已阅读5页，还剩10页未读， 继续免费阅读
版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领
文档简介
1、出血性大肠杆菌O157：H7单克隆抗体的制备及其性质鉴定83050243 张婷婷指导老师 李岩松 出血性大肠杆菌（EHEC）是水源性及食源性肠道致病菌，其中O157：H7血清型危害最大，它能感染动物和人，引起人出血性结肠炎、血栓性血小板紫癜及溶血性尿路综合症等。图1.大肠杆菌O157实验方法：实验方法：1. EHEC O157 Eae-Stx1/2B抗原免疫小鼠，测定小鼠血清抗体；2.PEG法融合细胞；3.选择培养基筛选杂交瘤细胞；4.腹水诱生法制备单抗；5.单抗性质鉴定。技术路线血清效价测定细胞融合融合细胞的筛选制备单抗单抗性质鉴定1.血清抗体效价 小鼠经4次免疫后 ，间接ELISA方法检测
2、血清抗体，抗体效价均达1:10 000以上 ，达到细胞融合的实验要求。2.细胞融合结果细胞融合率达83%，其中7孔为强阳性孔。图2.细胞融合率27%3.杂交瘤细胞筛选 经 3 次克隆筛选后，获得1株分泌抗出血性大肠杆菌O157抗体的杂交瘤细胞株2H9。 4.抗体亚类鉴定 按Sigma公司亚类鉴定试剂盒说明进行鉴定,2H9细胞株单克隆抗体的亚类为lgG2b.5.单抗稳定性 2H9细胞株连续10次传代培养后,上清检测效价表明，2H9细胞株仍能稳定分泌单克隆抗体。6.亲和力测定 2H9细胞株单抗的亲和常数为: 2.9106 。7.单抗特异性 8.纯化前后腹水效价抗体稀释倍数左图.腹水效价测定； 右图.纯化腹水效价P/N值实验结论v1.血清抗体效价达1：10 000以上；v2.PEG法细胞融合率为83%；v3.筛选出一株稳定分泌IgG2b亚类抗体 的杂交瘤细胞株2H
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
评论
0/150
提交评论