头孢氨苄原料药含量测定

1、头孢氨苄原料药含量测定头孢氨苄原料药含量测定 张庆英张庆英一、试剂及仪器一、试剂及仪器头孢氨苄原料药头孢氨苄对照品 高效液相色谱仪流动相：水-甲醇-3.86醋酸钠溶液-4醋酸溶液（742:240:15:3）高效液相色谱法的应用：定性：保留时间（tR）、相对保留时间（tR）定量：峰高（h）、峰面积（A）储液罐储液罐控制系统控制系统脱气脱气泵泵进样阀进样阀色谱柱色谱柱检测器检测器 收集器收集器数据处理系统数据处理系统自动自动进样进样二、实训内容二、实训内容对照品：头孢氨苄统适应性实验：证明仪器工作良好供试品：头孢氨苄粉末+流动相测定含量方法测定含量方法外标法： 精密称取对照品和供试品，配制成溶液，

2、分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品溶液中待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量： 含量（Cx）=CRAX/AR 式中 ： AX 为供试品（或其杂质）峰面积或峰高 Cx为供试品（或其杂质）的浓度 AR 为供试品（或其杂质）峰面积或峰高 CR为供试品（或其杂质）的浓度加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量，测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子： AC 校正因子（f） AC 式中 A为内标物质的峰面积或峰高； A为对照品的峰面积或峰高； C为内标物质的浓度； C为对照品的浓度。 内标法：取含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品中待

3、测成分（或其杂质）和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量： A 含量(C)f AC 式中A为供试品（或其杂质）峰面积或峰高； C为供试品（或其杂质）的浓度。 f、A和C的意义同上。 （按结构与性质） 内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、 大环内酯类、氯霉素类、多肽类、抗肿瘤类、林可霉素类、其他抗生素类抗生素的分类抗生素的分类 内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素 青霉素类青霉素类NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）头孢菌素类头孢菌素类7654321NONHSCH2R1COOH母核（7-氨基头孢菌烷酸）RCONSOHNCOOKCH3CH3OCCH2酸性酸性结构与性质结

4、构与性质NaNa与碱金属(Na+、K+)成盐 （一）羧基 易溶于水 NSO1234567（二）手性（二）手性C C 87654321NOS头孢菌素类 C6 C7青霉素类 C3 C5 C6 旋光性旋光性 87654321NOS （三）共轭体系（三）共轭体系 NSO头孢菌素类 母核有共轭体系 青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基 NOS UV87654321NOS青霉素钠UV7-20头孢氨苄紫外吸收图（四）（四）内酰胺环内酰胺环 水溶液：不稳定 干燥纯净：稳定 不稳定性因素四元环张力大 酰胺键易水解 K+、Na+反应反应（一）鉴别鉴别 焰色焰色鲜黄色鲜黄色 + 醋酸氧铀锌醋酸氧铀锌黄黄 Na

5、+ 焰色焰色紫色紫色 + 0.1%四苯硼钠四苯硼钠 + Ac白白 K+（二）呈色反应（二）呈色反应1.羟肟酸铁反应2.与H2SO4 - HNO3反应NH2CONSOHNCOOHCH3CH3CH23. 3. 茚三酮反应茚三酮反应蓝紫色氨基茚三酮 -氨基氨基（三）沉淀反应（三）沉淀反应1. 1. 遇酸遇酸白白青青霉霉素素青青霉霉素素钠钠青青霉霉素素钾钾 H2. 2. 有机胺盐反应有机胺盐反应（1）重氮化 - 偶合反应 青霉素普鲁卡因普鲁卡因青霉素H重氮化-偶合反应红红 芳伯氨基芳伯氨基2 2、IRIR法法117401815cmVOC116901710 cmVOC-内酰胺环内酰胺环酰胺酰胺青霉素钠的

6、红外光吸收图谱青霉素钠的红外光吸收图谱 含量测定 IINaOH头头孢孢菌菌素素族族青青霉霉素素族族（水解）（水解） H碘量法碘量法（一）（一）1.1.原理原理水解产物水解产物64232222OSNaNaIOSNaI定量过量定量过量剩余剩余-内酰胺类内酰胺类ChP 1. 水解反应 (按化学计算量进行) 2. 氧化-还原反应 (无固定的量关系，受温度、PH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)反应分两步进行反应分两步进行（二）电位配位滴定法（汞量法）（二）电位配位滴定法（汞量法）1.原理SHROH 青霉素族（水解）（水解）HgRS2）（青霉素族ChP2Hg6 . 4pH2.2.方法方法样品样品NaOH 水解水解HNO3HNO3 醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液 PH4.6PH4.6 Hg（NO3）2 滴定滴定V样样（总）（总）醋酸盐缓冲液醋酸盐缓冲液 PH4.6PH4.6 HgHg（NO3NO3）2 2滴定滴定V空空以未经水解的样品作为空白以未经水解的样品作为空白（三）酸碱滴定法1.原理青