实验性镉中毒对三穗鸭免疫器官及免疫效果的影响.docx

1、文章编号1001-3601(2013)11-0671-0136-03实验性镉中毒对三穗鸭免疫器官及免疫效果的影响陈佳琪械，嵇辛勤带*,文明口，傅心亮“2（1.贵州大学动物科学学院，贵州贵阳550025；2,贵州省动物疫病研究室，贵州贵阳550025）摘要为探明镉对三穗鸭机体的危害及预防重金属污染提供科学依据，选取健康三穗雏鸭80只，通过添加一定剂量的镉饲喂雏鸭，同时设立对照组，分别于26日龄、52日龄、78日龄和104日龄时采集血液、法氏囊、胸腺和脾器官组织，测定禽流感H5的效价、疫器官指数和观察病理变化。结果表明：随着日龄增长镉中毒免疫组鸭的禽流感H5免疫效价显著下降，52日蜂后效价不合格（

2、HI<41og2）；免疫器官法氏囊、胸腺和脾脏存在明显的萎缩、坏死、出血等现象；中毒组和中毒免疫组免疫器官指数明显低于对照组，除脾脏指数在26日龄时与对照组间差异不显著外，其他日龄均显著或极显著低于对照组。说明，镉残留对三穗鸭的免疫器官有实质性损伤，同时影响鸭禽流感的免疫应答。关键词镉中毒；三穗鸭；免疫器官指数；禽流感H5抗体效价；贵州中图分类号S834文献标识码AImmuneEffectofExperimentalCadmiumPoisoningonSansuiDuckCHENJiaqi'2,JIXinqinU2*,WENMingu2,FUXinliang1-2(1.Colle

3、geofAnimalScience,GuizhouUniversity>Guiyang,Guizhou550025；2.LaboratoryforAnimalEpidemicDiseaseofGuizhou,GuiyangGuizhou550025,China)Abstract:InordertoexploreCadmium(Cd)onbodydamageofSansuiduckandtoprovidescientificbasisforheavymetalpollutioncontrol,80healthyducklingswereselectedandfedbycertaindose

4、ofCd.Blood,bursaofFabricius,thymus,andspleenorganandtissuesampleswerecollectedin26d,52d,78d,and104d,respectively,andtiterofbird-flueAIVH5,immuneorganindexweredeterminedandpathologicalchangeswereobserved.Theresultsshowedthatasthedaysofagegrowth,titerofbird-flueAIVH5significantlydecreasedinCdpoisoning

5、-immunegroup,titerunqualifiedin52days(HI<41og2)TheimmuneorgansasbursaofFabricius,thymus,andspleenperformedobviouslyatrophy,necrosis,hemorrhageandetc.Immuneorganindexinpoisoninggroupandpoisoning-immunegroupwereobviouslysignificantlyorhighlysignificantlylowerthancontrolgroup»exceptthedifferenc

6、eofspleenindexwasnotsignificantin26days.ItcouldbeconcludedthatCaresidueshadsubstantialdamageonimmuneorgansofSansuiduck,meanwhileitinfluencedtheimmuneresponseonbird-fluefortheducks.Keywords:Cadmium(Cd)poisoning；Sansuiduck；immuneorganindex；avianinfluenzaH5antibodytiter；Guizhou动物及人机体内重金属残留是通过食物链富集，即通过饮

7、水、呼吸、采食含重金属的物质，经新陈代谢在机体相应组织或器官内富集，超出相关标准,从而引起相应的不良反应，达到一定量时则引起慢性中毒，进一步损伤机体组织，危害人畜的健康。从20世纪60年代发现镉污染与日本“痛痛病”的因果关系后，环境中镉与健康关系的研究引起了全世界的关注，同时世贸组织（WTO）将镉规定为食品中必检项目之一；1984年联合国环境规划署（UNEP）提出具有全球意义的12种危险化学物中镉被列为首位。目前，镉已被美国毒物管理委员会列为第6位危及动物身体健康的有毒物质，因为镉中毒可引起机体的急、慢性中毒，导致机体肝、肾等多种器官损伤，甚至对生殖细胞和免疫都存在一定的危害作用口句。此外，随

8、着研究的深入，镉已被证实为一种环境内分泌干扰物，除了对内分泌系统的存在影响外，还对动物的免疫器官有极大影响。邵明东等研究发现，镉中毒对鸡各器官镉含量及其健康存在一定的影响。张春红等8】对雏鸡镉污染的免疫器官检测发现，脾、胸腺、法氏囊中淋巴细胞数目减少，造成鸡免疫功能被抑制。张陆等研究表明，镉对雏鸡红细胞免疫功能存在影响。YucesoyB等研究表明，镉对机体免疫系统有很大的抑制作用。三穗县是贵州省养鸭业基地，近年来养鸭业快速发展，三穗鸭也越来越受到养殖者和消费者的青睐。为探究重金属镉对三穗鸭机体免疫效果的影响，笔者等对其进行了研究，以期为镉对动物机体的危害研究及预防重金属污染提供科学依据，以促进

9、贵州三穗鸭养殖业的健康发展。1材料与方法材料1.1.1 动物为1日龄健康三穗麻鸭，共80只。1.1-2试剂禽流感H5-HI抗原（批号：收稿日期2013-07-30；2013-09-23修回基金项目贵州省自然科学基金项目“环境镉污染影响动物机体生理及免疫功能的实验研究4科合J字（2011）2221作者简介陈佳琪（1988），女，硕士，研究方向：兽医公共卫生学。E-maiL3712136O5射通讯作者：嵇辛勤（1957），女，教授，硕士生导师，从事兽医公共卫生学研究。E-mail：jxq972陈佳琪等实验性镉中学对三穗鸭免疫器官及免疫效果的影响CHENJiaqietalImmuneEffectof

10、ExperimentalCadmiumPoisoningonSansuiduck组别样本数26日龄52日龄78H龄104日龄GroupSamplesize26days52days78days104days中毒免疫组Poisoning-immunegroup5(6±2)log2(4±l)log2A(3±l)log2A(2±l)log2A免疫组Immunegroup5(7±l)log2(8±l)log2(6±1)log2(5±l)log2不同组镉中毒鸭对禽流感病毒（AIV）H5的效价Table1EffectofCd-p

11、oisoningontiterofbird-flueAIVH5indifferentgroups注：A表示与免疫组间差异显著(PV0.05)。Note：Aindicatedsignificantdifferencewithimmunegroupin5%level.20110630）、禽流感H5-HI血清（批号：20100710）,均购自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所;CdC购自上海生物工程公司。1.2 方法1.2.1试验鸭分组将80只鸭随机分为4组，即镉中毒组、镉中毒免疫组、免疫组和空白对照组，各组20只，试验期104d。免疫是指鸭15日龄和鸭换羽后（40日龄）进行禽流感油苗颈部皮下注射，镉中

12、毒组与镉中毒免疫组每天饲喂基础日粮+CdCl260mg/只，免疫组与空白对照组只饲喂基础日粮。1.2.2 H5抗体效价检测和病理观察分别于26日龄、52日龄、78日龄、104日龄各组随机抽取5只称重，颈静脉采血，置于试管内，斜面放置析出血清，检测禽流感H5抗体效价，参照高致病性禽流感诊断技术GB/T189362003中微量法进行。根据血清效价（HI）的判断标准，禽流感灭活苗的HI>41og2为阳性，判定为免疫合格；HI<41og2为阴性，表12.2病理变化经解剖观察，中毒组和中毒免疫组鸭的免疫器官法氏囊、胸腺和脾脏存在明显萎缩、坏死、出血等现象，随着日龄的增长，病变越明显，这可能与

13、镉在机体内随着日龄的增长而富集导致。同时肝脏、脾和腺胃轻度充血，腺胃黏膜易脱落，肝脏明显增大,胆汁呈墨绿色，浓于对照组；肌胃内膜出现脱落，有结节样坏死灶，坏死灶有石化现象；免疫组和空白对照组免疫器官均无明显的病理变化。表明，镉残留对免疫器官和内脏存在实质性损伤。2.3脏器指数变化从表2看出，饲喂混有重金属铜的中毒组和中毒免疫组在26日龄、52H龄、78日龄和104日龄阶判定为不合格。同时宰杀解剖观察病理变化。1-2.3免疫器官脏器系数测定取胸腺、法氏囊及脾脏称里计算脏器指数。胸腺指数=胸腺重（g）/体重（kg）,脾脏指数=脾脏重（g）/体重（kg）,法氏囊指数=法氏囊重（g）/体重（kg）。2

14、结果与分析2.1禽流感H5抗体变化从表1看出，免疫组在26日龄、52日龄、78日龄、104日龄时抗体平均效价均高于中毒免疫组。在免疫组中禽流感抗体效价均合格（HI41og2）；中毒免疫组随着喂镉时间的增加导致禽流感抗体效价降低，52日龄后禽流感抗体效价均不合格（HI<41og2）,表明镉对禽流感免疫应答有着严重影响，起到一定的抑制作用。中毒组与对照组未注射禽流感油苗未产生免疫，故不作比较。段，免疫器官指数均低于免疫组和对照组，且中毒组和中毒免疫组间无显著性差异。胸腺指数：鸭中毒组中毒免疫组均极显著低于对照组和免疫组，可能是镉在机体内富集，从而抑制胸腺器官的生长发育。脾脏指数：26日龄时，

15、各组间差异不显著；52日龄时，中毒组、中毒免疫组与对照组间均存在极显著差异，免疫组与对照组间差异显著，78日龄和104日龄时中毒组、中毒免疫组与对照组间均存在显著差异，这可能是重金属镉随日龄的增加在鸭机体内富集和脾脏内富集，从而抑制脾脏的生长发育。法氏囊指数：从26日龄到78日龄，中毒组、中毒免疫组与对照组间均存在极显著差异；104日龄时，由于法氏囊消失，脏器指数无法计算。表明，镉对免疫器官表2不同日龄各免疫器官的脏器指数Table2Visceraindexofimmuneorganindifferentdaysofages器官组别26H龄52日龄78日龄104日龄OrganGroup26da

16、ys52days78days104days胸腺中毒组Poisoninggroup2.450+0.179B3.890土0.224B2.592±O.206B2.168+0.189BThymus中毒免疫组Poisoning-immunegroup2.405±0.192B3.825+0.235B2.53110.198B2.007+0.142B免疫组Immunegroup3.529±0.2035.242±0.2144.668±0.1893.225+0.281对照组Controlgroup3.507±0.2565.119+0.3094.617&#

17、177;0.2133.237±0.224脾脏中毒组Poisoninggroup0.536士0.0440.522±0.035B0.253±0.025A0.187+0.044ASpleen中毒免疫组Poisoning-immunegroupO.52O±O.0280.403+0.033B0.362±0.056A0.186±0.053A免疫组Immunegroup0.559±0.0220.708士0.042A0.403±0.0500.225+0.036对照组Controlgroup0.543±0.0230.759

18、+0.0270.423±0.0420.257±0.038法氏囊中毒组Poisoninggroup0.459±0.039B0.324士0.035B0.224±0.020BBursaofFabricius中毒免疫组Poisoning-immunegroup0.371+0.031B0.365+0.042B0.215±0.019B免疫组Immunegroup1.216+0.1741.033±0.1460.401+0.022对照组Controlgroupl.299±0.0381.010±0.Ill0.411±0.0

19、19注：A表示同种器官不同组间差异显著（P<0.05）,B表示差异极显著（PV0.01）,表示法氏囊萎缩消失。Note：Aindicatedsignificantdifferencewithimmunegroupin5%level,Bindicatedhighlysignificantdifferencein1%level.indicatedthatthebursaofFabriciusatrophiedanddisappeared.生长发育有极大的抑制作用。3结论重金属中毒是一个积累的过程，所需时间长，而本试验设置的试验时间较长，与环境中重金属残留富集相似,具有可行性。研究结果表明，随

20、着重金属在三穗鸭体内的富集，禽流感H5抗体效价明显下降，到52日龄后中毒免疫组鸭的抗体水平不合格，说明重金属镉对禽流感免疫应答存在影响。经解剖观察，镉残留对免疫器官和内脏存在实质性损伤；中毒组和中毒免疫组免疫器官指数明显低于对照组，除脾脏指数在26日龄时与对照组间差异不显著外，其他日龄均显著或极显著低于对照组，与YucesoyB等的研究结果一致，表明重金属镉会影响免疫器官的生长发育。因此，在三穗鸭养殖地，要避免重金属镉对当地环境的污染，从而避免镉对三穗鸭养殖的影响。参考文献1LourdesSchnaas,StephenJRothenberg,EstelaPerro-ni,etal.Tempor

21、alpatternintheeffectofpostnatalbloodleadlevelonintellectualdevelopmentofyoungchildrenLJ.NeurotoxicologyandTeratology,2000,22(6):805-810.2董秋洪，聂根新，涂田华，等.食品中重金属污染对人体健康的影响及其对策J.江西农业科技，2003(3)：37-38.3BuchkoGW,HessNJ,KennedyMA.CadmiummutagenicityandhumannuchleotideexcisionrepairproteinXPA:CD,EXAFSand1H/15N-NMRspectroscopicstud