血液透析患者生化项目检测中抗凝剂的使用分析

1、血液透析患者生化项目检测中抗凝剂的使用分析龚卫锋1,毛慧2(1西安市中心医院输血科,西安710003;2延安市中心血站摘要:目的建立一种防止透析患者血清自凝,以免影响检测正常进行的方法。方法对透析患者血液中加肝素D甘露糖氟化钠(heparin D-mannose sodium fluoride抗凝剂(HMF组和血清分离后加HMF抗凝剂组与无抗凝剂组样本进行检测。结果未加入抗凝剂组、加HMF抗凝剂组、血清分离后加HMF抗凝剂组各项生化指标中,除Na+与CK外,其余各项指标均无统计学差异。结论在血液透析患者血液或血清中加入抗凝剂再进行检测是一种可靠、稳妥的方法和手段。关键词:血液透析;生化检测;抗

2、凝剂中图分类号:44611文献标志码:A文章编号:10076611(201307055403DOI:103969/JISSN10076611201307013血液透析是一个体外循环过程,血液与管道和透析膜的接触可触发机体的凝血系统,导致血液凝固,因此,血液透析时常使用肝素抗凝剂预防凝血。但是对有严重活动性出血或自身凝血功能明显异常或近期经受大的手术或创伤的透析患者必须采用无肝素透析,未使用抗凝剂血液透析过程中发生凝血的机率更大,肾透析患者有血凝异常,或受透析液影响,其血液凝固性发生改变,所以在血液透析患者送检血样中加入合适的抗凝剂十分必要。本文主要探讨使用肝素D甘露糖氟化钠(HMF抗凝剂来解决

3、透析患者血清自凝影响生化项目检测的问题。笔者为了探讨肝素D甘露糖氟化钠抗凝剂抗凝血浆用于生化指标测定的可行性,用肝素D甘露糖氟化钠抗凝血浆与非抗凝管的血清进行28项生化指标的检测,现将结果报道如下。1材料与方法11抗凝管配制肝素D甘露糖氟化钠(HMF抗凝管:每管加含有60g/L D甘露糖和2g/L氟化钠(NaF的水溶液300l,再加6250kU/L肝素钠注射液5l1。12血标本留取抽取52名肾透析患者静脉血液,各分装3ml 于透析患者血液中加肝素D甘露糖氟化钠(NaF抗凝剂(HMF组和血清分离后加HMF抗凝剂组与无抗凝剂组各组患者样本试管内,用于分析血液生化检测结果。抗凝血液中抗凝剂含量为:

4、HMF管含肝素10kU/L,D甘露糖6g/L,NaF02 g/L。13测定项目与试剂本实验室开展的28个实验项目,K+、Na+、Cl、Ca2+测定用离子选择电极法,肌酸激酶(CK、丙氨酸氨基转移酶(ALT、天门冬氨酸氨基转移酶(AST、碱性磷酸酶(ALP、-谷氨酰基转移酶(GGT、胆碱酯酶(CHE、醛缩酶(ALD、-L岩藻糖苷酶(AFU、淀粉酶(AMS、LDH检测采用速率法,总蛋白检测采用双缩脲法,白蛋白检测采用溴甲酚绿法,总胆红素(TBIL、直接胆红素(DBIL检测采用钒酸盐氧化法,胆酐、HDL-C、LDL-C检测采用酶法,TC、TG检测采用氧化酶法,尿酸(UA检测采用TOOS法,葡萄糖检测

5、采用己糖激酶法,Apo A1、Apo B检测采用透射比浊法,Mg2+检测采用终点法, Beckman LX21全自动生化分析仪用于28个项目测定,28个项目试剂均购于北京中生公司。14方法不含抗凝剂的各管优先检测,以防其血清自凝,含上述抗凝剂的各管随后检测。不含抗凝剂的各管血清中加入抗凝剂与不含抗凝剂的各管检测结果做对照。参照全国临床检验操作规程及试剂盒说明进行相关检测2。15统计学分析每例样品经3次重复测定,结果取均值,以珋xs表示。采用SPSS100统计软件,使用抗凝剂处理血浆结果分别与非抗凝剂处理的血清结果进行比较,采用t检验。P005为差异有统计学意义。2结果不含和含上述抗凝剂的各管结

6、果分析见表1。从表1可知,加HMF抗凝剂组和血清分离后加HMF抗凝剂组与无抗凝剂组各项生化检查结果比较,除CK和Na+两项指标有统计学差异外,其他各项均无统计学差异(P005。3讨论WHO于2002年发表了一个专题报告,就不同抗凝剂制备的血浆在临床检验中的应用进行了详尽的评述,并推荐在56项检验项目中使用血浆3。从·455·J Shanxi Med Univ,Jul2013,Vol44No7表1加HMF抗凝剂组和血清分离后加HMF抗凝剂组与无抗凝剂组各项生化检查结果比较(n=52实验项目无抗凝剂组加HMF抗凝剂组血清分离后加HMF抗凝剂组P1P2CK/(IU/L162372

7、515116041542604001005 ALT/(IU/L496834938150183005005 AST/(IU/L584915878858985005005 ALP/(IU/L1586671596531570642005005 GGT/(IU/L612846188160884005005 CHE/(IU/L326714123253144732831452005005 ALD/(IU/L861284138715005005 AFU/(IU/L480804708049083005005 AMS/(IU/L820130810140830150005005 LDH/(IU/L17506801

8、7606701770690005005总蛋白/(g/L702148714136693147005005白蛋白/(g/L435674297244578005005 TBIL/(mol/L163721637215871005005 DBIL/(mol/L482648264924005005肌酐/(mol/L963213972198983203005005 UA/(mol/L326414153283142332911437005005 TC/(mmol/L452224582345722005005 TG/(mmol/L186072189071187073005005 HDL-C/(mmol/L127

9、056128054130051005005 LDL-C/(mmol/L203082201087208082005005 Apo A1/(g/L132078134075133076005005 Apo B/(g/L153083151082154087005005葡萄糖/(mmol/L576133579137581135005005 Mg2+/(mmol/L089046091043088048005005 Ca2+/(mmol/L243112241114247115005005 K+/(mmol/L432151435142438146005005 Na+/(mmol/L14125731523592

10、1519593005005 Cl/(mmol/L101541710194121023408005005 P1值表示无抗凝剂组与加HMF抗凝剂组比较结果的P值,P2值表示无抗凝剂组与血清分离后加HMF抗凝剂组比较结果的P值表1可知,不含和含上述抗凝剂的各管结果大部分项目无统计学差异,所以为防止透析患者血液在样本检测期间发生自凝,最好选用加入抗凝剂管为佳,否则,样本在检测期间发生自凝,极易堵塞检测分析仪管路系统,造成管路堵塞,清洗费时,并且损耗清洗剂,不能及时发出结果。血清和HMF抗凝剂在未抗凝血血清中后期加入各管结果大部分检测结果无统计学差异,所以为防止透析患者血液在样本检测期间发生自凝,最好选

11、用加入抗凝剂管,未加入抗凝剂管在血清分离后,加入抗凝剂也可以。除CK 和Na+两项指标有统计学差异外,其余指标在加HMF抗凝剂组和血清分离后加HMF抗凝剂组与无抗凝剂组比较差异不明显,这表明加入HMF抗凝剂代替血清检测上述28项生化项目是可行的,加入抗凝剂节约了清洗仪器管路系统试剂,解决了因未加入抗凝剂透析患者血液分离不及时而不能按时发出实验报告的麻烦,避免了未加入抗凝剂样本易溶血而影响实验结果的问题,有利于临床检验工作提高检验速度和检验质量,值得普及和推广。在血液透析的过程中,透析液电解质浓度与正常血浆相近,并可按临床情况予以调整,如果产生凝血会使透析的效果下降,血管内凝血会使血压升高,引起

12、脱水过多,造成透析患者血液丢失,严重者会导致贫血;持续而严重的贫血,使心脏发生无法逆转或只能部分逆转的变化,如左心室肥大或左心室扩张,增加血液透析患者死亡机会。因此,如何减少透析·555·山西医科大学学报,2013年7月,第44卷第7期膜发生严重凝血现象非常重要。对于检验方面,防止血液异常凝固对实验检测正常进行十分重要。维持性血透病人的血钙水平多数偏低,透析液钙含量应在15175mmol/L之间,血钙水平偏低会影响凝血功能,使血液凝固时间增加。通常透析患者出现低钙血症,需要补充钙盐、活性VitD3,并提高透析液的钙浓度。但下列情况可产生高钙血症:继发性甲状腺机能亢进、血浆磷

13、浓度迅速降低、大量补充钙盐、活性VitD3、急性高钙血症、使用钙离子交换树脂或噻嗪类药物。而钙离子浓度升高会促进血液凝血系统活性增加,是透析患者血清自凝的原因之一。HMF抗凝剂稳定性好,是一种能较好地运用于生化检测的实验试剂,对于透析患者来说,透析过程中加入肝素量过少或补充钙制剂过多都会对血液凝血系统造成影响,有些患者凝血系统异常,所以,加入适当抗凝剂是必要的。肝素是通过与抗凝血酶结合,加强抗凝血酶灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而阻止凝血酶的形成,并有阻止血小板聚集等多种抗凝作用4。有文献报道肝素对阳离子有一定的螯合作用,使抗凝静脉血阳离子检测结果偏低5。肝素钠抗凝血浆钠的浓度与血清钠浓度也存在差

14、异(P005这与抗凝剂本身所含成分有关,但是这种差异在临床中无实际意义6。有报道指出肝素对第一代-L-岩藻糖苷酶(AFU试剂有基质效应7,改进后的第二代-L-岩藻糖苷酶(AFU试剂采用了目前最先进的对硝基苯酚速率法,用MG-2氯对硝基苯酚-L岩藻糖苷作为底物,灵敏度、精密度、抗干扰及试剂稳定性都很高8。总之,相对枸橼酸钠、HM、HMF和QAAC抗凝剂,其中以HMF作用最好,且较适用多种生化检查,对透析患者引起的凝血异常标本最为适用,从实验结果看,未加入抗凝剂组、加HMF抗凝剂组、血清分离后加HMF抗凝剂组各项生化指标大部分无统计学差异,因此,在透析患者凝血异常标本中加入HMF抗凝剂节约了检测时

15、间,同时预防了标本异常凝固引起的仪器阻塞现象的发生。抗凝剂对保证血浆和细胞的快速分离,缩短患者等候时间具有重要意义。肝素D甘露糖氟化钠抗凝能避开血液凝固过程,可尽快分离标本,故其测定值更能反映体内真实情况。虽然一些干扰因素可能会影响实验室测试结果,我们的数据表明,心脏肌钙蛋白I检测结果在安全剂量下在不同的采血管结果无统计学上的差异,与此相反,CK-MB和肌红蛋白检测结果因抗凝剂的有无及抗凝剂的种类变化而改变,这与临床诊断没有相关性9。文献报道肝素被认为是对生化结果影响较小的抗凝剂10,此次实验结果与其结论亦相符。参考文献:1孙永顺血糖测定四种抗凝剂的比较和评价J中华医学检验杂志,1991,14

16、(2:872叶应妩,王毓三,申子瑜全国临床检验操作规程M3版南京:东南大学出版社,2006:6186473WHOUse of anticoagulants in diagnostic laboratory investigationsEB/OLhttp:/whqlibdocwhoint/hq/2002/WHO_DIL_LAB_991_ev2pdf,200224温洁,王雅杰,张丽君真空采血管的使用与生化检验的质量控制J哈尔滨医科大学学报,2002,36(5:4064075唐龙泉不同仪器检测电解质结果分析J医学信息,2010,23(4:106910706任继欣两种肝素抗凝血浆对检测8项生化指标的影响J国际检验医学杂志,2012,33(16:204720487杨永红肝素抗凝血浆用于检测十项酶活力生化指标的探讨J检验医学与临床,2005,2(4:1801828段俊林-L岩藻糖苷酶的研究进展J国际检验医学杂志,2008,29(8:7317329J Daves M,Trevisan D,CeminDifferen