血必净注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

1、血必净注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用作者：俞秀丽 黄劲松 谢蕾 岑立冲 朱雄鹰 【摘要】 目的探讨血必净注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法观察假手术对照组、缺血再灌注组和血必净治疗组大鼠肾脏缺血再灌注24 h后血清及肾组织匀浆丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、血肌酐、血尿素氮和肾组织超微结构的改变。结果缺血再灌注组大鼠血清及肾组织匀浆的MDA、SOD、血肌酐和尿素氮与假手术对照组比较，差异均有统计意义（t分别=-79.21、-12.27、-61.37、-39.37、-33.17、-16.11，P均0.05）；血必净治疗组大鼠血清及肾组织匀浆的MDA、SOD、血肌酐和尿素

2、氮与缺血再灌注组比较，差异均有统计意义（t分别=-41.52、-19.31、-58.31、-52.40、-12.39、4.07，P均0.05）。透射电镜观察发现，血必净注射液明显减轻肾组织超微结构的损伤。结论血必净注射液对大鼠肾缺血再灌注损伤有明显保护作用。 【关键词】 肾 缺血再灌注 血必净注射液在肾移植、肝肾综合征和休克复苏中常发生肾脏急性缺血再灌注损伤。氧自由基引发的组织损伤在急性缺血再灌注损伤中起着重要作用1。本次研究就血必净注射液对肾脏缺血再灌注损伤的保护作用进行了初步研究。 1资料与方法 1.1一般资料2008年8月至2008年9月选择健康成年雄性SD大鼠30只（由浙江大学医学院实

3、验动物中心提供），体重250300g。随机分成假手术对照组，缺血再灌注组及血必净治疗组，每组各10只大鼠，各组间大鼠体重具有可比性。 1.2动物模型制备实验前禁食12 h，自由饮水，以4 %水合氯醛（1ml/100g）腹腔注射麻醉大鼠，作腹部正中切口，分离肾周组织，暴露双侧肾脏，切除右肾，用无创血管夹夹闭大鼠左侧肾蒂，60 min后去除血管夹予再灌注24 h，即为急性肾缺血再灌注模型。假手术对照组除未予夹闭左侧肾蒂外，余同前所述。缺血再灌注组去除血管夹后经静脉注射0.9 氯化钠注射液2 ml。血必净治疗组去除血管夹后经静脉注射血必净注射液（由天津红日药业股份有限公司生产），参照已有文献选择剂量

4、为8ml/kg 2。 1.3方法再灌注24 h后，麻醉大鼠，经腹主动脉采集大鼠血液2 ml，静置离心后分离血清待检；取少量肾组织加0.9 氯化钠注射液于玻璃匀浆管中制成10组织匀浆待检。严格按照说明书以比色法检测血清及肾组织匀浆的丙二醛（maleic dialdehyde, MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ,SOD）浓度。取采集到的血液1ml，自动生化仪检测血肌酐、尿素氮。 实验结束后立即取少量肾组织固定于2.5戊二醛溶液中，送浙江大学医学院电镜中心行透射电镜检查。 1.4统计学方法采用Stata 8统计软件包处理数据。计量数据均以均数±标准差（）

5、表示。两组间比较采用t检验，设P0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1各组血清及肾组织匀浆MDA、SOD和血肌酐、尿素氮的变化见表1 由表1可见，血必净治疗组大鼠血清及肾组织匀浆的MDA、SOD、血肌酐和尿素氮与缺血再灌注组比较，差异均有统计意义（t分别=-41.52、-19.31、-58.31、52.40、-12.39、4.07，P均0.05）。缺血再灌注组大鼠血清及肾组织匀浆的MDA、SOD、血肌酐和尿素氮与假手术对照组比较，差异均有统计意义（t分别=-79.21、-12.27、-61.37、39.37、-33.17、-16.11，P均0.05）； 2.2各组肾组织超微结构的改变见图

6、1、2、3 由图1可见，血必净治疗组细胞核完好，核膜存在，线粒体嵴略有减少，内质网稍扩张，部分核糖体尚存。由图2可见，缺血再灌注组细胞核固缩，核膜消失，部分细胞质空泡状，线粒体肿胀，线粒体嵴大部消失成空泡状，粗面内质网扩张明显成空泡状，核糖体脱落。 3讨论 氧自由基可氧化生物膜内的不饱和脂肪酸，裂解成包括MDA在内的许多产物，引起细胞器管架系统及其功能的破坏1，2。还能通过干扰细胞蛋白激酶系统以及增强核转录因子的表达，造成细胞坏死或凋亡1，3。血必净注射液有效成分由中药原料药红花、赤芍、川芎、丹参、当归中提取，研究证明其单味药均具有抗氧自由基作用48。 本次研究发现，血必净治疗组血清及肾组织匀

7、浆MDA浓度较缺血再灌注组明显下降（P均0.05），表明使用血必净注射液以后缺血再灌注的肾脏组织受氧自由基的氧化损害明显减轻。血必净治疗组血清及肾组织匀浆SOD浓度较缺血再灌注组明显上升（P均0.05），表明机体SOD损耗减少，证明血必净注射液有良好的清除自由基作用。透射电镜观察肾小管超微结构发现，缺血再灌注组肾小管细胞的各种细胞器遭受严重破坏。而使用血必净注射液后，肾小管超微结构的损伤得到显著改善。血肌酐值的变化亦表明使用血必净注射液有利于肾功能恢复。本次研究结果显示使用血必净注射液后血尿素氮改变不明显，可能同血尿素氮受影响因素较多，不能灵敏的反映肾功能变化有关。晋升网（）致力于成为医务工作

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9、J Physiol Cell Physiol,2002, 282(2):227-241.2 Weight SC, Bell PR, Nicholson ML. Renal ischaenia- reperfusion injuryJ. Brit J of Sur,1996,83(2):162-170.3 Minoru S, Naoki K, Sohachi F, et al. A novel free radical scavenger, edalavone, protects against ciaplatin-induced acute renal damage in vitro and

10、in vivoJ. J Pharmacol Exp Ther, 2003, 305(3):1183-1190.4 金鸣, 李金荣, 吴伟. 红花黄色素抗氧化作用的研究J. 中国中药杂志,2004,29(5):447-449.5 莫晓燕, 黄海霞, 洪喻. 赤芍总苷对培养乳鼠心肌细胞损伤的抗氧化作用J.中国药理学通报, 2004, 20(10):1119-1121.6 孙蓉, 孙玲, 刘持年. 川芎抗氧化的研究进展和应用前景J. 中国新医药, 2003,2(9):47-49.7 Li DY, Xu LN, Liu XG. Effects of Water-soluble Components Isolated Salvia miltiorrhiza on Oxygen Free Radical Generation and Lipid PeroxidationJ. Journal of Chine