色谱分析习题与答案(绝对精华)

1、色谱分析综合体填空：1.氢火焰离子化检测器和热导池检测器分别属于_质量型_和温度型检测器.气相色谱仪的心脏是_色谱柱.2,固定液一般是根据_相似相溶原理选择；在甬极性固定液别离极性组分时,分子间作用力主要是诱导力,极性愈大,保存时间就愈长.3,固定液通常是高沸点的有机化合物,这主要是为了保证固定液在使用温度下有较好的热稳定性,预防发生不可逆的化学反应.5,与填充柱相比,毛细管色谱柱的相比B较大,有利于实现快速分析.但其柱容量_较小一6 .在HPLC仪中,为了克服流动相流经色谱柱时受到的阻力,要安装_耐高压的六通阀.7 .气相色谱分析中,载气仅起输送作用；而液相色谱分析中,流动相还要直姿参加_实

2、际的分配过程一要想提升高效液相色谱的柱效,最有效的途径是使用小粒径填料.8,欲别离位置异构体化合物,宜采用的高效液相色谱的别离模式是_梯度洗脱.9、色谱法中,将填入玻璃管静止不动的一相称为固定相,自上而下运动的一相称为流动相,装有固定相的柱子称为色谱柱.一10、液相色谱检测器一般可用紫外可见分光光度检测器,荧光检测器；气相色谱检测器可用热导检测器,氢火焰离子检测器,电子俘获检测器等.一色语学分析根底:1、色谱塔板理论的假设？答、1在每一个平彼f过程间隔,平衡可以迅速到达；2将载气看作成脉动间歇过程；3试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；4每次分配的分配系数相同.5所有的物质在开始时全部进入零号塔板2

3、、色谱定性的方法都有哪些？答、1用保存时间定性2用相对值保存定性3用保存指数定性4用化学反响配合色谱定性5用不同类型的检测器定性色谱和各种光谱或波谱联用3、标法定量分析时,标物选择应满足那些条件？答：试样中不含有该物质与被测组分性质比拟接近不与试样发生化学反响出峰位置应位于被测组分接近,且无组分峰影响4、色谱分析中,固定相的选择原那么是什么？固定相的选择：气一液色谱,应根据“相似相溶的原那么5、色谱定量分析中为什么要用校正因子？在什么情况下可以不用？答：各种化合物在不同的检测器上都有不同的应答值,所以尽管往色谱仪中注入相同质量的物质,但得到峰面积却不一样,因此峰面积定量时就必须把由色谱仪上得到

4、的峰面积乘上一个系数,得到此成分的质量,在实际分析中,常用某物质做标准,得到一个相对的校正系数,就叫相对校正因子试样中不是所有组分6、总结色谱法的优点.答：色谱法特点1别离效率高2灵敏度高3分析速度快4应用围广样品用量少别离和测定一次完成易于自动化,可在工业流程中使用7、色谱流出曲线可解决的问题有哪些？8、根据你所学知识,填写下表.色谱分析法根本原理应用领域分析对象缺点气相色谱法液相色谱法气相色谱1 .气相色谱的根本设备包括那几局部,各有什么作用？载气系统去除载气中的水、有机物等杂质进样装置：色谱柱：色谱仪的核心部件检测系统2 .试以塔极高度H做指标讨论气相色谱操作条件的选择.3 .试述速率方

5、程式中A、B、C三项的物理意义.答：A涡流扩散项B、纵向扩散项C、传质阻力项4 .为什么可用分辨率R作为色谱柱的总别离效能指标.5,能否根据理论塔板数来判断别离的可能性？为什么？6,对载体和固定液的要求分别是什么？答：载体要求：具有化学惰性好的热稳定性有一定的机械强度有适当的比外表,外表无深沟,以便是固定液成为均匀的薄膜,要有较大的空隙率,以便减小柱压降.对固定液的要求：应对被别离试样中的各组分具有不同的溶解水平,较好的热稳定性,并且不与被别离组分发生不可逆的化学反响.7,试比拟红色担体和白色担体的性能,它们各使用在哪些方面？答；红色担体适宜分析非极性化合物；白色单体适宜分析极性化合物；8,固

6、定液可分为哪几类？为什么这样划分？如何选择固定液.答：固定液按分子作用力分为不易极化非极性固定液易极化非极性固定液难成氢键的极性固定液受质子的极性固定液按极性分类用典型化合物在固定液上的保存性能来表征固定液的选择原那么：“相似相容原那么,固定液和被别离物分子之间的特殊作用力,利用混合物固定液利用协同效应选择固定液9 .色谱定性的依据是什么,主要有哪些定性方法.答；依据：保存时间定性方法：用保存时间定性用相对保存值定性用保存指数定性用化学反响配合色谱定性用不同类型的检测器定性色谱和各种光谱或波谱联用10 .假设一个未知油剂样品,请设计一种气象色谱分析方法,并概述分析过程.液相色谱：11、正相HP

7、LC与反相HPLC勺主要不同之处什么？各适合别离什么物质？答：正相HPLC是指以亲水性的填料做固定相,以疏水性溶剂或混合物做流动相的液相色谱,主要用于别离醇类,类脂代化合物、磷脂类化合物,脂肪酸以及其他化合物.反相HPLC是指以强疏水性的填料作固定相,以可以和水混合的有机溶剂做流动相的液相色谱,主要用于别离生物大分子、卤化物和肽及蛋白质,含卢芳烧,小分子的核酸、核昔酸、多环芳煌等；12、何为梯度洗脱？什么情况下采用梯度洗脱？答：梯度洗脱就是有两种(或两种以上)不同极性的溶剂,在别离过程中按一定程度连续的改变,以改变流动相的配比和极性.适合：具有较宽K围的样品,及所有的组分的色谱峰的K值不能在0

8、.5-20之间大分子样品,相对分子质量大于1000的,尤其是生物样品样品中含有高保存时间的干扰成分,在一次分析中如不把他洗脱出去,就会污染色谱柱,并影响下一次分析.即使在使用等度时也可以使用梯度洗脱选择流动相的比例.3、液相色谱中最常用的检测器是什么检测器,它适合那些物质的检测？答：最常用的是紫外可见分光光度检测器,适合在可见或紫外光区有吸收物质的检测；4、某组分在ODSft上,以80%甲醇作流动相时的保存时间为10min,如果用60%甲醇作流动相,组分的保存时间是增加,还是减小？如果将80%甲醇换成80%异丙醇后,又会怎样变化呢？并请作出解释.5、高效液相色谱法的特点答：特点在于高别离性能、

9、高灵敏度、高分析速度、可以自动化运行6、在一定条件下,两个组分的保存时间分别为12.2s和12.8s计算别离度.要到达完全别离,即R=1.5,所需要的柱长.(n=3600)解:Wb14tR1412.2.n3600XIWb24tr2412.8Jn36002(12.812.2)070.85330,813322R2L11.51Ri0.720.81334.34m别离度：RL20.85337、在一定条件下,两个组分的调整保存时间分别为85秒和100秒,要到达完全别离,即R=1.50计算需要多少块有效塔板.假设填充柱的塔板高度为0.1cm,柱长是多少？解：r21=100/85=1.18n有效=16R2r2

10、1/(r211)2=16X1.52X(1.18/0.18)2=1547(块)L有效=n有效H有效=1547X0.1=155cm即柱长为1.55米时,两组分可以得到完全别离.色谱法是一种别离技术,试样混合物的别离过程也就是试样中各组分在称之为色谱别离柱中的两相间不断进行着的分配过程.其中的一相固定不动,称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体(气体或液体),称为流动相.色谱法：当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用.由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复屡次的分配平衡,使得各组分被

11、固定相保存的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出.2、色谱法分类色谱：气相色谱GC液相色谱LC、超临界流体色谱SFC2 .色谱法分类(1)气相色谱：流动相为气体(称为载气).按别离柱不同可分为：填充柱色谱和毛细管柱色谱；按固定相的不同又分为：气固色谱和气液色谱(2)液相色谱：流动相为液体(也称为淋洗液).按固定相的不同分为：液固色谱和液液色谱.离子色谱：液相色谱的一种,以特制的离子交换树脂为固定相,不同pH值的水溶液为流动相.(3)其他色谱方法薄层色谱和纸色谱：比拟简单的色谱方法凝胶色谱法：测聚合物分子量分布.超临界色谱：CO2流动相.3 .色谱法的特点(1)别离效率高复杂混合物,有机同系物

12、、异构体.手性异构体.(2)灵敏度高可以检测出vg.g-1(10-6)级甚至ng.g-1(10-9)级的物质量.(3)分析速度快一般在几分钟或几十分钟可以完成一个试样的分析.(4)应用围广气相色谱：沸点低于400c的各种有机或无机试样的分析.液相色谱：高沸点、热不稳定、生物试样的别离分析.缺乏之处：被别离组分的定性较为困难.二、色谱别离过程色谱别离过程是在色谱柱完成的.填充柱色谱：气固(液固)色谱和气液(液液)色谱,两者的别离机理不同.气固(液固)色谱的固定相：多孔性的固体吸附剂颗粒.固体吸附剂对试样中各组分的吸附水平的不同.气液(液液)色谱的固定相：由担体和固定液所组成.固定液对试样中各组分

13、的溶解水平的不同.气固色谱的别离机理：吸附与脱附的不断重复过程；气液色谱的别离机理：气液(液液)两相间的反复屡次分气相色谱仪主要部件1.载气系统：包括气源、净化枯燥管和载气流速限制；常用的载气有：氢气、氮气、氮气；净化枯燥管：去除载气中的水、有机物等杂质依次通过分子筛、活性炭等；载气流速限制：压力表、流量计、针形稳压阀,限制载气流速恒定.2 .进样装置：进样装置：进样器+气化室；气体进样器六通阀：推拉式和旋转式两种.试样首先充满定量管,切入后,载气携带定量管中的试样气体进入别离柱；气化室：将液体试样瞬间气化的装置.无催化作用.3 .色谱柱别离柱：色谱柱：色谱仪的核心部件.柱材质：不锈钢管或玻璃

14、管,径3-6毫米.长度可根据需要确定.柱填料：粒度为60-80或80-100目的色谱固定相.液-固色谱：固体吸附剂液-液色谱：担体+固定液.柱制备对柱效有较大影响,填料装填太紧,柱前压力大,流速慢或将柱堵死,反之空隙体积大,柱效低.4 .检测系统：色谱仪的眼睛,通常由检测元件、放大器、显示记录三局部组成；被色谱柱别离后的组分依次进入检测器,按其浓度或质量随时间的变化,转化成相应电信号,经放大后记录和显示,给出色谱图；检测器：通用型一一对所有物质均有响应；专属型一一对特定物质有高灵敏响应；常用的检测器：热导检测器、氢火焰离子化检测器；5 .温度限制系统：温度是色谱别离条件的重要选择参数；气化室、

15、别离室、检测器三局部在色谱仪操作时均需限制温度；气化室：保证液体试样瞬间气化；检测器：保证被别离后的组分通过时不在此冷凝；别离室：准确限制别离需要的温度.当试样复杂时,别离室温度需要按一定程序限制温度变化,各组分在最正确温度下别离；气固色谱固定相：1.种类1活性炭2活性氧化铝3硅胶4分子筛5高分子多孔微球GD粽列气固色谱固定相的特点1性能与制备和活化条件有很大关系；2同一种固定相,不同厂家或不同活化条件,别离效果差异较大；3种类有限,能别离的对象不多；4使用方便.气液色谱固定相固定液+担体支持体:小颗粒外表涂渍上一薄层固定液.固定液特点：固定液在常温下不一定为液体,但在使用温度下一定呈液体状态

16、.1.作为担体使用的物质应满足的条件：比外表积大,孔径分布均匀；化学惰性,外表无吸附性或吸附性很弱,与被别离组份不起反响;具有较高的热稳定性和机械强度,不易破碎；颗粒大小均匀、适度.一般常用6080目、80100目.1.检测器类型浓度型检测器：测量的是载气过检测器组分浓度瞬间的变化,检测信号值与组分的浓度成正比.热导检测器；质量型检测器：测量的是载气中某组分进入检测器的速度变化,即检测信号值与单位时间进入检测器组分的质量成正比.FID;通用型检测器：对所有物质有响应,热导检测器；专属型检测器：对特定物质有高灵敏响应,电子俘获检测器；氢火焰离子化检测器,特点简称氢焰检测器1典型的质量型检测器；2

17、对有机化合物具有很高的灵敏度；3无机气体、水、四氯化碳等含氢少或不含氢的物质灵敏度低或不响应；4氢焰检测器具有结构简单、稳定性好、灵敏度高、响应迅速等特点；5比热导检测器的灵敏度高出近3个数量级,检测下限可达10-12gg-1.N2H2=1111.5氢气空气=110影响氢焰检测器灵敏度的因素各种气体流速和配比的选择N2流速的选择主要考虑别离效能,极化电压正常极化电压选择在100300V围载气种类的选择载气种类的选择应考虑三个方面：载气对柱效的影响、检测器要求及载气性质.在职业病和法庭分析中,经常要测定体液等中的苯、甲苯、二甲苯等有毒成分,采用顶空分析是一种有效、方便、快速的方法.司法部司法鉴定

18、科学技术学院制订了分析水、尿、血中苯类化合物的静态顶空分析方法.5mL青霉素小瓶,取1mL试样水、尿、血,参加0.4标物和约1g硫酸镂至饱和,加盖密封,置于80C的恒温器中30min,取0.6mL顶空的气样色谱分析.色谱柱：2mx2mm；80-100目；固定液PEG20M柱温：110C,以10C/min程序升温到110C.分析血样中的酒精是顶空气相色谱应用最广泛的方法,可检查汽车司机是否酒后驾车.方法：样品平衡温度50C;平衡时间30min;色谱柱：30mx0.53mm；石英毛细管柱；固定液：聚二甲苯硅氧烷；固体样品塑料、食品等的顶空分析.塑料食品包装袋中的甲苯残留量的测定.方法：将塑料食品包

19、装袋剪成30mm10mmt入100mL玻璃注射器,在80C预热20min,用空气稀释为100mL,恒温10min后进样分析.色谱柱：500mmx3mm,填充柱,80-100目；固定液：20%的PEG20M;柱温：80C;最小检测浓度为0.031mg/m2.高效液相色谱法的特点特点：高压、高效、高速、高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效别离分析方法.、单项选择题1 .在液相色谱法中,按别离原理分类,液固色谱法属于.A、分配色谱法B、排阻色谱法C、离子交换色谱法D、吸附色谱法2 .在高效液相色谱流程中,试样混合物在中被别离.A、检测器B、记录器C、色谱柱D、进样器3 .液相色谱流动相过滤必须使用何

20、种粒径的过滤膜？A0.5gmB、0.45gmC0.6gmD、0.55gm4 .在液相色谱中,为了改变色谱柱的选择性,可以进行如下哪些操作？D、改变填料的粒度和柱长A、改变流动相的种类或柱子B、改变固定相的种类或柱长C、改变固定相的种类和流动相的种类5 .一般评价烷基键合相色谱柱时所用的流动相为A甲醇/水83/17B、甲醇/水57/43C、正庚烷/异丙醇93/7D、乙睛/水1.5/98.56 .以下用于高效液相色谱的检测器,检测器不能使用梯度洗脱.A、紫外检测器B、荧光检测器C、蒸发光散射检测器D、示差折光检测器7 .在高效液相色谱中,色谱柱的长度一般在围.A、1030cm2050mC、12m、

21、25m8 .在液相色谱中,某组分的保存值大小实际反映了哪些局部的分子间作用力A、组分与流动相B、组分与固定相C、组分与流动相和固定相D组分与组分9 .在液相色谱中,为了改变柱子的选择性,可以进行的操作A、改变柱长B、改变填料粒度C、改变流动相或固定相种类D改变流动相的流速10 .液相色谱用型检测器是A、紫外吸收检测器B、示差折光检测器C、热导池检测器D、氢焰检测器11 .在环保分析中,常常要监测水中多环芳烧,如用高效液相色谱分析,应选用下述哪种检波器A、荧光检测器B、示差折光检测器C、电导检测器D、吸收检测器12 .在液相色谱法中,提升柱效最有效的途径是A、提升柱温B、降低板高C、降低流动相流

22、速D、减小填料粒度13 .在液相色谱中,不会显著影响别离效果的是A、改变固定相种类B、改变流动相流速C、改变流动相配比D、改变流动相种类14 .不是高液相色谱仪中的检测器是A、紫外吸收检测器B、红外检测器C、差示折光检测D、电导检测器15 .高效液相色谱仪与气相色谱仪比拟增加了A、恒温箱B、进样装置C、程序升温D、梯度淋洗装置16 .在高效液相色谱仪中保证流动相以稳定的速度流过色谱柱的部件是A、贮液器B、输液泵C、检测器D、温控装置17 .高效液相色谱、原子吸收分析用标准溶液的配制一般使用水A.国标规定的一级、二级去离子水B.国标规定的三级水C.不含有机物的蒸储水D.无铅无重金属水18 .高效

23、液相色谱仪与普通紫外-可见分光光度计完全不同的部件是A、流通池B、光源C、分光系统D、检测系统19 .以下哪种是高效液相色谱仪的通用检测器A、紫外检测器B、荧光检测器C、安培检测器D、蒸发光散射检测器20 .高效液相色谱仪中高压输液系统不包括A、贮液器B、高压输液泵C、过滤器D、梯度洗脱装置E、进样器二、判断题：1 .液相色谱分析时,增大流动相流速有利于提升柱效能.2 .高效液相色谱流动相过滤效果不好,可引起色谱柱堵塞.3 .高效液相色谱分析的应用围比气相色谱分析的大.4 .反相键合相色谱柱长期不用时必须保证柱充满甲醇流动相.5 .高效液相色谱分析中,使用示差折光检测器时,可以进行梯度洗脱.6

24、 .在液相色谱法中,提升柱效最有效的途径是减小填料粒度.7 .在液相色谱中,第姆特方程中的涡流扩散项对柱效的影响可以忽略.8 .由于高效液相色谱流动相系统的压力非常高,因此只能采取阀进样.9 .高效液相色谱仪的色谱柱可以不用恒温箱,一般可在室温下操作.10 .高效液相色谱中,色谱柱前面的预置柱会降低柱效.11 .液相色谱中,化学键合固定相的别离机理是典型的液-液分配过程.12 .高效液相色谱分析中,固定相极性大于流动相极性称为正相色谱法.13 .高效液相色谱分析不能分析沸点高,热稳定性差,相对分子量大于400的有机物.14 .在液相色谱法中,约7080%的分析任务是由反相键合相色谱法来完成的.

25、15 .在高效液相色谱仪使用过程中,所有溶剂在使用前必须脱气.16 .填充好的色谱柱在安装到仪器上时是没有前前方向差异的.17 .保护柱是在安装在进样环与分析柱之间的,对分析柱起保护作用,装有与分析柱不同固定相.18 .检测器、泵和色谱柱是组成高效液相色谱仪的三大关键部件.19 .紫外-可见光检测器是利用某些溶质在受紫外光激发后,能发射可见光的性质来进行检测的.20 .应用光电二极管阵列检测器可以获得具有三维空间的立体色谱光谱图.三、简做题1 .为什么作为高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤、脱气?2 .高效液相色谱有哪几种定量方法,其中哪种是比拟精确的定量方法,并简述之.参考答案一、选择题

26、1.D2.C3.B4.C5.A6.D7.A8.C9.C10.B11.A12.D13.B14.B15.D16.B17.A18.A19.D20.E二、判断题1.X2.V3.V4.V5.X6.V7.X8.X9.V10.V11.X12.V13.X14.V15.V16.X17.X18.V19.X20.V三、简做题1 .高效液相色谱仪所用溶剂在放入贮液罐之前必须经过0.45“m滤膜过滤,除去溶剂中的机械杂质,以防输液管道或进样阀产生阻塞现象.所有溶剂在上机使用前必须脱气；由于色谱住是带压力操作的,检测器是在常压下工作.假设流动相中所含有的空气不除去,那么流动相通过柱子时其中的气泡受到压力而压缩,流出柱子进

27、入检测器时因常压而将气泡释放出来,造成检测器噪声增大,使基线不稳,仪器不能正常工作,这在梯度洗脱时尤其突出.2 .高效液相色谱的定量方法与气相色谱定量方法类似,主要有归一化法、外标法和标法.其中标法是比拟精确的定量方法.它是将量的标物加到量的试样中,在进行色谱测定后,待测组分峰面积和标物峰面积之比等于待测组分的质量与标物质量之比,求出待测组分的质量,进而求出待测组分的含量一.选择题1 .在色谱分析中,用于定量的参数是BA保存时间B调整保存值C峰面积D半峰宽2 .塔板理论不能用于A塔板数计算关B塔板高度计算C解释色谱流出曲线的形状D解释色谱流出曲线的宽度与哪些因素有3 .在气-固色谱分析中,色谱

28、柱装入的固定相为A一般固体物质B载体C载体+固定液,D固体吸附剂4.当载气线速越小,式方程中,分子扩散项B越大,所以应选以下气体中哪一种作载气最有利?AH2BHeCArDN25 .试指出下述说法中,哪一种是错误的？CA根据色谱峰的保存时间可以进行定性分析B根据色谱峰的面积可以进行定量分析C色谱图上峰的个数一定等于试样中的组分数D色谱峰的区域宽度表达了组分在柱中的运动情况6 .为测定某组分的保存指数,气相色谱法一般采取的基准物是：CA苯B正庚烷C正构烷烧D正丁烷和丁二烯7 .试指出以下说法中,哪一个不正确？气相色谱法常用的载气是CAN2BH2CO2DHe8 .试指出以下说法中,哪一个是错误的?A

29、固定液是气相色谱法固定相BN2、H2等是气相色谱流动相C气相色谱法主要用来别离沸点低,热稳定性好的物质D气相色谱法是一个别离效能高,分析速度快的分析方法9 .在气-液色谱法中,首先流出色谱柱的组分是A溶解水平小B吸附水平小C溶解水平大D吸附水平大10 .根据第姆特议程式,指出下面哪种说法是正确的？(A)A最正确流速时,塔板高度最小B最正确流速时,塔板高度最大C最正确塔板高度时,流速最小D最正确塔板高度时,流速最大二.填空题1 .按流动相的物态可将色谱法分为气相色谱法和液相色谱法.前者的流动相的气体,后者的流动相为液体.2 .气相色谱法多用高沸点的有机化合物涂渍在惰性载体上作为固定相,一般只要在

30、450C以下,有1.5至10Kpa的蒸气压且稳定性好的有机和无机化合物都可用气相色谱法进行别离.一3 .气相色谱仪由如下五个系统构成：气路系统、进样系统、别离系统、温控系统和检测记录系统.4.气相色谱常用的检测器有热导检测器,氢火焰检测器电子捕获检测器和火焰光度检测器三、简做题1、组分A、B在某气液色谱柱上的分配系数分别为495和467.试问在别离时哪个组分先流出色谱柱.答：根据分配系数的定义:c分配系数小的组分先流出色谱柱,因此B先流出色谱柱K,Cg答：由2(tR(2)tR(1)Wb(1)Wb(2)2、为什么说别离度R可以作为色谱柱的总别离效能指标？tR(2)tR(1)1(Wb(1)Wb(2

31、)及JLtR(2)tR、.后二Ir211可知R值越大,相邻两组分别离越好.而R值的大小那么与两组分保存值和峰的R-R(2)R(1)2,14tR(2)4r2,1宽度有关.对于某一色谱柱来说,两组分保存值差异的大小主要取决于固定液的热力学性质,反映了柱选择性的好坏；而色谱峰的宽窄那么主要由色谱过程的动力学因素决定,反映了柱效能的上下.因此R实际上综合考虑了色谱过程的热力学和动力学性质,故可将其作为色谱柱的总别离效能指标.3、气相色谱定性的依据是什么？主要有哪些定性方法？答：不同组分由于其结构不同,与固定相的作用同,因而流出柱的时间不相同4、如何选择气液色谱固定液？答：依据相似相溶原那么选择固定液.

32、5、气相色谱定量的依据是什么？为么要引入定量校正因子？有哪些主要的定量方法？各适于什么情况？答：色谱定量的依据是：在一定的色谱条件下,进入检测器的被测组分的质量m与检测器产生的响应信号(峰面积A或峰高)成正比,即：m,f,A,引入定量校正因子的原因：由于a的大小和组分的性质有关,因此,同一检测器对不同组分具有不同的响应值,故相同质量的不同物质通过检测器时,产生的峰面积不等,因而不能直接应用峰面积计算组分的含量.为此,引入“定量校正因子以校正峰面积,使之能真实反映组分含量.归一化法：应用该方法的前提条件是试样中各组分必须全部流出色谱柱,并在色谱图上都出现色谱峰.外标法：即所谓校准曲线法(A-c曲

33、线).外标法简便,不需要校正因子,但进样量要求十分准确,操作条件也需严格限制.适用于日常限制分析和大量同类样品的分析.标法将一定量的纯物质作为标物,参加到准确称取的试样中,根据被测物和标物的质量及其在色谱图上相应的峰面积比,求出某组分的含量.标法准确,操作条件要求不严.四、计算题13min及16min,后者的峰底宽度为1min,计算:1、在一根长3m的色谱柱上,分析某试样时,得两个组分的调整保存时间分别为1该色谱柱的有效塔板数;2两组分的相对保存值;3)如欲使两组分的别离度R=1.5,需要有效塔板数为多少？此时应使用多长的色谱柱?解：neff_tR254(W7T)16(l)16162()409

34、61tR(2)tR(1)假设使R=1.5,柱效能为_2nef16?R(,1_2_)16?1.5?(11.23)21.2311029此时对应的柱长为:1029L3.00.75(m)40962、丙烯和丁烯的混合物进入气相色谱柱后测得：空气、丙烯、丁烯保存时间分别为0.5,3.5,4.8min,其相应的峰宽分别为0.2,0.8,1.0mino计算1丁烯在这个柱上的分配比是多少?2丙烯和丁烯的别离度是多少?解：kmsmg城也坐8.6t00.52(tR(2)Wb(2)52(4.83.5)1.44Wb(1)1.00.83、化合物A与正二十四烷及正二十五烷相混合注入色谱柱试验,测得的调整保存时间为:A10.

35、20min；nC24H509.18min；nC25H5211.56min.计算化合物A的保存指数Ia.li100(n10024lgtR(i)1gtR(n)一一lgtR(n1)lgtR(n)lg10.2lg9.18lg11.56lg9.18)2445.74、对只含有乙醇、wi解：用归一化法m.-100%mm.mi100%mnA1f1A2f2AifiATTAnfnA,f,100%_100%Afii1fi5.00.649.00.74.00.787.00.791815w乙醇A.f.iinAifii1100%_5.00.64100%176%同理正庚烷、苯和乙酸乙酯的质量分数分别为34.7%、17.2%、

36、30.5%.18.15.5、用甲醇作标,称取0.0573g甲醇和5.8690g环氧丙烷试样,混合后进行色谱分析,测得甲醇和水的峰面积分别为164mm和186miT1校化合物乙醇正庚烷苯乙酸乙酯2Ai/cm5.09.04.07.0fi10.640.700.780.79正庚烷、苯和乙酸乙酯的某化合物进行色谱分析,其测定数据如下:计算各组分的质量分数.正因子分别为0.59和0.56.计算环氧丙烷中水的质量分数.解：fAI水A水m水=m.f甲A甲m*fBAb水100=甲甲100=0.561860.05730.59164ioo1055.86901、液相色谱有几种类型？它们的保存机理是什么？在这些类型的应

37、用中,最适宜别离的物质是什么？解：液相色谱有以下几种类型：液-液分配色谱；液-固吸附色谱；化学键合色谱；离子交换色谱；离子对色谱；空间排阻色谱等.液-固吸附色谱是通过组分在两相间的屡次吸附与解吸平衡实现别离的.最适宜别离的物质为中等相对分子质量的油溶性试样,但凡能够用薄层色谱别离的物质均可用此法别离.其中；液-液分配色谱的保存机理是通过组分在固定相和流动相间的屡次分配进行别离的.可以别离各种无机、有机化合物.2、在ODS固定相上,以甲醇为流动相,某组分的分配容量k1=1.2,如以乙睛为流动相,其k增加还是减少？为什么？解：据题意为反相色谱体系.k值增加,在反相色谱体系中,流动相由甲醇变为乙睛,

38、溶剂极性参数由5.1变为5.8,增加了,但组分在流动相中的溶解度反而减小,所以k值增大.由1.2增大为2.24.3、在反相色谱中,流动相从40%V/V甲醇一水改变为60%V/V甲醇一水,问组分的调整保存值将改变多少？为什么？P甲醇=5.1,P水=5.1提示：对于由溶剂A和B组成的二元混合溶剂,其极性可表示为Pab=aPabPb式中a和b分别为溶剂A和B在混合溶剂中的分数.解：在40%配比时,混合溶剂的极性为P1=0.46X5.10.6X10.2=8.16在60%配比时,混合溶剂的极性为P2=0.6X5.10.4X10.2=7.14P2=P2-P2=7.14-8.16=-1.02根据反相色谱体系

39、：在反相色谱中,流动相的极性变弱P由8.16变为7.14,溶剂强度增加,洗脱水平增加,因而使组分的调整保存时间减少到原来的1/3.2o4、某色谱体系采用25%三氯甲烷/正己烷为流动相,发现组分别离不十分理想,想通过改变流动相的选择性来改善别离选择性,选用乙醴/正己烷为流动相,问乙醛/正己烷的比例为多少？PCHCl3=5.1,P乙醛=5.1提示：流动相选择性的改变是通过保持溶剂强度不变时改变流动相组成来实现的,改变前流动相A/B和改变后的流动相A/C的组成有以下关系：解：25%的CHCl3正己烷与37%乙醛/正己烷的溶剂强度相等,但对样品的别离选锋性不同.5、什么叫离子色谱？解：在低交换容量的别

40、离柱上,别离样品离子,而在高交换容量的抑制柱上,通过化学反响,把具有高电导的流动相转变为低电导的流动相,这样就可以在电导检测器上对被别离样品离子进行高灵敏度的检测.这种采用别离柱、抑制柱和电导检测器相结合的离子交换色谱称为离子色谱.6、为什么凝胶色谱中任何组分的分配系数必须符合00K01?如果Kl说明什么问题？解：由于组分的分配系数为K=Cs/Cm,Cs与Cm分别为组分在固定相和流动相中的浓度,当分子直径大于固定相孔径时,此时Cm=0,：K=0.当分子直径小于孔径时,组分向孔隙流动相扩散,到达平衡时,一半组分在孔隙,一半在孔隙外,此时K=1.0,假设分子直径介于以上两种极限情况之间,K一定介于

41、0与1之间.可见在凝胶色谱中,任何组分的分配系数为0031,如果K1,这说明此时的别离方式已不是纯粹的凝胶色谱,其别离过程受到其他作用力如吸附的支配.7、某人用凝胶色谱别离一高聚物样品,别离情况很差,他改变流动相的组成后,别离情况大为改良,这种说法对吗？为什么？解：这种说法不对.在凝胶色谱中流动相只起运载的作用,不能依靠改变流动相的性质和组成来改善色谱体系的选择性.凝胶色谱的选择性只能通过选择适宜的固定相,根据固定相孔隙的大小以及孔径分布围的最正确化来实现.题目中“改变流动相组成后,别离情况大为改良是不可能的.8、选择题液相色谱用型检测器是A.紫外吸收检测器B.示差折光检测器C热导池检测器D.

42、荧光检测器解：B.示差折光检测器.A、D为选择性检测器,C为气相色谱用检测器.9、为了测定邻氨基苯酚中微量杂质苯氨,现有以下固定相：硅胶、ODS键合相,以下流动相：水一甲醇、异丙酸一己烷,应选用哪种固定相、流动相？为什么？解：邻氨基苯酚中微量杂质苯氨测定,为了良好别离,应让苯氨先出峰,由于苯氨的极性小于邻氨基苯酚,因此应采用正相色谱法,应选硅胶为固定相,异丙酸一己烷为流动相.10、在ODS键合固定相,甲醇一水为流动相时试判断四不苯并二氮杂苯的出峰顺序.为什么？解：色谱条件为反相键合色谱体系,在反相色谱体系中极性大的组分k小,首先出峰,按四种苯并二氮杂苯的结构,出蜂顺序为4321o11、用多孔凝胶为固定相,流动相为四氢味喃,别离以下各组分,试判断各组分的出蜂顺序.为什么？解：凝胶色谱组分的出峰次序是根据分子尺寸大小,大的先出峰.故出峰次数为n=9、8、7.12、别离含胺类和季镂接的样品,以0.2MHClO4溶液为固定相,以丁醇一二氯甲烷一己烷为流动相,组分A的保存时间为8.2min,死时间为1.0min.在另一卞g柱上.其他条件均不改变,只将HClO4的浓度增加一倍,间组分A在第二根柱上的移动速率,是在第一根