细胞分析（1）白细胞计数：白细胞通道有滴加溶血素的装置，破坏红细胞后方可进行白细胞计数。（2）白细胞分群：溶血素在破坏红细胞的同时，也改变了白细胞膜的通透性，使细胞内液外溢而引起了白细胞体积的改变， 此时细胞体积的大小取决于细胞内颗粒的含量和细胞核的大小。将白细胞分成 2 群 3 群，可计算出各自百分率及绝对值：小细胞群： 30fl 90fl ，以淋巴细胞为主。因淋巴细胞核较小，细胞质最少。中间细胞群： 90fl 160fl ，主要包括嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒

4、细胞、单核细胞。嗜酸性粒细胞、 嗜碱性粒细胞颗粒较淋巴细胞丰富； 单核细胞核体积最大但胞质颗粒并不丰富。大细胞群： 160fl 450fl，以中性粒细胞为主。中性粒细胞颗粒最丰富。3血小板分析（1）血小板计数：与红细胞在同一通道进行检测。（2）血小板参数分析： MPV 和 PDW ：原理同 MCV 和 RDW 。 PCT 是 PLT 和 MPV 的乘积4血细胞体积分布直方图：血细胞分析仪的微电脑以各种细胞的体积为横坐标，相应大小的细胞所占百分率为纵坐标绘制成的 3 个拟合曲线。分别反映各类血细胞的群体分布情况。试剂与器材校正后的电阻抗型血细胞分析仪、配套试剂和消耗品（样品杯、抗凝管、采血器材、

5、消毒纱布或纸巾） 。操作步骤1启动仪器、准备器材。2采血、稀释 毛细血管血和静脉血都可使用，采血方法同第一章实验 1，抗凝剂首选 EDTA-K 2 。毛细血管血可随时进行预稀释，也可先转移到盛有抗凝剂的带盖容器中等待集中测定。 如使用静脉血测定， 多采用机内自动稀释， 测定前需注意转换仪器的测定模式。3上机测定，具体的仪器按说明书操作。仪器将自动对标本进行测试并打印结果。4记录结果、关机。注意事项1确认仪器在正常工作状态（1）稀释液空白计数各项指标应达到说明书要求。（2）测定低、中、高定值的全血质控标本或单项指标质控标本时，其结果应在 X2SD 之内，或质控图处于质控状态。（3）检测标本时，仪

6、器计数时间在规定范围内，无堵孔现象。防止堵孔的措施有采血顺利，及时混匀。防止消毒棉或纸巾上的纤维物质混入血液中。保证稀释液清洁无污染。疑为冷凝集的标本，可在37温箱温育后测定。2坚持检查结果审核复查制度 对已确诊或怀疑血液病、 发热待查患者的标本，无论检查参数及直方图是否正常， 均应进行血涂片的显微镜检查。 对白细胞计数和分类异常的标本、血小板严重减少或显著增加的标本，也应进行复查。3严格按照操作手册使用仪器并作好仪器使用登记。4定期保养仪器。参考范围仪器型号不同， 所提供的参数数量和直方图的图形也不尽相同。 但各项参数的数值（见表 2-9）与手工检测结果差异不大。表 2-9血细胞自动分析仪提

7、供的参数和直方图（以成人为例）项目（英文缩写）参考值报告方式白细胞数 (WBC)410（静脉血 3.59.5）×109/L红细胞数 (RBC)M：4.0 5.5；F：3.54.0×1012/L血红蛋白 (Hb or HGB)M：120 160； F： 110150g/L血红细胞比容 (HCT or PCV)M：0.4 0.5；F：0.3.70.48L/L平均红细胞体积（ MCV ）80 100fl平均红细胞血红蛋白含量（MCH ）27 31pg平均红细胞血红蛋白浓度（MCHC ）320 360g/L血小板数（ PLT or Plt）150 350×109/L小细胞

8、或淋巴细胞百分比20 40（ W SCR or lymph ）大细胞或中性粒细胞百分比50 70（ W-LCR or Gran ）中等大小细胞（单核细胞+嗜酸<10+嗜碱粒细胞）百分比 W-MCRor Mid （ M+E+B ）小细胞或淋巴细胞绝对值0.84.0×109/L（ W-SCC or lymph# ）大细胞或中性粒细胞绝对值W-LCC or Gran#中等大小细胞（单核细胞+嗜酸+嗜碱粒细胞）绝对值（ W-MCC or Mid# ）红细胞体积分布宽度（ RDW ）血小板比容（ PCT）平均血小板体积（MPV ）血小板体积分布宽度（PDW ）白细胞体积分布直方图红细胞体

9、积分布直方图血小板体积分布直方图2.07.0×109/L<1.0×109/L14.5 15.5%L/L6.813.6fl15.5 18.1%结果分析1红细胞参数的变化 意义同前面章节。血细胞分析仪还可提供反映红细胞彼此之间体积差异程度的指标 RDW ，其意义在于帮助鉴别缺铁性贫血和轻型珠蛋白合成障碍性贫血：前者 RDW 增大而后者可以正常，可能性各占 100%及 88%。早期诊断缺铁性贫血： RDW 升高早于 MCV 的下降。贫血形态学分类： Bessman根据 MCV / RDW 可将贫血分为 6 类（表 2-10），对贫血的鉴别诊断有一定价值。表 2-10 Bes

10、sman 的贫血形态学分类类型MCVRDW常见疾病小细胞均一性贫血正常轻型珠蛋白合成障碍性贫血、慢性疾病（感染、尿毒症、肿瘤、类风湿性关节炎等）小细胞非均一性贫血缺铁性贫血、慢性失血性贫血、铁粒幼细胞贫血正细胞均一性贫血正常正常再生障碍性贫血早期、 MDS、急性失血性贫血和溶血性贫血正细胞非均一性贫血正常早期缺铁性贫血、营养性混合性贫血大细胞均一性贫血正常部分再生障碍性贫血、溶血性贫血、甲状腺机能低下大细胞非均一性贫血巨幼细胞贫血、免疫性溶血性贫血2白细胞参数的变化 如白细胞检查各项参数都正常，可直接报告，无须复查血涂片。 白细胞计数异常， 临床意义同手工计数， 但白细胞分群并不能真正代表白细

11、胞分类结果。仪器出现报警信号时仍需手工复查。3血小板参数的变化 血小板计数见第四章实验四。血小板其他参数中临床价值较大的指标为 MPV 和 PDW，是判断骨髓生成巨核细胞和血小板能力的重要依据。 MPV 的参考值并非在一个统一的范围。 Bessman 研究表明，血小板数与 MPV 值呈非线性负相关。血小板减少紫癜病人血小板持续减少伴 MPV 下降和 PDW 上升提示骨髓衰竭、预后不良。另外，血标本的干扰如：血小板聚集，可导致血小板计数减少，MPV 增大。红细胞碎片造成血小板计数增多。小红细胞，造成血小板计数增多，MPV 及 PDW 增大。4血细胞体积分布直方图（1）白血细胞体积分布直方图：白细

12、胞直方图的变化，可以评价血液中白细胞群体的变化， 但缺乏特异性，不同种类的白细胞增多或减低可使白细胞直方图产生相似的变化。 因此，异常白细胞直方图只能提示白细胞分群之间的比例变化或可能出现的异常细胞（表2-11），具体诊断时必须用显微镜复查血液涂片。更多的是作为检验医师进行室内质量控制的依据之一。表 2-11影响白血细胞体积分布直方图图形改变及出现警报信号的原因分析警告信号出现位置可能的原因直方图改变R0或R1淋巴细胞左侧血小板聚集、巨大血小板、疟原虫、有核红细胞、不溶解红细胞、异常淋巴细胞、冷球蛋白等。R2淋巴细胞和单异型淋巴细胞，异常淋巴细胞，原幼细胞、个核细胞之间浆细胞，嗜酸性粒细胞，嗜

13、碱性粒细胞等R3单个核细胞和未成熟细胞，异常细胞，嗜酸性粒细胞等粒细胞之间R4粒细胞右侧粒细胞增多症RM多个区域以上多种因素同时出现（2）红细胞直方图：红细胞直方图的临床应用价值不同于白细胞直方图，对指导临床医师进行贫血的鉴别诊断和疗效观察意义较大。不同类型的贫血直方图形峰的位置、峰低的宽度、峰顶的形状表现不同，根据直方图形的不同，对不同类型的贫血进行鉴别诊断； 在贫血的治疗过程中通过观察红细胞直方图是否出现峰顶移动， 是否可出现双峰现象来进行治疗效果的观察。但应明确，因红细胞平均寿命约 120d，故而贫血有效治疗后出现的双峰现象可持续较长时间。（3）血小板直方图：血细胞自动分析仪根据血小板体

14、积的大小和离散情况表现出不同的直方图，其范围主要分布在 2fl-30fl 之间。影响血小板直方图的因素有：红细胞碎片：可干扰血小板直方图，使其出现异常。血小板聚集：直方图显示峰左侧起点较高， 血液涂片上可见聚集成堆的血小板。 小红细胞干扰：直方图显示峰的右侧离横坐标较高， 呈拖尾状，血液涂片上可见较多的小红细胞。血小板体积异常缩小：直方图显示峰左移， MPV 偏小，提示血样中以小血小板为主。实验评价1血细胞分析仪可分为电阻抗型、光电型、光散射型、电容型等。目前临床实验室应用最为广泛的仪器为电阻抗型，主要完成红细胞、 血小板各项参数的检测及白细胞计数及三部法分类。可进行五部法白细胞分类的仪器有：容量、电导、光散射型，阻抗与射频联合白细胞分类法，激光与细胞化学技术联合白细胞分类计数和多角度偏振光散射白细胞分类技术。其中电阻抗型血液分析仪在临床应用范围最广。2本法具有标