饲料厂化验室检测手册

1、饲料厂化验室操作手册饲料中的水分测定1原理：试样在105C 士 2C烘箱内，在常压下烘干，直至恒重，逸失的重量为总 水分。2测定步骤：干净的称样皿，在 105C 士 2C烘箱中烘1h，取出，在枯燥器中冷却 30min,称准至0.0002g，再烘干30 min，同样冷却，称重，直至两次的重 量之差小于 0.0005g 为恒重。用已恒重的称样皿称取2份平行试样，每份2-5g含水量0.1g以上， 样品厚度4mm一下。准确至0.0002g,不盖称样皿盖，在105C 士 2C烘箱 中烘3h以温度到达105C开场计时，取出，盖好称样皿盖，在枯燥器中 冷却30min,称重。在同样烘干 1h , 冷却,称重,

2、直至两次称重的重量差小于 0.002g.烘干前的质量烘干后的质量水分= x 100烘干前的质量粗蛋白的测定1. 原理： 凯氏定氮法测定试样中的含氮量,即在催化剂的作用下用硫酸破坏 有机物,使含氮物转化成硫酸铵,参加强碱进展蒸馏,用硼酸吸收后, 再用盐酸滴定,测出含氮量,将结果乘以换算系数 6.25,算出粗蛋白的 含量。2. 测定步骤：.消煮：称取样品0.5g ,准确放入凯氏烧瓶中，参加6.4g催化剂，15ml 硫酸，将凯氏烧瓶置于电炉上加热，开场小火，待样品焦化，泡沫消失后， 再加强火力360-410C直至呈透明的蓝绿色，然后再继续加热，至少2h. 定容：消煮后冷却，加 20ml 水至凯氏烧瓶

3、中，摇匀，待消煮试样完 全冷却后转移至 100ml 容量瓶中，用蒸馏水冲洗数次，并一起转入到容量瓶 中，至刻度，摇匀，做为试样分解液。. 蒸馏 :. 准备：将蒸馏装置准备妥当以后， 先用蒸馏水洗涤， 移取分解液 10ml， 氢氧化钠40% 10ml，参加少量水，塞好入口玻璃塞，且在入口处加水密 封，防止露气，用蒸馏水冲洗冷凝管末端，在将装有 20ml 硼酸和 2 滴甲基 红指示剂的锥形瓶放在冷凝管的末端。. 滴定：将蒸馏后的吸收液立即用盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色 变成灰红色为终点。体积一空白X浓度X 0.014 X6.25粗蛋白二 X 100试样质量0.014 -与1.00ml盐酸标准溶液

4、【c(Hcl)=1.000/ mol L-1】相当的以克表示的氮的质量6.25氮换算成蛋白质的平均系数3. 试剂配制：1. 混合催化剂：4g硫酸铜+60g无水硫酸钠2. 氢氧化钠： 40g 氢氧化钠 +100ml 水3. 硼酸：1g硼酸+50ml水4. 混合指示剂：甲基红 0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿 0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存 3个月5. 盐酸标准溶液配制：盐酸mlc(Hcl)/ mol L-11 900.5450.194. 盐酸标定方法：取在270 300C温度下枯燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.015g ,精细称重，加水50ml使溶解，加甲基红溴甲酚绿混合指示剂 2滴，

5、用盐酸 滴定至溶液由绿色转变为灰红色，在煮沸 2分钟，冷却至室温，继续滴 定至溶液变为灰红色。空白测定：称蔗糖0.5g，代替试样，进展空白滴定，消耗 0.1 mol L-1盐酸标准溶 液的体积不得超过0.2ml，消耗0.02 mol L-1盐酸标准溶体积不得超过0.3ml.无水硫酸钠的质量浓度二（体积-空白）X 0.052995. 蒸馏步骤检测：准确称取硫酸铵0.2g，代替试样进展消化蒸馏，测得硫酸铵含量21.19% 士 0.2%,可知消煮过程和试剂配制是否正常。饲料中纯蛋白测定1. 原理：硫酸铜在碱性溶液中，可将蛋白质沉淀，且不溶于热水，过滤和洗涤后，可将纯蛋白质含氮物别离， 再用凯氏定氮法

6、测定沉淀中的蛋白质含量。2. 试剂：1硫酸铜溶液： 10g 硫酸铜溶于 100ml 水中。 2氢氧化钠溶液：将 2.5g 氢氧化钠溶于 100ml 水中。3氯化钡溶液：1g氯化钡溶于100ml水中。42 mol L-1盐酸溶液。3. 测定步骤：准确称取 1g 左右试样，置于 200ml 烧杯中，加 50ml 水，加热至沸， 参加 20ml 硫酸铜溶液， 20ml 氢氧化钠溶液，用玻璃棒充分搅拌，放置 1h 以上，用倾斜过滤定性滤纸，然后用60-80 C热水洗衣涤沉淀5-6次， 用氯化钡溶液 5 滴和盐酸溶液 1 滴检查滤液， 直至不生成白色硫酸钡沉淀 为止。将沉淀和滤纸放在65C烘箱枯燥2h，

7、然后全部转移到凯氏烧瓶中。 消化后进展定氮测定。4. 结果计算同粗蛋白测定一样。快速测盐分饲料级1. 盐分含量测定原理：溶液澄清，在酸性条件下，参加过量硝酸银溶液使样品溶液中的氯化物 形成氯化银沉淀，除去沉淀后，用硫氰酸铵回滴过量硝酸银，根据消耗硫酸 氰铵的量，计算出氯化物的含量。2. 试剂配制：Anga：称取硝酸银3.4g，用少量水溶解，定容至1L,储于棕色瓶中3. 标定：称取在550C下恒温1h的基准氯化钠0.02g ,加50ml水，加5%铬酸钾指 示剂1ml,用待标定的硝酸银标准溶液滴定至砖红色为终点。20X 0.02C = 体积4. 测定步骤：称取样品2g左右，加200ml蒸馏水搅拌，

8、静止20min,吸取上清液20ml 放入锥形瓶，加50ml蒸馏水，加1ml铬酸钾10%,用Ango3滴定成桔红 色。浓度X体积x 200X 0.05845CL = X 100样品质量X 20测食盐中 CL 的含量称0.02g样品，放入锥形瓶中，加50ml蒸馏水，加1ml铬酸钾10%,用Anga滴定成桔红色。浓度x体积x 0.05845CL =X 100样品质量粗灰分、钙、磷连续测定饲料级1. 原理：试样在550C灼烧后所得残渣，用质量百分率表示。残渣只要是氧化物、 盐类等矿物质，也包括混入饲料中的沙石、土等，故称粗灰分。2. 步骤：将干净的坩埚方入高温炉，在 550士20C下灼烧30min。取

9、出，在空气 中冷却约1mi n,放入枯燥器冷却30mi n,称其重量，在已恒重的坩埚中 称取 2-5g 试料，准确至 0.0002g 。在电炉上小心碳化至无烟，在放入高 温炉，于550士 20C下灼烧3h。取出，在空气中冷却约1min,放入枯燥 器中冷却30min,称取重量。灰化后的质量粗灰分二X 100%灰化前的质量钙：在盛有灰分的坩埚中参加10ml 1: 3盐酸，加3滴硝酸，小心煮沸， 随即滤入 100ml 的容量瓶中,用蒸馏水洗涤坩埚和漏斗上的滤纸,定容至 100ml，摇匀，取10ml分解液放入锥形瓶，参加 50ml水，1%煮沸冷却后的 淀粉溶液10ml,乙二胺1ml,三乙醇胺2 ml，

10、孔雀石绿1滴，20%氢氧化钠 10 ml，盐酸羟胺少许，钙指示剂少许，然后用 EDTA商定至蓝色。EDTA体积X浓度Ca= X 100样品质量试剂配制：盐酸：1: 3 1ml盐酸溶于3ml蒸馏水中氢氧化钠：20%20g的氢氧化钠溶于100ml的蒸馏水中三乙醇胺： 1 ：1 1ml 三乙醇胺溶于 1ml 蒸馏水中乙二胺：1 : 1 1ml乙二胺溶于1ml蒸馏水中孔雀石绿： 0.001g 孔雀石绿溶于 1ml 蒸馏水中，既 0.1g 孔雀石绿溶于 100g 蒸馏水中钙黄指示剂：0.1g钙黄绿素，0.13g甲基百里香酚蓝，5g氯化钾研细混 匀，储于磨砂口瓶中备用。 钙红指示剂： 1g 钙羟酸指示剂与

11、 99g 氯化钠EDTA 0.02 mol L-1称取8g乙二胺四乙酸二钠，放入烧杯中，加 200ml 蒸馏水，加热溶解，冷却后转入 1000ml 容量瓶中，用蒸馏水稀稀释至刻度。 标定：钙标准溶液0.001g mol L-1准确称取在105 110C下烘干3h,枯燥至恒重的基准碳酸钙 2.497g，溶 于 40ml1： 3盐酸中沿烧杯壁慢慢参加 ，加热除去 Co2, 冷却，转移到 1000ml 容量瓶中，稀释到刻度，标定方法同测定方法同样。0.01X 20分解液吸取值EDTA浓度二EDTA的体积磷：取上述分解液1ml,放入50ml的容量瓶中，加10ml钒钼酸铵显色剂， 定容至50ml,摇匀，

12、放至20分钟。用10毫米比色池，在420nm波长下， 用分光光度计测定试样分解液的吸光度波长所对应得含磷量磷含量 = 质量X 100X分解液移取量试剂配制：钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵1.25g ,先参加量水，使其差不多溶解, 加硝酸250ml，另取钼酸铵25g加蒸馏水400ml溶解，冷却后将此溶液倒入 上述溶液中，加水定容至1000ml。避光保存，入生成沉淀那么不能使用。磷标准溶液：将磷酸二氢钾在105C烘箱中枯燥1小时，在枯燥器中冷 却后称取0.2195g，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用水稀释至刻 度，摇匀，即 50微克/ 毫升的磷标准溶液。标准曲线绘制：准确吸取 0ml.

13、1ml.2ml.5ml.10ml.15ml 于 50ml 容量瓶中，各参加钒 钼酸铵显色剂10ml，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，静止 10分钟以上，以0 溶液为参比，用10毫米比色池，在420nm波长下，用分光光度计测定各溶 液的吸光度。以磷含量为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线图。饲料中粗脂肪的测定1. 原理：用装有乙醚的索氏脂肪提取器，提取试样中的脂肪，称脂肪包的重量， 提取的脂肪中除脂肪外还有有机酸，磷脂，脂溶性维生素，叶绿素等，因而 测定结果称为粗脂肪或乙醚提取物。2. 测定步骤：称试样1-5g准确至0.0002g于滤纸筒中，或用滤纸包好，放入105C 烘箱中，烘干120min,滤

14、纸筒应高于提取器虹吸管的高度， 滤纸包长度应以 可全部浸泡于乙醚中为准，将滤纸筒或包放入抽提管，在抽提瓶中加无水乙 醚60-100ml，在60-75 C的水浴上加热，使乙醚回流，控制乙醚回流次数约 每小时 10 次,共回流约 50 次油脂高的约 70 次或检查抽提管流出的乙 醚挥发后不留下油迹为抽提终点。 约 3 个小时取出试样，仍用原提取器回收乙醚，直至抽提瓶全部回收完，取下抽提 瓶，将回收的乙醚倒入乙醚瓶中保存。取出滤纸包，仍放回原称样皿，开盖在 105C 士 2C烘箱中烘干2h,刚 放烘箱时将烘箱门翻开，使滤纸包中的乙醚挥发完以后在合上门，否者会有 危险取出，放入枯燥器中冷却，称重，在烘

15、干 30min,冷却称重，直至两 次误差小于 0.001g 为止。烘干后试样的重量提取脂肪后试样的重量粗脂肪二X 100烘干前试样的重量大豆脲酶活性的测定滴定法1. 选用范围：本法适用于大豆制品品及其副产品中脲酶活性的测定, 可确认大豆的温 热处理程度和抗胰蛋白酶等抗营养因子的水平。2. 定义：尿素酶活性指：在30士 0.5 C和pH7的条件下，每分钟每克大豆制品分 解尿素所释放的氨态氮的毫克数。3. 原理：将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在 30C保持30min,尿酶 催化尿素水解产生氨的反响。用过里盐酸中和产生的氨,再用氢氧化钠标准 溶液回滴。4. 试剂 ： 尿素缓冲溶液：准确称取

16、 3.4g经110C烘干的磷酸二氢钾和4.45g磷酸氢二钠，用蒸馏水溶解后定容至 1000ml，再将30g尿素溶解在此缓冲液中，可保持一个月。 0.1 mol L-1盐酸溶液：用量筒量取 8.4ml浓盐酸GB 622注入1000ml 容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。 0.1mol L-1氢氧化钠GB629标准溶液：按GB601的规定配制。5ml NaOH饱和溶液定容至1L5. 测定步骤：准确称取已粉碎的试样约0.2g准确至0.0001g置于刻管中如活 性很高，只称0.05g。参加10ml尿素缓冲溶液，立即盖好试管并剧烈摇 动，马上置于30± 0.5 C恒温水浴中，准确计时保持 30mi

17、n。取下后立 即参加10ml 0.1mol L-1盐酸溶液,并迅速冷却至20C，将试管中内容物 无损地移入50ml烧杯中，用5ml蒸馏水冲洗试管2次，立即用0.1mol -L-1 的氢氧化钠标准溶液滴定至 pH 4.7, 记录氢氧化钠标准溶液的消耗量。同 时做空白试验。尿素苯酚磺试剂法脲酶活性1. 原理：在尿素苯酚磺指示剂存在的条件下， 以尿素转变成氨的多少及显色度 检测大豆饼中的脲酶的活性。2. 试剂与溶液：0.2mol L-1氢氧化钠溶液：量取澄清的饱和氢氧化钠溶液 11.2ml，置 于 1000ml 容量瓶中，用新沸过的冷水稀释至刻度，混匀即可。0.1 mol L-1硫酸溶液：量取5.6

18、ml浓硫酸，注入已加了少量蒸馏水的1000ml 容量瓶中，冷却稀释至刻度。 尿素一苯酚磺指示剂：取1.2g苯酚红溶于30ml 0.2 mol L-1氢氧化钠 溶液中，用蒸馏水稀释至300ml,参加90g尿素，溶解后再用水稀释至2000ml, 加70ml 0.1 mol L-1硫酸溶液，稀释至3000ml。配好的溶液应呈琥珀色， 假设溶液转变呈桔红色时，用再适量滴加 0.1 mol L-1硫酸溶液，调成琥珀 色。试剂最好现配现用。3. 测定步骤：取粉碎的大豆粕少许，在外表皿上均匀的铺成薄层，用吸管吸取尿素 苯酚磺指示剂，浸湿外表皿上平铺的大豆粕，放置 5mi n，观察显色结果。4. 结果判定：无

19、任何红点出现时，再放置 25mi n，假设仍无红点出现时，说明被检大 豆粕没有脲酶活性，是过熟的大豆粕。有少数红点，或外表有25%-503红点出现，表示含有微量脲酶，大豆粕 可以使用。假设大豆粕外表 75%-100%被红点覆盖， 说明脲酶活性很强， 粕过生， 不 能直接使用。挥发性盐基氮 VBN 测定方法1 、原理： 利用弱碱性试剂氧化镁使试样中碱性含氮物质游离而被蒸馏出来， 用硼酸吸收，再用标准酸滴定，计算出含氮量。2、试剂：1、0.lmol /L盐酸标准溶液无水碳酸钠标定：吸取分析纯盐酸8.3mL，用蒸馏水定容至 1000mL。2、 0.01mol/L 盐酸标准溶液：用 0.1mol/L

20、盐酸标准溶液稀释获得。3、2測酸溶液：分析纯硼酸2g溶于100mL水配成2%溶液。4、混合指示剂：甲基红 0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿 0.5%乙醇溶液，两溶液 等体积混合，阴凉处保存期三个月以内。5、 1%氧化镁溶液：化学纯氧化镁1.0g溶于100mL蒸馏水振接成混悬液。3、测定：1、称取15g试样（准确到O.OOIg）于250mL具塞锥形瓶中，加蒸馏水 100mL振荡摇匀30min后静置，上清液为样液。2、取20mL2的硼酸溶液于150mL锥形瓶中，加混合指示剂2滴，使半 微量蒸馏装置的冷凝管末端浸入此溶液。3 、蒸馏装置的蒸汽发生器的水中应加甲基红指示剂数滴，硫酸数滴， 且保持此溶液为橙红

21、色，否那么补加硫酸。4、准确移取10mL样液注入蒸馏装置的反响室中，再参加 10mL 1%勺氧 化镁溶液，用少量蒸馏水冲洗进样入口，将玻璃塞塞好，且在入口处加水 封好，防止漏气，蒸馏10min,使冷凝管末端离开吸收液面，再蒸馏1min, 用蒸馏水洗冷凝管末端，洗液均流入吸收液。5 、吸收氨后的吸收液立即用 0.01mol/L 盐酸标准液滴定,溶液由蓝绿 色变为灰红色为终点,同时进展试剂空白测定。4、测定结果计算：盐酸体积空白x浓度x 14挥发性盐基氮的含量=x质量x分解液体液宁分解液总体积2、重复性：每个试样取两个平行样进展测定，以其算术平均值为结果。允许相对偏差为5%油脂酸价测定取枯燥的锥形

22、瓶带手套取。称重记录，参加测样2-3g，称重记录，取 烧杯参加 50ml 醇醚， 5 滴酚酞指示剂， Naoh 滴定空白体积变成粉紫色，把 滴定的醇醚倒入盛有测样的锥形瓶中， 摇匀，再滴 5滴酚酞指示剂， 用 Naoh 滴定成粉红色，半分钟之内不变色。计算公式：浓度X体积一空白X 56.11 酸价 = 样品质量试剂配制：Naoh标准溶液0.05mol/L配制方法1:取2g氢氧化钠放入1000ml容量瓶中，用新沸过的冷水定 容至1000ml，摇匀。方法2:取饱和溶液2.8ml，用新沸过的冷水定容至1000ml标定：取在105-110 C枯燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约 0.2g，精细称重， 加新

23、沸过的冷水50ml，摇匀，使其溶解，加酚酞指示剂2滴，用本液滴定至 粉红色。邻苯二甲酸氢钾质量浓度 = Naoh 体积X 0.2042中性醇醚：2: 12ml乙醇+1ml乙醚1%酚酞乙醇指示剂：1g酚酞+100ml乙醇油脂TBA值的测定方法1. 原理：油脂受到光、热、空气中氧等的作用，发生酸败。分解出醛、酮之类的 化合物。丙二醛就是分解产物的一种，它能与 TBA硫代巴比妥酸作用生 成粉红色化合物，在532nm波长处有吸收顶峰，利用此性质即能测出丙二醛 含量，从而推导出油脂酸败的程度。2. 操作步骤：1、标准曲线的绘制准确吸取上述标准溶液 0.0 、0.1 、0.2 、0.3 、0.4 、0.5

24、 、0.6ml 置于纳 氏比色管中，加水至总体积为 5ml，参加5ml TBA溶液，然后按样品测定步 骤进展，测得吸光度并绘制标准曲线。2、样品制备与检测准确称取均匀的豆油15g,置于100ml具塞三角瓶内，准确参加 25ml 三氯乙酸混合液，振摇半小时保持油脂融溶状态 ，用四层滤纸过滤，除 去油脂。准确移取上述滤液10ml置于25ml比色管内，准确参加TBA溶液10ml, 混匀，加塞，置于90C水浴内保温40min,取出，冷却1h,移入小试管内， 离心5min,上清液倾入25ml纳氏比色管中，参加5ml氯仿，摇匀，静置， 分层，吸出上清液于532nm波长处，用1-5cm比色皿比色同时作空白试

25、验。3、试剂配制：1、0.02mol/L TBA水溶液：称取TBA0.288g加热溶于水中，并稀释至100ml;2、三氯乙酸混合液：称取三氯乙酸 7.5g及0.1gEDTA用水溶解，稀释至100ml；3 、氯仿分析纯；4、丙二醛标准溶液：称取 0.315g 1，1，3，3- 四乙氧基丙烷，溶解后稀释 至1000ml，此溶液每ml相当于丙二醛100卩g,置于冰箱内保存。准确吸取 10ml，稀释至100ml，此溶液每ml相当于丙二醛10卩g,备用。丙二醛浓度X混合液体积X （滤液体积+ TBA水溶液体积）丙二醛 = 油脂质量X TBA水溶液体积油脂过氧化值测定方法1. 原理 :油脂氧化过程中产生过

26、氧化物,与碘化钾作用,生成游离碘,以硫代 硫酸钠溶液滴定,计算过氧化值。2. 试剂和溶液 :1 、饱和碘化钾溶液：称取 14g 碘化钾,加 10ml 水溶解,必要时微热 使其溶解,冷却后贮于棕色瓶中；2 、三氯甲烷-冰乙酸混合液：量取 40ml三氯甲烷，加60ml冰乙酸， 混匀；3 、 1%淀粉试剂：将淀粉 0.5g 用少许冷水调成糊状，倒入 50ml 沸水中 调匀，煮沸，临时用现配；4、0.01mol/L硫代硫酸钠标准溶液；26g硫代硫酸钠/16无水硫代硫酸钠溶于 1000ml 水中0.1 mol L-1配制：称取2.6g硫代硫酸钠/1.6无水硫代硫酸钠于1000ml容量瓶中， 用适量新沸煮沸10分钟过的水溶解并稀释至1000ml，摇匀，放置2周以后备用硫代硫酸钠标定方法：取适量基准重铬酸钾在120C烘箱中烘至恒重（3h），然后称取0.15g , 准确至O.OOOIg，置于碘量瓶中，溶于25ml煮沸并冷却的蒸馏水中，加 2g碘化钾及20僦酸溶液20ml，摇匀，于暗处放