任务十五测定食品加工和包装中有害物质含量

1、食品分析与检验技术1任务十五 测定食品加工和包装中有害物质含量李京东 余奇飞 刘丽红食品分析与检验技术2v技能目标1会测定食品中三聚氰胺含量。2会测定食品中苏丹红含量。3会测定食品塑料、纸包装及橡胶用品中渗出物含量。v知识目标1明确食品中三聚氰胺的测定原理。2明确食品苏丹红测定测定原理。3明确食品包装材料渗出物测定条件。食品分析与检验技术3项目一：测定食品中三聚氰胺v一、案例v二、选用国家标准GB/T22388-2008原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法高效液相色谱法。食品分析与检验技术4v三、测定方法1样品处理v（1）液态奶、奶粉、酸奶等乳制品：精确称取样品2.00g置于50mL具塞塑料离心管

2、，分别加15mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，大于4000r/min离心10min，取上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，加5mL水混匀用于待净化液。v（2）奶酪、奶油和巧克力等制品：精确称取样品2.00g置于研钵中，加入试样质量46倍海砂研磨成粉状，转移至50mL具塞塑料离心管中，同时用15mL三氯乙酸溶液数次清洗研钵，将清洗液转入离心管中，离心管中加入5mL乙腈，其余同上操作，制备待净化液。食品分析与检验技术5v2样品净化将待净化液转移至固相萃取柱中（固相萃取柱制备方法：混合型阳离子交换固相萃取柱，基质为

3、苯磺酸化的聚苯乙烯-二乙烯基苯高聚物，60mg，3mL，或相当者。）使用前依次用3mL 甲醇、5 mL水活化，抽至近干，用6mL氨化甲醇溶液洗脱，流速不超过1mL/min，洗脱液于50下用氮气吹干，残留物（相当于0.4g样品）用1mL流动相定容，涡旋混合1min，过0.2m微孔滤膜后，得净化可测定样品。食品分析与检验技术6v3测定（1）高效液相色谱参考条件v色谱柱：C8柱，250 mm4.6 mm（i.d.），5m，或相当者C18柱，250 mm4.6 mm（i.d.），5m，或相当者。v流动相：C8柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（85+15，体积比），混匀。C18柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（90

4、+10，体积比），混匀。v流速：1.0mL/min。v柱温：40。v波长：240nm。v进样量：20L。（2）标准曲线的绘制v用流动相将三聚氰胺标准储备液稀释得浓度为0.8、2、20、40、80g/mL的标准工作液，由低到高浓度进样检测，做标准曲线。（3）定量测定：将待测液按要求进样检测。食品分析与检验技术7v4结果计算式中X试样中三聚氰胺的含量，mg/kg；A样液中三聚氰胺的峰面积；c标准溶液中三聚氰胺的浓度，g/mL；V样液最终定容体积，mL；As标准溶液中三聚氰胺的峰面积；m试样的质量，g；f稀释倍数。v5试剂5%氨化甲醇溶液、乙腈、离子对试剂缓冲液、1%三氯乙酸、甲醇水溶液、三聚氰胺标

5、准储备液、海砂、氮气。v6仪器高效液相色谱（HPLC）仪、分析天平、离心机、超声波水浴、固相萃取装置、氮气吹干仪、涡旋混合器、具塞塑料离心管、研钵。10001000mAVcAXS食品分析与检验技术8v四、相关知识（一）食品中三聚氰胺测定高效液相色谱法原理v试样用三氯乙酸溶液-乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，外标法定量。v本法摘自GB/T22388-2008，适用于原料乳、乳制品以及含乳制品中三聚氰胺的定量测定。（二）注意事项v1本试验中所用试剂除甲醇、乙腈、辛烷磺酸钠为色谱纯外，其余均为分析纯。v2本试验用水为GB/T6682规定的一级水。v3待测样液中三聚氰胺的响

6、应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。食品分析与检验技术9v五、测定食品中三聚氰胺的方法乳及乳制品中三聚氰胺的国家标准检测法高效液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法（LC-MS/MS），气相色谱-质谱联用法（GC-MS和GC-MS/MS）等，均适合于乳及乳制品中三聚氰胺的定性确定。食品分析与检验技术10项目二：测定食品中苏丹红v一、案例v二、选用国家标准GB/T 196812005食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法。食品分析与检验技术11v三、测定方法1样品处理v（1）粉状样品（如辣椒粉等）：准确称取样品1.0005.000g于三角瓶中，加入1030mL正己烷，超声

7、过滤5min，再用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下，慢慢加入氧化铝层析柱中（氧化铝层析柱制备方法，在层析柱管底部塞入一薄层脱脂棉，干法装入处理过的氧化铝3cm高，轻敲实后加一薄层脱脂棉，用10mL正己烷预淋洗，洗净柱中杂质后，备用），为保证层析效果，在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，在层析过程保持柱的湿润，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱；控制氧化铝表层吸附的色素带宽宜小于0.5cm，待样液完全流出后，视样品中含油类杂质的多少用1030mL正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60mL洗脱，收

8、集、浓缩后，用丙酮转移并定容至5mL，经0.45m有机滤膜过滤后待测。v（2）油状样品（如红辣椒油、火锅料、奶油等）：。v（3）含水量较多样品（如辣椒酱、番茄沙司等）：。v（4）肉制品（如香肠等）：。食品分析与检验技术12v2样品测定（1）色谱条件v色谱柱：Zorbax SB-C18 3.5m, 4.6mm150mm（或相当型号色谱柱）。v 流动相：溶剂A（0.1%甲酸的水溶液:乙腈=85:15）；溶剂B（0.1%甲酸的乙腈溶液:丙酮=80:20）。v 流速：1mL/min。v柱温：30。v检测波长：苏丹红478nm ；苏丹红、苏丹红、苏丹红520nm，于苏丹红出峰后切换。v进样量：10L。（

9、3）标准曲线制作（4）样品测定，依色谱要求条件，进样操作，测得结果，代入公式计算。食品分析与检验技术13v3结果计算式中R样品中苏丹红含量，mg/kg；C由标准曲线得出的样液中苏丹红的浓度，g/mL；V样液定容体积，mL；m样品质量，g。v4试剂乙腈、丙酮、甲酸、乙醚、正己烷、无水硫酸钠、层析柱管（1cm（内径）5cm(高)的注射器管）、 层析用氧化铝（中性100200目）、5%丙酮的正己烷液、标准贮备液v5仪器高效液相色谱仪、分析天平、旋转蒸发仪、均质机、离心机、0.45m 有机滤膜。mVCR食品分析与检验技术14四、相关知识v（一）食品中苏丹红测定高效液相色谱法原理v样品经溶剂提取、固相萃

10、取净化后，用反相高效液相色谱-紫外可见光检测器进行色谱分析，采用外标法定量。v本法摘自GB/T19681-2005，适用于食品中苏丹红染料的检测。（二）注意事项v不同厂家和不同批号氧化铝的活度有差异。食品分析与检验技术15项目三：测定食品包装材料及容器有害物质v一、案例v二、选用国家标准GB/T5009.60-2003食品包装用聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯成型品卫生标准的分析方法。食品分析与检验技术16v三、测定方法1取样方法v每批按0.1%取试样，小批时取样不少于10只（以500mL容积/只计，少于500mL/只时，试样加倍取样），样品一半供检测用，一半供仲裁用。2浸泡条件v（1）水：60，浸泡

11、2h。v（2）4%乙酸：60，浸泡2h。v（3）65%乙醇：室温，浸泡2h。v（4）正己烷：室温，浸泡2h。v要求浸泡液按接触面积每平方厘米加2mL，在容器中则加入浸泡液至2/34/5容积为准。浸泡溶剂的选择以食品容器、包装材料接触的食品种类而定，中性食品时选用水作溶剂；酸性食品时选用4%乙酸作溶剂；碱性食品时用碳酸氢钠作溶剂；油脂食品时选用正己烷作溶剂；含酒精食品用乙醇作溶剂食品分析与检验技术17v3有机物含量测定高锰酸钾消耗量试样浸泡液用高锰酸钾滴定，其消耗量表示可溶出有机物的含量。（1）测定方法取100mL水，放入250mL锥形瓶中，加入5mL硫酸(1+2)、5mL高锰酸钾溶液，煮沸5m

12、in倒去，用水冲洗备用。准确吸取100mL水浸泡液于上述处理过的250mL锥形瓶中，加硫酸5mL硫酸（1+2）及10.0mL0.01mol/L高锰酸钾标准滴定溶液，再加2粒玻璃珠，准确煮沸5min后，趁热加入10.0mL0.01mol/L草酸标准滴定溶液，再以高锰酸钾标准液滴定至微红色，记录高锰酸钾溶液滴定量。同时做空白试验。食品分析与检验技术18v（2）结果计算式中X试样中高锰酸钾消耗量，mg/L；V1试样浸泡液滴定时消耗高锰酸钾溶液的体积，mL；V2试样空白滴定时消耗高锰酸钾溶液的体积，mL；c高锰酸钾标准滴定溶液的实际浓度，mol/L；31.6与1.0mL的高锰酸钾标准滴定溶液相当的高锰

13、酸钾质量，mg。v（3）试剂硫酸（1+2）。0.01mol/L高锰酸钾标准滴定溶液。0.01mol/L草酸标准滴定溶液。10010006 .31)(21CVVX食品分析与检验技术19v4残渣含量测定将试样用四种不同浸泡液模拟接触水、酸、酒、油等不同性质食品后，浸泡液进行蒸发所得残渣表示在不同浸泡液中的各物质的溶出量。（1）测定方法v取200mL浸泡液于预先恒量的50mL玻璃蒸发皿或小瓶浓缩器中，在水浴上蒸干，于100士5干燥2h，在干燥器内冷却0.5h后称量，再于100士5干燥1h，在干燥器内冷却0.5h称量，同时做空白试验。（2）结果计算v式中vX试样浸泡液（不同浸泡液）蒸发残渣，mg/L；

14、vm1试样浸泡液蒸发残渣质量，mg；vm2空白浸泡液的质量，mg。2001000)(21mmX食品分析与检验技术20v5重金属含量v浸泡液中重金属（以铅计）与硫化钠作用，在酸性溶液中形成黄棕色硫化铅，与标准比较不得更深，则表示重金属含量符合标准。（1）测定方法v吸取20.0mL4%乙酸浸泡液于50mL比色管中，加水至刻度，另取2mL铅标准使用液于50mL比色管，加20mL4%乙酸溶液，加水至刻度混匀，两比色管各加硫化钠溶液2滴，混匀后，放置5min，以白色为背景，从上方或侧面观察，试样呈色不能比标准溶液更深。（2）结果表述v呈色大于标准试样，重金属（以Pb计）报告值1。（3）试剂v硫化钠溶液、

15、铅标准溶液、铅标准使用液食品分析与检验技术21v6脱色试验取洗净待测食具，用沾有冷餐油、65%乙醇的棉花，在接触食品的部位小面积内，用力擦拭100次，棉花不得染有颜色。四种浸泡液亦不得染有颜色。食品分析与检验技术22v四、相关知识（一）包装材料卫生标准（二）食品包装的意义v食品包装是食品工业过程中的主要工程之一，是食品商品的组成部分，它可以保护食品，使食品在离开工厂到消费者手中的流通过程中，防止生物性、化学性、物理性外来因素的损害，保持食品本身稳定质量的功能，方便食品的食用。同时，食品包装又具有首先表现食品外观，吸引消费的形象的效果，具有物质成本以外的价值。食品分析与检验技术23项目四：测定橡

16、胶制品中有害物质v一、案例v二、选用国家标准GB/T5009.64-2003食品用橡胶垫片（圈）卫生标准的分析方法。食品分析与检验技术24v三、测定方法1取样及处理v以日产量作为一个批号，从每批中均匀取出500g，置于干燥清洁玻璃瓶中，表明产品名称、批号及取样时间，半数用于化验，半数用于备份仲裁。将试样用洗涤剂清洗干净，自来水冲洗，再用水淋洗，晾干，备用。取橡胶垫片（圈）三片20g，如不足20g可以多取。2浸泡条件v每克试样加20mL浸泡液。v（1）水：60，浸泡0.5h。v（2）4%乙酸：60，浸泡0.5h。v（3）20%乙醇：60，浸泡0.5h（瓶盖垫片）。v（4）正己烷：水浴加热回流0.

17、5h（罐头垫圈）。食品分析与检验技术25v3残渣含量测定v4有机物含量测定v5锌含量测定锌离子在酸性条件下与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化锌，产生浑浊，与标准浑浊度比较定量，最低检出限2.5mg/L。（1）测定方法v吸取2.0mL4%乙酸浸泡液，置于25mL比色管中，加水10mL。吸取锌标准使用液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL，相当于含有0.0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0g锌，分别置于25mL比色管中，各加2mL4%乙酸，再各加水至10mL。v于试样及标准使用液中各加1mL盐酸（1+1），10mL10%氯化铵，0.1mL20%亚硫酸钠溶液，摇匀，放置5min

18、后，各加0.5mL0.5%亚铁氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，放置5min后，目视比较浑浊度定量。食品分析与检验技术26v（2）结果计算式中X试样浸泡液中锌含量，mg/L；m测定时所取试样浸泡液中锌的质量，g；V测定时所取试样浸泡液体积，mL。v（3）试剂0.5%亚铁氰化钾溶液。20%亚硫酸钠溶液，用时现配。盐酸（1+1）。锌标准溶液：准确称取0.1000g锌，加4mL盐酸（1+1），溶解后移入1000mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于100.0g锌。锌标准使用液：吸取10.0mL锌标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10.0g锌。10001000VmX食品分析与检验技术27v4重金属含量浸泡液中重金属（以铅计）与硫化钠作用，在酸性溶液中形成黄棕色硫化铅，与标准比较不得更深，则表示重金属含量符合标准。（1）测定方法v吸取20.00mL4%乙酸浸泡液于50mL比色