PBS缓冲液配制

1、精选文档PBS缓冲液配制 0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调整溶液的pH值至7.4，最终加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4冰箱中。需要留意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中全部的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调整渗透压的。假如是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定

2、容、灭菌消毒。 NaCl 8.0g ； KCl 0.2g ； Na2HPO4 1.44g ； KH2PO4 0.24g ；加蒸馏水 至 1000ml，调整pH 到 7.4（用Na2HPO4或KH2PO4调整） 。 用于免疫反应时可加入 0.1%叠氮钠（0.1g/100ml PBS）;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用0.01%柳硫汞。PBS缓冲液配方PH            7.6      7.4

3、0;        7.2        7.0 H2O       1000     1000     1000     1000 NaCl         8.5   

4、;   8.5        8.5         8.5 Na2HPO4 2.2      2.2       2.2         2.2 NaH2PO4 0.1      0.2&

5、#160;      0.3         0.4依据阅历来看，新颖配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了转变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显转变（我亲自测过偏酸）。所以做试验的同学可要留意了，PH值可能会影响试验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强试验条件把握问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，假如发生偏酸或偏碱，留意重新换新液。 PBS缓冲液 称取NaCl

6、 8g，KCl 0.2g，Na2HPO412H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。PBST缓冲液 取300l Tween-20 加入PBS 100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。 假如是把全部固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更便利的方法。 十倍稀释以后，PH自动上升到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次  PH8.0的PBS配方具体1. NaCl 1

7、37mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L 2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。3. 滴加浓盐酸将pH值调整至8.0，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。4. 高温高压灭菌后，室温保存。留意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。  0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)的配制：    甲液：0.05mol/L Na2H

8、PO4溶液 ：称取磷酸氢二钠9.465g 7.099g,加蒸 馏水至1000ml ;    乙液：0.05mol/L KH2P04溶液: 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1。     将甲乙液分装在棕色瓶内，于4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表: pH    甲液ml   乙液mI 5.29   2.5      97.5 5.59 

9、  5.0      95.0 5.91   10.0     90.0 6.24   20.0     80.0 6.47   30.0     70.0 6.64   40.0     60.0 6.81   50.0     50.0 6.98   60.0     40.0 7.17   70.0     30.0 7.38   80.0   &#