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文档简介

1、1.1DNA重组技术的基本工具编写教师:申晓飞 审定教师:吴丽雪学习目标1、 了解基因工程(DNA重组技术)的概念。2、 简述DNA重组技术三种基本工具:限制性内切酶、DNA连接酶、载体的作用3、 认同基因工程的诞生离不开理论研究和技术创新。学习重点: DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。学习难点:基因工程载体需要具备的条件学习方法:阅读教材、自主探究、小组讨论、同学展示。问题导读评价单一、知识回顾:回想一下“基因的表达”,对本节课很有帮助哦;-) 各种生物间的性状千差万别,这是为什么呢?二、进入文本:大家在阅读教材两遍之后很容易摘抄回答好地:-P 1、 第一遍通读教材P1-7在书上划出你

2、认为重要的知识点。2、 在第二遍阅读中,从P1总结一下吧:什么是基因工程? 3、 在第二遍阅读中,你一定能从P4找出:DNA重组技术至少需要哪三种工具? 4、 在第二遍阅读中,细心的你从P4、5中把以下问题解决掉: 准确切割DNA的“手术刀”是什么?它是如何准确切割DNA的? 5、 在第二遍阅读中,从P5找一找:将DNA片段再连接起来的“缝合针”是什么? 它是如何将DNA片段“缝合”起来的? 6、 在第二遍阅读中,你就要根据P6用你科学严谨的语言来表达了:是什么运输工具将体外重组好的DNA导入受体细胞的?作为运输工具的它们必须具备哪些条件?3、 构建网络:三读教材画个美丽的概念图吧() DNA

3、重组技术基本工具载体DNA连接酶限制性内切酶4、 反思:(一)来个四读看看你通过阅读教材你都有哪些收获*(_)/* 1. 限制性核酸内切酶“分子手术刀” 2. DNA连接酶“分子缝合针” 3. 基因进入受体细胞的载体“分子运输车” (二)最后的五读你有哪些还是不特别明白呢_ 小组讨论后把不能解决的问题填写到问题生成评价单中五、评价:请以下各位客观的给个分数吧 (。(_)。) (百分制) 自我评价: 同伴评价: 学科长评价:展示拓展评价单1、 基础自测:书看够了吗?确实够了吗?试试牛刀吧 3) 1以下说法正确的是 A所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列B质粒是基因工程中惟一的运载体C运载体

4、必须具备的条件之一是:具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接DDNA连接酶可以用于DNA复制2.下列四条DNA分子,彼此间具有粘性末端的一组是 A B C D3不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A能复制 B有多个限制酶切点 C具有标记基因 D它是环状DNA4.下列关于限制酶的说法不正确的是A.限制酶主要从原核生物细胞中分离纯化B.不同的限制酶一般识别不同的核苷酸序列C.限制酶能识别特定的核苷酸序列,体现了酶的专一性D.限制酶的作用只是用来提取目的基因5科学家常选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是A提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B有利于检测目的基因否导入受体细胞

5、C增加质粒分子的相对分子质量 D便于与外源基因连接6下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤,这一步需用到的工具是A DNA连接酶和解旋酶 BDNA聚合酶和限制酶C限制酶和DNA连接酶 DDNA聚合酶和RNA聚合酶7基因工程中涉及多种工具酶: 限制性内切酶是一类能识别特定核苷酸序列并在特定位点切割双链DNA的“基因剪刀”。被限制酶识别的序列往往正反读顺序相同,断裂的位置交错,但又是围绕着一个轴线(对称轴)对称排列,如下左图。PstI和EcoRI都是限制酶。请补全下右图中的互补链,画出对称轴以及切割后的产物。 2、 能力提升:是不是太简单了?来点需要思考讨论的。1依右图有关基因工程的工具酶功能的

6、叙述,不正确的是 A切断a处的酶为限制核酸性内切酶 B连接a处的酶为DNA连接酶C切断b处的酶为解旋酶 D切断b处的为限制性内切酶2下列关于各种酶作用的叙述,不正确的是ADNA连接酶能使不同脱氧核苷酸的磷酸与脱氧核糖连接BRNA聚合酶能与基因的特定位点结合,催化遗传信息的转录C一种DNA限制酶能识别多种核苷酸序列,切割出多种目的基因D胰蛋白酶能作用于离体的动物组织,使其分散成单个细胞3在DNA 测序工作中,需要将某些限制性内切核酸酶的限制位点在 DNA上定位,使其成为 DNA 分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验:用限制酶 Hind,BamH和二者的混合物分

7、别降解一个 4kb(1kb即1千个碱基对)大小的线性DNA 分子,降解产物分别进行凝胶电泳,在电场的作用下,降解产物分开,如下图所示。据此分析,这两种限制性内切核酸酶在该DNA 分子上的限制位点数目是以下哪一组?AHind1个,BamH2 个 BHind2个,BamH3个CHind2个,BamH1 个 DHind和BamH各有2 个3、 走近高考:都没问题了?咱们高考吧().例1(2005高考广东)以下有关基因工程的叙述,正确的是 ( )A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强例22005天津

8、(1)限制性内切酶的识别序列和切点是GGATCC,限制性内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶的切点。请画出质粒被限制酶切割后形成的黏性未端。_请画出目的基因两侧被限制酶切割后形成的黏性未端。_在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性未端能否连接起来?为什么?_4、 反思:各位通过练习都有什么收获和问题呢?写下来做个纪念吧。5、 评价:又来了,各位能给个满分吗?(百分制)自我评价: 同伴评价: 学科长评价: 问题导读评价单1、 生物体的不同性状是基因选择性表达的结果。2、 1、 2、基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通

9、过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。 3、限制性内切酶、DNA连接酶、载体 4、 “手术刀”是限制性内切酶。它能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 5、“缝合针”是DNA连接酶。它通过恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键从而“缝合”DNA片段。 6、运输工具是载体。必须具备的条件:能自我复制、 有一个或多个限制酶切点 、 有一定的标志基因、对受体细胞无害等。DNA重组技术基本工具载体DNA连接酶限制性内切酶3、 4、 1. 限制性核酸内切酶“分子手术刀” (1)限制性内切酶的来源:主要是从原核生物中分离纯化来的。4000多种。 (2)限制性内切酶的切割方式:在识别序列的中心轴线两侧将DNA切开,切口是黏性末端。沿着中心轴线切开DNA,切口是平末端。2. DNA连接酶“分子缝合针” (3)DNA连接酶的分类:E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键,T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。 3. 基因进入受体细胞的载体“分子运输车” (4)载体的分类:质粒:常存在于原核

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