2012届高考生物二轮复习 专题八第1讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用课件

1、2012届高考生物二轮复习课件：专题八 生物技术实践 第1讲 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用(2011江苏生物江苏生物，3)下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是 ()。A腐乳制作所需要的适宜温度最高腐乳制作所需要的适宜温度最高B果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵C使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和和RNA第第1讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的

2、应用一、理解能力一、理解能力1.解析解析果酒制作用的是酵母菌，酵母菌发酵时，最适温度在果酒制作用的是酵母菌，酵母菌发酵时，最适温度在1825 ；制果醋；制果醋时用到的醋酸菌是一种好氧菌，最适生长温度为时用到的醋酸菌是一种好氧菌，最适生长温度为3035 ；制腐乳时主要用的；制腐乳时主要用的菌种是毛霉，其最适温度在菌种是毛霉，其最适温度在1518 ；酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有细胞壁、；酵母菌、醋酸菌和毛霉都具有细胞壁、核糖体、核糖体、DNA和和RNA，故，故D正确。正确。答案答案D(2010北京理综北京理综，1)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是 ()

3、A让发酵装置接受光照让发酵装置接受光照 B给发酵装置适时排气给发酵装置适时排气C向发酵装置通入空气向发酵装置通入空气 D将发酵装置放在将发酵装置放在45 处处解析解析本题主要考查果酒制作的相关知识。本题主要考查果酒制作的相关知识。A项，制作果酒所使用的菌种是酵母项，制作果酒所使用的菌种是酵母菌，酵母菌的生长与光照无直接联系；菌，酵母菌的生长与光照无直接联系；B项，在发酵过程中会产生项，在发酵过程中会产生CO2，因而要，因而要给发酵装置适时排气；给发酵装置适时排气；C项，酵母菌发酵是在无氧条件下进行的，因而不能向装项，酵母菌发酵是在无氧条件下进行的，因而不能向装置中通入空气；置中通入空气；D项，

4、酵母菌进行酒精发酵时一般将温度控制在项，酵母菌进行酒精发酵时一般将温度控制在1825 。答案答案B2.(2011海南生物海南生物，2)关于酵母菌的叙述，错误的是关于酵母菌的叙述，错误的是()。A酵母菌既含有核基因，又含有线粒体基因酵母菌既含有核基因，又含有线粒体基因B酵母菌无氧呼吸的终产物经主动运输运到细胞外酵母菌无氧呼吸的终产物经主动运输运到细胞外C培养液中酵母菌的种群数量在培养早期呈培养液中酵母菌的种群数量在培养早期呈“J”型增长型增长D碳源充足和不充足的培养液中酵母菌种群的碳源充足和不充足的培养液中酵母菌种群的K值不同值不同解析解析酵母菌属于真核生物，既含有核基因，线粒体中又含有质基因；

5、酵母菌属于真核生物，既含有核基因，线粒体中又含有质基因；酵母菌无氧呼吸的终产物是酵母菌无氧呼吸的终产物是CO2和酒精，两者均通过自由扩散运出细胞；和酒精，两者均通过自由扩散运出细胞；用培养液培养酵母菌的早期，资源和空间充足，酵母菌的种群数量呈用培养液培养酵母菌的早期，资源和空间充足，酵母菌的种群数量呈“J”型增长；碳源充足的培养液中酵母菌种群的型增长；碳源充足的培养液中酵母菌种群的K值大于碳源不充足的培养值大于碳源不充足的培养液中酵母菌种群的液中酵母菌种群的K值。值。答案答案B3.(2011课标全国卷课标全国卷，39)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成有些细菌可分解原油，从而消除由原油

6、泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答问题。菌株。请回答问题。(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于_培养基。培养基。(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_和和_。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围

7、分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力明该菌株的降解能力_。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、菌、_和和_。无菌技术要求实验操作应在酒精灯。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。4.解析解析(1)从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，使用的从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株，使用的培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这种营养成培养基应是以原油为唯一碳源的选择培养基，通过控制碳源这种营养

8、成分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生长。分，来促进能高效降解原油的菌株的生长，抑制其他微生物的生长。(2)菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。菌种纯化培养时，常采用平板划线法和稀释涂布平板法接种。(3)当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，当固体培养基上长出单菌落后，可通过比较菌落周围分解圈的大小，来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的来判断菌株降解原油能力的大小。一般来说，分解圈越大说明该菌株的降解能力越强，反之则越弱。降解能力越强，反之则越弱。(4)实验室培养微生物的过程中，常用灼烧灭菌法对接种环、接种针

9、、试实验室培养微生物的过程中，常用灼烧灭菌法对接种环、接种针、试管口、瓶口等进行灭菌；用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌；管口、瓶口等进行灭菌；用高压蒸汽灭菌法对培养基、试管等进行灭菌；用干热灭菌法对玻璃器皿用干热灭菌法对玻璃器皿(吸管、培养皿吸管、培养皿)和金属用具等进行灭菌。实验和金属用具等进行灭菌。实验操作应在酒精灯火焰旁进行，因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境，操作应在酒精灯火焰旁进行，因为酒精灯火焰旁可形成一个无菌环境，可防止微生物的污染。可防止微生物的污染。答案答案(1)原油选择原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法平板划线法稀释涂布平板法(3)强强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌

10、火焰干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰(2011山东理综山东理综，34)研究发现柚皮精油和乳酸菌素研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质小分子蛋白质)均有抑菌均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。作用，两者的提取及应用如图所示。(1)柚皮易焦糊，宜采用柚皮易焦糊，宜采用_法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过通过_除去其中的固体杂质。除去其中的固体杂质。(2)筛选乳酸菌筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或时可选用平板划线法或_接种。对新配制的培养基灭接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是菌时所用的设备是_。实验前需对超净工作台进行。实验前需对超净工作台进行_处

11、理。处理。(3)培养基中的尿素可为乳酸菌培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供生长提供_。电泳法纯化乳酸菌素时，。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度_。二、获取信息的能力二、获取信息的能力5.(4)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的明圈。可通过测定透明圈的_来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。效果。解析解析(1)(1)植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。具体采用哪种植

12、物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。具体采用哪种方法要根据植物原料的特点来决定。柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚方法要根据植物原料的特点来决定。柚皮易焦糊，宜采用压榨法提取柚皮精油。压榨过程中得到的糊状液体需用过滤法除去其中固定杂质。皮精油。压榨过程中得到的糊状液体需用过滤法除去其中固定杂质。(2)(2)筛选、纯化培养某一特定微生物时，常用平板划线法或稀释涂布平板法。筛选、纯化培养某一特定微生物时，常用平板划线法或稀释涂布平板法。为防止杂菌的污染，需对器具、培养基等进行消毒或灭菌处理，培养基为防止杂菌的污染，需对器具、培养基等进行消毒或灭菌处理，培养基宜采用高压蒸汽灭菌锅进行高温灭菌处理，而

13、超净工作台常使用紫外线宜采用高压蒸汽灭菌锅进行高温灭菌处理，而超净工作台常使用紫外线或化学药物进行消毒处理。或化学药物进行消毒处理。(3)(3)微生物培养过程中为微生物的生长提供氮微生物培养过程中为微生物的生长提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮丰富的物质。电泳法纯化特定生物成分，是源的有尿素、蛋白胨等含氮丰富的物质。电泳法纯化特定生物成分，是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，这些不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中状的不同，这些不同使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中不同分子的分

14、离。当待分离分子所带电荷相同时，分子量越大，电泳速不同分子的分离。当待分离分子所带电荷相同时，分子量越大，电泳速度越慢。度越慢。(4)(4)抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。答案答案(1)压榨过滤压榨过滤(2)稀释涂布平板法稀释涂布平板法(或：稀释混合平板法或：稀释混合平板法)高压高压蒸汽灭菌锅消毒蒸汽灭菌锅消毒(3)氮源越慢氮源越慢(4)直径直径(或：大小或：大小)(2011浙江自选浙江自选，17)杨梅是浙江省的特色水果之一，为对其进行深加工，

15、杨梅是浙江省的特色水果之一，为对其进行深加工，某厂进行了杨梅酒和杨梅醋的研制，基本工艺流程如下：某厂进行了杨梅酒和杨梅醋的研制，基本工艺流程如下：6.请回答下列问题。请回答下列问题。(1)在制备杨梅酒过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维素在制备杨梅酒过程中，为了提高杨梅的出汁率，在压榨前可加入一定浓度的纤维素酶和酶和_酶。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是酶。甲罐顶上弯管中加水的主要目的是_。发酵一定时间后，观察。发酵一定时间后，观察到发酵罐内液面不再有到发酵罐内液面不再有_，说明发酵基本完毕。，说明发酵基本完毕。(2)在制备杨梅醋过程中，乙罐内先填充经在制备杨梅醋过程中，乙

16、罐内先填充经_处理的木材刨花，然后加入含处理的木材刨花，然后加入含_菌的培养液，使该菌菌的培养液，使该菌_在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵，杨梅醋的罐进行杨梅醋发酵，杨梅醋的pH可通过控制杨梅酒的可通过控制杨梅酒的_来调节。来调节。(3)若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋，则乙罐中若甲罐中的杨梅酒全部流经乙罐制成杨梅醋，则乙罐中CO2的产生量是的产生量是_。A甲罐的甲罐的2倍倍 B与甲罐的相等与甲罐的相等C甲罐的一半甲罐的一半 D几乎为零几乎为零(4)在杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过程中，某物质浓度在杨梅酒和杨梅醋发酵的整个过

17、程中，某物质浓度随时间变化的示意图如右，该物质是随时间变化的示意图如右，该物质是_。解析解析(1)纤维素酶和果胶酶具有专一性，能分解细胞纤维素酶和果胶酶具有专一性，能分解细胞壁中的纤维素和果胶，破坏细胞壁，以提高出汁率；壁中的纤维素和果胶，破坏细胞壁，以提高出汁率；酒精发酵罐顶上弯管中加水是为了防止空气进入；发酒精发酵罐顶上弯管中加水是为了防止空气进入；发酵一段时间后，发酵罐内液面不再有气泡产生，说明酵一段时间后，发酵罐内液面不再有气泡产生，说明发酵基本完毕。发酵基本完毕。(2)在制备杨梅醋过程中，醋酸发酵罐中填充的木材刨花要经过灭菌，然在制备杨梅醋过程中，醋酸发酵罐中填充的木材刨花要经过灭菌

18、，然后加入含有醋杆菌的培养液，使该菌附着在刨花上，通过调节杨梅酒进入后加入含有醋杆菌的培养液，使该菌附着在刨花上，通过调节杨梅酒进入乙罐的流速来调节杨梅醋的乙罐的流速来调节杨梅醋的pH。(3)比较乙醇和醋酸的生成反应式即可得出答案：比较乙醇和醋酸的生成反应式即可得出答案：葡萄糖氧化成乙醇的反应式：葡萄糖氧化成乙醇的反应式：C6H12O62CO22C2H5OH乙醇氧化成醋酸的反应式：乙醇氧化成醋酸的反应式：C2H5OHO2CH3COOHH2O(4)结合杨梅酒和杨梅醋的发酵全过程，分析图示曲线结合杨梅酒和杨梅醋的发酵全过程，分析图示曲线(先上升，后下降先上升，后下降)可知，该物质应为酒精。可知，该

19、物质应为酒精。答案答案(1)果胶防止空气进入气泡冒出果胶防止空气进入气泡冒出(2)灭菌醋杆附着流速灭菌醋杆附着流速(3)D(4)酒精酒精 微生物的利用是选修微生物的利用是选修1 生物技术实践生物技术实践中最重要的专题，是考查的重中最重要的专题，是考查的重点和热点，多与社会、生活实际密切联系，通过一些新的情境或材料进点和热点，多与社会、生活实际密切联系，通过一些新的情境或材料进行考查。本专题考查的重点就是微生物的生存条件、分离、纯化和实验行考查。本专题考查的重点就是微生物的生存条件、分离、纯化和实验室培养过程；特定微生物的数量测定；培养基对微生物的选择作用，包室培养过程；特定微生物的数量测定；培

20、养基对微生物的选择作用，包括培养基的成分、制备等；消毒、灭菌、平板划线法、稀释涂布平板法括培养基的成分、制备等；消毒、灭菌、平板划线法、稀释涂布平板法等基本的操作技术等。选修等基本的操作技术等。选修1的考查难度都较低，多是识记归纳性质的试的考查难度都较低，多是识记归纳性质的试题或是简单的拓展应用题。题或是简单的拓展应用题。进行本讲复习应从如下角度展开进行本讲复习应从如下角度展开 根据考查特点，复习中要注意重点回顾教材中实验的流程、操作要求、根据考查特点，复习中要注意重点回顾教材中实验的流程、操作要求、实验现实验现 象、实验结果的分析等方面的知识，加深理解、强化记忆，并能象、实验结果的分析等方面

21、的知识，加深理解、强化记忆，并能够简单地灵活运用。够简单地灵活运用。专家箴言通过以上高考体验，可以归纳总结：微生物的营养物质比较微生物的营养物质比较微生物的化学组成与其他生物大体相同，也是主要由微生物的化学组成与其他生物大体相同，也是主要由C、H、O、N、P、S等元素组成，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机等元素组成，这些元素最终来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物，归纳为碳源、氮源、无机盐、水。四者的区别化合物，归纳为碳源、氮源、无机盐、水。四者的区别(见下表见下表)：更清晰考点一微生物的培养与应用考试说明考试说明 (1)(1)微生物的分离和培养微生物的分离和培养/(2)

22、/(2)某种微生物数量的测定某种微生物数量的测定(3)(3)培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作用1营养营养物质物质定定 义义作作 用用主要来源主要来源碳源碳源凡能提供所需凡能提供所需_的的物质物质构成生物体的细胞物质和构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质养生物的能源物质无机化合物：无机化合物：_、NaHCO3；有机化合物：；有机化合物：_、脂肪酸、花生粉脂肪酸、花生粉饼、石油等饼、石油等氮源氮源凡能提供所需凡能提供所需_的的物质物质合成蛋白质、合成蛋白质、_以以及及含氮的代谢产物含氮的代谢产物无机化合物：无机化合物：N2、NH3、铵、铵

23、盐、硝酸盐；有机化合物：盐、硝酸盐；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等尿素、牛肉膏、蛋白胨等水水在生物体内含量在生物体内含量很高，在低等生很高，在低等生物内含量更高物内含量更高不仅是优良的溶剂，而且不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的可维持生物大分子结构的稳定稳定无机无机盐盐为微生物提供除为微生物提供除碳、氮以外的各碳、氮以外的各种重要元素，包种重要元素，包括大量元素和微括大量元素和微量元素量元素细胞内的组成成分，生理细胞内的组成成分，生理调节物质，某些化能自养调节物质，某些化能自养菌的能源，酶的激活剂菌的能源，酶的激活剂碳元素碳元素CO2糖类糖类氮元素氮元素核酸核酸2. .培养基种类

24、及用途培养基种类及用途( (见下表见下表) )划分划分标准标准培养基种类培养基种类特特 点点用用 途途物理物理性质性质_培养基培养基不加凝固剂不加凝固剂工业生产工业生产半固体培养基半固体培养基加凝固剂加凝固剂，如，如琼脂琼脂观察微生物观察微生物的的_、分类、分类、鉴定鉴定固体培养基固体培养基微生物分离、鉴定、微生物分离、鉴定、活菌计数、活菌计数、_化学化学成分成分天然培养基天然培养基含化学成分不明确的含化学成分不明确的天然物质天然物质工业生产工业生产_培养基培养基培养基成分明确培养基成分明确(用化学成分已知的化用化学成分已知的化学物质配成学物质配成)分类、鉴定分类、鉴定液体液体运动运动保藏菌种

25、保藏菌种合成合成用途用途_培养基培养基培养基中加入某种化学培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所微生物的生长，促进所需要的微生物的生长需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物培养、分离出特定微生物(如如培养酵母菌和霉菌时，可在培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素；培养培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌时，可在培金黄色葡萄球菌时，可在培养基中加入高浓度的食盐养基中加入高浓度的食盐)鉴别培养基鉴别培养基根据微生物的代谢特根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某点，在培养基中加入某种种_或或化学药化学药品品鉴别不同种类的微生物，如鉴别不同种类的微生物

26、，如可用伊红可用伊红美蓝培养基鉴别美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌肠杆菌(若有，菌落呈深紫若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽色，并带有金属光泽)选择选择指示剂指示剂3.3.无菌技术无菌技术( (消毒和灭菌的区别消毒和灭菌的区别)()(见下表见下表) )项目项目消消 毒毒灭灭 菌菌条件条件使用较为使用较为_的的理化方法理化方法使用强烈的理化因素使用强烈的理化因素结果结果杀死物体表面或内部一部分对人体有杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物害的微生物(不包括不包括_)杀死物体内外所有的微生物，包杀死物体内外所有的微生物，包括括_适用适用实验操作的空间、操作者

27、的衣服和手实验操作的空间、操作者的衣服和手微生物的培养器皿、接种用具和微生物的培养器皿、接种用具和_等等常用常用方法方法煮沸消毒法煮沸消毒法(如在如在100 ，煮沸，煮沸56 min)、_消毒消毒法法(如在如在80 ，煮，煮15 min)；使用酒精、氯气、石炭酸等；使用酒精、氯气、石炭酸等化学药剂进行消毒化学药剂进行消毒灼烧灭菌、干热灭菌灼烧灭菌、干热灭菌、_灭菌灭菌温和温和芽孢和孢子芽孢和孢子芽孢和孢子芽孢和孢子培养基培养基巴氏巴氏高压蒸汽高压蒸汽4.4.三种常用灭菌方法的比较三种常用灭菌方法的比较( (见下表见下表) )灭菌灭菌方法方法适用材料适用材料或用具或用具灭菌条件灭菌条件灭菌时间灭

28、菌时间_灭菌灭菌接种环、接种针或其接种环、接种针或其他金属工具他金属工具酒精灯火焰酒精灯火焰的充分的充分燃烧燃烧层层直至烧红直至烧红干热干热灭菌灭菌玻璃玻璃器皿器皿(吸管、培养吸管、培养皿皿) 和金属用具等和金属用具等_内内，160170 12 h高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌_等等100 kPa，121 1530 min干热灭菌箱干热灭菌箱培养基培养基灼烧灼烧5.5.微生物的纯化培养常用的两种接种方法的比较微生物的纯化培养常用的两种接种方法的比较( (见下表见下表) )方法方法平板划线法平板划线法稀释涂布平板法稀释涂布平板法注注意意事事项项(1)接种环的灼烧接种环的灼烧a第一次划线前：杀死残留微生

29、物，第一次划线前：杀死残留微生物，避免污染菌种和培养基避免污染菌种和培养基b每次划线前：每次划线前： _残留菌种，保证残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端每次划线菌种来自上次划线末端c划线结束后：杀死残留菌种，避免划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者污染环境和感染操作者(2)灼烧接种环之后，要灼烧接种环之后，要 _后才能后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种伸入菌液，以免温度太高杀死菌种(3)划线时最后一区域不要与第一区域相划线时最后一区域不要与第一区域相连连(4)划线用力要大小适当，防止用力过大划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破将培养基划破(1)稀释操作时：每支试

30、管及其中的稀释操作时：每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌；操作时，水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰试管口和移液管应在离火焰12 cm处处(2)涂布平板时：涂布平板时：a涂布器用涂布器用 _酒精消毒，取出酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃引燃b不要将过热的涂布器放在盛放酒精不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精c酒精灯与培养皿距离要合适，移液酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体管管头

31、不要接触任何物体目的目的获得单细胞菌落：在培养基上形成的由单个菌种繁殖而来的子细胞群体获得单细胞菌落：在培养基上形成的由单个菌种繁殖而来的子细胞群体培养培养平板冷凝后平板冷凝后 _培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染入培养基造成污染杀死杀死70%冷却冷却倒置倒置微生物的分离和计数微生物的分离和计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数土壤中分解尿素的细菌的分离与计数筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。测定微生物数量的常用方法

32、：统计菌落数目和显微镜直接计数。过程：土壤取样过程：土壤取样样品的稀释样品的稀释微生物的培养与观察。微生物的培养与观察。(2)分解纤维素的微生物的分离分解纤维素的微生物的分离实验原理实验原理 心堂亮 1即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。流程流程土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释涂布平板涂布平板挑选菌落。挑选菌落。统计菌落数目的方法统计菌落数目的方法稀释涂布平板法稀释涂布平板法( (也叫活菌计数法也叫活菌计数法) )(1)原理原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长

33、的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少个活菌。有多少个活菌。(2)操作操作设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.1 mL 接种到已制备好的平接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布棒将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下板上，然后用无菌涂布棒将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养，计算菌落数。为使结果接近真实值，可

34、将同一稀释度加到三个或培养，计算菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。2为了保证结果准确，一般选择菌落数在为了保证结果准确，一般选择菌落数在30300个的平板进行计数，若个的平板进行计数，若设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。(3)计算公式计算公式 从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培富集培养养纯种分离纯种分离性能测定。性能测定。(1

35、)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从_环境采集。环境采集。(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择淀粉酶微生物的富集培养应选择_的培养基，并在的

36、培养基，并在_条件下条件下培养。培养。(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。请分析接种的具体方法。强信心 【例例1】获得图获得图A效果的接种方法是效果的接种方法是_，获得图，获得图B效果的接种方法效果的接种方法是是_。(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行_，接种前要，接种前要进行进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。条件下进行。审题关键审题关键“嗜盐菌嗜盐菌”

37、、“富集培养富集培养”、“耐高温淀粉酶耐高温淀粉酶”、“溶化后分溶化后分装前装前”。命题来源命题来源纯化培养和分离技术。纯化培养和分离技术。思路分析思路分析(1)嗜盐菌就生活在高盐环境中，如：海滩等环境。嗜盐菌就生活在高盐环境中，如：海滩等环境。(2)耐高温淀耐高温淀粉酶应存在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内。粉酶应存在于以淀粉为唯一碳源且在高温环境中生存的微生物体内。(3)从从不同菌落之间的关系可以看出，不同菌落之间的关系可以看出，A纯化微生物的接种方法是稀释涂布平板纯化微生物的接种方法是稀释涂布平板法，法，B纯化微生物的接种方法是平板划线法。纯化微生物的接种方法是平板划线法

38、。(4)培养基配制时应先溶化，培养基配制时应先溶化，再调整再调整pH，灭菌。，灭菌。答案答案(1)海滩等高盐海滩等高盐(2)以淀粉为唯一碳源高温以淀粉为唯一碳源高温(3)稀释涂布平板法平板划线法稀释涂布平板法平板划线法(4)pH调整高压蒸汽灭菌无菌调整高压蒸汽灭菌无菌1 1几种常用发酵菌种的比较几种常用发酵菌种的比较( (见下表见下表) )更清晰考点二传统发酵技术考试说明考试说明运用发酵加工食品的基本方法运用发酵加工食品的基本方法 菌种菌种 项目项目酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌生物学生物学分类分类_生物生物原核生物原核生物_生物生物原核生物原核生物代谢类型代谢类型异养兼异养兼性

39、厌氧性厌氧_异养需氧异养需氧_厌氧厌氧繁殖方式繁殖方式适宜条件适宜条件下出芽生殖下出芽生殖二分裂二分裂孢子生殖孢子生殖二分裂二分裂生产应用生产应用酿酒酿酒酿醋酿醋制作制作_制作泡菜制作泡菜发酵条件发酵条件前期需氧，前期需氧，后期不需氧后期不需氧一直需氧一直需氧一直需氧一直需氧不需氧不需氧真核真核真核真核异养异养异养异养腐乳腐乳需氧需氧2.2.果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较( (见下表见下表) ) 制作内容制作内容比较项目比较项目 果酒果酒果醋果醋腐乳腐乳泡菜泡菜菌种菌种酵母菌酵母菌醋酸菌醋酸菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌控制控制

40、 条件条件O2的有无的有无有氧有氧有氧有氧有氧有氧无氧无氧最适温度最适温度1825 30_1518 常温常温35 3.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程的比较及亚硝酸盐含量的检测果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程的比较及亚硝酸盐含量的检测果酒和果醋制作果酒和果醋制作腐乳的制作腐乳的制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含制作泡菜并检测亚硝酸盐含量量(山东考区不作要求山东考区不作要求)制制作作原原理理果酒：无氧呼吸果酒：无氧呼吸果醋：果醋：_多种微生物多种微生物发酵发酵泡菜制作：乳酸菌无氧呼泡菜制作：乳酸菌无氧呼吸；吸；亚硝酸盐检测：在盐酸酸化亚硝酸盐检测：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基条件下，亚硝酸盐与对氨基

41、苯磺酸发生重氮化反应后，苯磺酸发生重氮化反应后，与与N1萘基乙二胺盐酸盐结合萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料形成玫瑰红色染料实实验验流流程程图图挑选葡萄挑选葡萄冲洗冲洗榨汁榨汁酒精发酵酒精发酵醋酸发酵醋酸发酵果酒果酒 果醋果醋让豆腐上长让豆腐上长出毛霉出毛霉加加盐腌制盐腌制加加卤汤装瓶卤汤装瓶密封腌制密封腌制操操作作提提示示材料的选择与处理；防止材料的选择与处理；防止发酵液被污染；控制好发发酵液被污染；控制好发酵条件酵条件控制好材料控制好材料的用量；防的用量；防止杂菌污染止杂菌污染泡菜坛的选择；腌制的条泡菜坛的选择；腌制的条件；测定亚硝酸盐含量的操件；测定亚硝酸盐含量的操作作有氧呼吸有氧呼

42、吸4.果酒、果醋与腐乳制作过程注意点的比较果酒、果醋与腐乳制作过程注意点的比较(见下表见下表) 下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答下面的问题。下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答下面的问题。(1)食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成_(填中间产物填中间产物)，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用_(填淀粉指示剂填淀粉指示剂)来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上

43、述中间产物呈红色。产物呈红色。第二步：用第二步：用_菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是瓶不应完全密闭的主要原因是_ _。强信心 【例例2】第三步：用第三步：用_菌将乙醇转化成乙酸，这一过程菌将乙醇转化成乙酸，这一过程_氧气。氧气。(2)泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是_，还有少量的，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用_法，因为亚硝酸盐与对法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与氨基苯磺酸的反应产物能与N1萘基乙二胺偶

44、联成萘基乙二胺偶联成_色化合物。进色化合物。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是_。审题关键审题关键“大米为原料大米为原料”“”“发酵制作发酵制作”。命题来源命题来源微生物的发酵微生物的发酵。思路分析思路分析(1)大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶(淀粉酶必须冷却后加入，淀粉酶必须冷却后加入，因为酶的催化活性受温度的影响因为酶的催化活性受温度的影响)，大米的主要成分是淀粉，在淀粉酶，大米的主要成分是淀粉，在淀粉酶催化作用下，分解成糊精催化作用下，分解成糊精(主要含麦芽糖等主要含麦芽糖等)，这一过程可用碘液，这一

45、过程可用碘液(或或KII2溶液溶液)来检测反应的情况。酵母菌将葡萄糖转化成乙醇的过程中产生来检测反应的情况。酵母菌将葡萄糖转化成乙醇的过程中产生CO2，随反应的进行发酵瓶中，随反应的进行发酵瓶中CO2逐渐增多，瓶内压力升高，可能引起逐渐增多，瓶内压力升高，可能引起破裂，所以不要完全密闭。醋酸杆菌是好氧型细菌，在将乙醇转化成乙破裂，所以不要完全密闭。醋酸杆菌是好氧型细菌，在将乙醇转化成乙酸的过程中消耗氧气；酸的过程中消耗氧气；(2)泡菜发酵过程离不开乳酸菌，其产生的酸主要泡菜发酵过程离不开乳酸菌，其产生的酸主要是乳酸和少量的亚硝酸，亚硝酸盐总量达到是乳酸和少量的亚硝酸，亚硝酸盐总量达到0.30.

46、5 g时就会引起人中时就会引起人中毒，必须对泡菜中亚硝酸盐的含量进行测定，其测定方法可用比色法。毒，必须对泡菜中亚硝酸盐的含量进行测定，其测定方法可用比色法。答案答案(1)糊精碘液酵母发酵过程中会产生大量糊精碘液酵母发酵过程中会产生大量CO2，使瓶内压力，使瓶内压力升高而可能引起爆裂醋酸杆需要消耗升高而可能引起爆裂醋酸杆需要消耗(2)乳酸乳酸(或有机酸或有机酸)(光电光电)比色紫红作为对照比色紫红作为对照植物芳香油三种提取方法的比较植物芳香油三种提取方法的比较( (见下表见下表) )更清晰考点三植物有效成分的提取考试说明考试说明从生物材料中提取某些特定成分从生物材料中提取某些特定成分提取方法提取方法实验原理实验原理方法步骤方法步骤适用范围适用范围水蒸气水蒸气蒸馏蒸馏利用水蒸气将挥利用水蒸气将挥发性较发性较_的的植植物芳香油携带出物芳香油携带出来来a.水蒸气水蒸气蒸馏蒸馏b分离油层分离油层 c除水除水_适用于提取适用于提取_、薄荷油等挥发性强的芳香薄荷油等挥发性强的芳香油油压榨法压榨法通过机械加压，通过机械加压，压榨出果皮中的压榨出果皮中的芳香油芳香油a.石灰水浸泡、漂洗石灰水浸泡、漂洗b压榨、过滤、静置压榨、过滤、静置c再次过滤再次过滤适用于柑橘、适用于柑橘、_等等易焦糊原料中芳