HPV分型检测在宫颈病变诊断中的应用

1、HPV分型检测在宫颈病变诊断中的应用宫颈癌变和颈上皮内瘤变（CIN）都是宫颈疾病的一种，而引起宫颈癌的主要原因是人乳头瘤（HPV）感染，而该感染的临床表现分为低危型和高危型：低危型可引起外生殖器疣、复发性呼吸道多发性乳头瘤病、宫颈细胞学检查异常；高危型可引起平疣、宫颈癌及其癌前病变等。宫颈癌是女性恶性肿瘤中较为常见的一种1-2，严重危险女性朋友的健康。为探究HPV分型检测在宫颈病变诊断中的应用，现将笔者所在医院2014年4月-2015年4月收治的诊断为宫颈疾病的48例患者作为研究对象，并对其临床资料进行回顾性分析，现报道如下。1 资料与方法1.1 一般资料选择笔者所在医院2014年4月-201

2、5年4月收治的诊断为宫颈疾病的48例患者，年龄1967岁，平均（36.1±4.5岁。患者均有白带异常、白带增多的现象；部分患者有宫颈糜烂；还有部分患者出现性交后阴道出血。1.2 方法1.2.1 标本采集在患者宫颈的鳞柱交界处使用标本毛刷（这些毛刷只用来采集标本的特制毛刷）旋转35圈，在操作过程中动作要轻柔，取下患者宫颈口或颈管处脱落下来的上皮细胞，将标本毛刷用特殊的固定液进行固定，等待送检。1.2.2 进行反向斑点杂交法基因检测将患者的DNA从标本上进行采取，PCR扩增蛋白变性标本；冰浴这些标本；将全自动核酸分子杂交仪启动，而后进行分子杂交（加入膜条后），显色使用显色剂；做完洗脱试验

3、，将膜条取出，而后分析检测结果。3种低危基因型及16种高危基因型在内的19种HPV基因型可通过此方法检测。1.3 诊断标准（1）病理学诊断。按照TBS标准，NILM:无恶性或上皮内病变；LSIL:低度鳞状上皮内病变，分为CINI和/或cini/hpv（湿疣）；有cinn和/或ciNin（ciNn/田）伴或不伴的HSIL（高度鳞状上皮内病变）3-4o（2）细胞学诊断。根据TBS分级，异常细胞包括非典型鳞状细胞、LSIL（低度鳞状上皮内病变）及HSIL（高度鳞状上皮内病变）5-6o1.4 统计学处理采用SPSS17.0软件对所得数据进行统计分析，计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。P0.05

4、为差异有统计学意义。2 结果2.1 HPV-DNA检测结果分型检测所有48例患者宫颈细胞学阳性病例，HPV阳性29例，占60.42%，15例基因型被检测出，分为低危型和高危型，低危型的有HPV6、HPV11、HPV42、HPV44及亚型CP8304（是中国人较为常见的类型）；高危型有HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV52、HPV58、HPV56。其中7例为低危型，占14.58%;17例患者为高危型，占35.42%；5例患者为混合感染，占10.41%。单一型感染第一位为HPV16,所占比例为18.32%第二位为HPV58,占9.57%第三位

5、为HPV39,占7.14%第四位为HPV6,占6.18%第五位为HPV33,占4.56%。2.2HPV分型在不同级别细胞学诊断中的检测结果在HPV分型检测中，HPV的检测率为60.42%LSIL的阳性检出率为92.86%HSIL的阳性检出率为100%两种检测方法的阳性率相比，差异无统计学意义（P0.05）;而ASCUS的检测方法阳性率为41.94%,与LSIL的阳性检测率相比，差异有统计学意义（P0.05）；与HSIL的阳性检测率对比明显，比较差异有统计学意义（P0.05），详见表1。2.3HPV分型检测与宫颈病理结果对比HPV阳性病理诊断为CIN17例，阴性CIN4例，两种检测方法对比，差异

6、有统计学意义（P0.05），详见表2。表1HPV检测在不同级别细胞学诊断中的HPV检测结果细胞学例数（例）HPV阳性例（%）HPV阴性例（%）*（41.94）18（58.06）*3（92.86）1（7.14）HSIL33（100）0合计4829（60.42）19（39.58）表2HPV-DNA分型检测与病理结果对比例HPV检测病理合计*I /HPVCNE / m*低危3317高危*混合感染2215合计*-*2.4在ASCUS细胞学诊断中HPV分型检测与宫颈病理结果对比HPV阳性检测率为46.15%（6/13），阴性检测率为16.67%（3/18），两者比较差异有统计学意义（P0.01）,说明在

7、ASCUS患者中，HPV阳性者宫颈病变检出率较高，详见表3。表3在ASCUS细胞学诊断中HPV分型检测与宫颈病理结果对比例HPV检测病理合计*I/HPVCINII/m*合计*3讨论宫颈癌疾病是女性肿瘤中较为常见的一种疾病，而此病的发病因素多与HPV感染有关7-8,而不同类型的HPV感染发病速度及预后也不一样，有100多种HPV分型是我们已知的，而与生殖道感染有关的有30多种，而与肿瘤有关的有20多种。HPV感染的临床表现可分为低危型和高危型：低危型可引起外生殖器疣、复发性呼吸道多发性乳头瘤病、宫颈细胞学检查异常等良性病变，包括HPV6、11、42等；高危型可引起平疣、宫颈癌及其癌前病变等，包括

8、HPV16、18、33、35、39等。在本次研究中高危型感染的患者为17例，占35.42%，低危型7例，占14.58%。由此可见患者患高危型的几率还是比较大的。地区差异也是HPV基因的一个特点，在全球检测率为第一的是HPV16亚型，而HPV18则是第二位。在亚洲国家最常见的分型为HPV58,而在本次研究中HPV频率排在第一位的是HPV16,所占比例为18.32%第二位为HPV58,占9.57%第三位为HPV39,占7.14%与相关文献对应。在本次研究中得知HPV感染最多见的是单一和双重感染，三重感染是不常见的。宫颈癌的发病与HPV感染密切相关，本次研究结果显示，当患宫颈疾病级别越高时，而HPV感染的概率即在随着提高，可知宫颈疾病的严重程度与HPV感染有很大的关系。宫颈癌的发生不是一朝一夕形成的，是一个漫长的过程，常表现为宫颈接触性出现，如性交后阴道内异常流血，在这时期常不能引起患者的注意，也有患者出现阴道排液增多，常伴有腥臭味，当出现组织坏死的时候，会出现大量脓性白带排出，而到晚期则会引起尿频、尿急、肛门坠胀、大便秘结、里急后重等情况，而到了晚期患者的生活质量受到严重的影响，因此，早期发现，早期筛查是发现此疾病的重点。此外宫颈癌的发生与早婚、早育、多产及性生活紊乱有关，因此也需这些患