饲料鉴定完整版

1、第二课 饲料的鉴定饲料的鉴定:饲料的鉴定是指根据饲料的形态特征，理化性质，鉴别饲料原料的种类,质量或混杂物的方法。饲料的鉴定方法有感官方法，物理方法，快速化学方法和化学分析方法。其中，化学分析方法为定量分析，其余方法主要为定性分析。感官鉴定：通过视觉，味觉，嗅觉，触觉等对饲料进行检测，此法是对样品不加以任何处理，直接通过感觉器官进行鉴定。（实验准备）样品约种（样品瓶中保存），磁盘样品袋中约5种。物理方法鉴定：借助简单的器具利用饲料的物理特性进行鉴定。（） 筛分法：称取样品100g,放入规定筛层的标准编织筛内，筛10分钟，筛完后将各层底物筛上物分别称重。（实验准备）鸡料25Kg，标准样品筛套（4

2、，6，8，12，16目，净孔边长mm :5.00,3.20,2.50,1.60,1.25），摇筛机，电子天平，药物天平。（） 容重法：容重是指单位体积的饲料所具有的质量，通常以1L体积的饲料质量计。各种饲料原料均有其一定的容重。测定饲料样品的容重，并与标准纯品的容重进行比较，可判断有无异物混入和饲料的质量。（实验准备）ML量筒，大磁盘，台秤，粗天平（感应0.1g）,药匙等。（） 显微镜检：饲料显微镜检测是以动植物形态学，组织细胞学为基础，将显微镜下所见饲料的形态特征，物化特点，物理形状与实际使用的饲料原料应有的特征进行对比分析的一种鉴定方法。（实验准备）显微镜台，图册相册各本，说明书本快速化学

3、鉴定：快速化学鉴定方法是利用饲料成分的化学性质所进行的点滴试验，主要用作定性分析，以快速判断饲料中是否存在某些特定的化学物质，如淀粉，脲酶等。（） 淀粉的检验：碘碘化钾溶液滴入样品，如有蓝色说明有淀粉（实验准备 碘碘化钾溶液：6g碘化钾溶于100ml水中再加入2g碘，存于棕色瓶中。白瓷板。鸡料或玉米面。）原理：淀粉（C6H12O6）n 属于多糖类，它遇到碘元素的时候，会发生反应，生成的化合物显蓝色，所以我们会看到上述的现象。 详细讲: 淀粉是一种高分子化合物。淀粉与碘酒反应的本质是生成了一种包合物(碘分子被包在了淀粉分子的螺旋结构中了），这种新的物质改变了吸收光的性能而变了色。天然的淀粉组成成

4、分可以分为两类：直链淀粉和支链淀粉。<直链淀粉约占10%30%，分子量较小，在50000左右，可溶于热水（7080）形成胶体溶液。直链淀粉与碘酒作用显蓝色，但较短的直链则呈现红色、棕色或黄色等不同的颜色支链淀粉约占70%90%，分子量比直链淀粉大得多，在60000左右，不溶于水，支链淀粉与碘酒作用显紫色或紫红色所以，淀粉遇碘酒究竟显什么颜色，取决于该淀粉中直链淀粉与支链淀粉的比例。有的豆类几乎全是直链淀粉，遇碘酒显蓝色；糯米中几乎全是支链淀粉，遇碘酒显紫色；玉米、马铃薯分别含有27%、20%的直链淀粉，所以马铃薯遇碘酒所显的颜色比玉米遇碘酒所显的颜色要略深。（） 木质素的检验：间苯三酚酒

5、精溶液，浓盐酸，如试样中有木质素存在则呈深红色。（实验准备 2间苯三酚酒精溶液：2g间苯三酚溶于100ml无水乙醇中。浓盐酸，花生壳，表面皿，滤纸等）原理：染色时先加一滴盐酸，再加一滴间苯三酚。木化细胞壁被染成红色 由于用间苯三酚染色分色清楚，木质化细胞壁被染成红色，其余部分均不着色木质素是芳香族的化合物，在细胞壁中一般呈复合状态。用盐酸和间苯三酚先后处理植物材料，是细胞壁木质素成分的鉴别方法。根据颜色反应的深浅能显示壁中木质化的程度。加盐酸的作用是由于间苯三酚需在酸性环境中才能发生上述反应。（） 生熟豆饼的检验：尿素苯酚红溶液滴加到样品上，结果判定5分钟变红是生豆饼，10分钟变红是半生豆饼，

6、15分钟以上变红是熟豆饼，不变红是丧失活性的表现。（实验准备 脲素苯酚红溶液：A苯酚红0.14g溶于7ml 0.1mol/L氢氧化钠溶液中35ml水；B 21g脲素溶于300ml水中；A+B混合，用0.1mol/L硫酸滴定到琥珀色。0.1mol/L氢氧化钠：4g氢氧化钠溶于1000ml水。0.1mol/L硫酸：2.66ml硫酸溶于1000ml水。）原理见课本 （） 维生素C的检验：硝酸银酒精溶液，如有蓝黑色出现表示有VC存在。（实验准备 硝酸银酒精溶液：3g硝酸银溶于100ml无水乙醇中。 Vc片。原理: 维生素C分子中有二烯醇基，具强还原性，可被硝酸银氧化为去氢维生素C,同时可产生黑色银沉淀

7、。 （） 矿物质（锌）：N氢氧化钠，0.1双硫腙溶液，阳性呈草莓红色。原理；双硫腙又称二苯基硫卡巴腙。蓝黑色结晶粉末。熔点165-169（分解）。不溶于水。溶于有机溶剂呈绿色溶液。与金属盐的水溶液混合振摇，在水相中形成金属络盐，转入有机溶剂层，发生显著的颜色变化。锌离子与双硫腙反应生成红色螯合物（） 矿物质（锰）：N氢氧化钠，联苯胺溶液，阳性呈蓝色斑点。（实验准备 2mol/L氢氧化钠：8g氢氧化钠溶于100ml水中。0.1%双硫腙溶液: 0.1%双硫腙溶于100ml四氯化碳。联苯胺溶液：0.07g联苯胺溶于10ml醋酸，再用水稀释支100ml。滤纸，硫酸锌，硫酸锰等）（） 氨基酸：0.1茚三

8、酮溶液，结果呈紫红色。（实验准备 0.1茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于100ml水中。100ml三角瓶，各种氨基酸）原理：茚三酮是使氨基酸和多肽显色的重要试剂当茚三酮在弱酸性条件下和-氨基酸反应时氨基酸被氧化分解生成醛放出NH3 和C02 ，水合茚三酮则变为还原型茚三酮，然后还原型茚三酮与NH3 及另一分子茚三酮进一步缩合，生成蓝紫色化合物。最大吸收值的波长为570nm此反应为一切a-氨基酸所共有反应灵敏因而本法是氨基酸定量测定应用最广泛的方法之一，脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色化合物，最大吸收值的波长在44Onm 。多肽和蛋白质虽然具有茚三酮反应，但肽链越大灵敏度也越来越差故不宜作定量

9、测定之用在多肽合成中常用来检验有无自由氨基的肽类存在。(8) 皮革粉：用钼酸铵溶液检验鱼粉，肉骨粉中是否有皮革粉存在。肉骨粉呈黄绿色，皮革粉则无颜色变化。（实验准备：5g钼酸铵溶于100 ml水中，再加入35 ml浓硝酸。肉骨粉，鱼粉）4 饲料中掺假物质的鉴定（1）豆粕的掺假识别 主要掺玉米粉、玉米胚芽粕、豆饼 掺玉米粉的检查：取碘0.3g、KI1g溶于100毫升水中。然后用吸管滴一滴水在载玻片上，用玻璃棒头沾取过20号筛的豆粕，放在载玻片的水中展开，然后滴一滴碘和碘化钾溶液，在显微镜下观察，纯豆粕标准样品，可清晰看到大小不同的棕色颗粒。含玉米粉的样品，有似棉花状的蓝色颗粒。标准样品的制备：取

10、过20号筛的纯豆粕0.95g 0.96g 0.97g 0.98g 0.99g依次过20号筛的玉米面0.05g 0.04g 0.03g 0.02g 0.01g各自混匀五种标准样品分别含玉米面5%, 4%, 3%, 2%, 1%以便半定量比较。（2）玉米蛋白粉的掺假 主要掺尿素检查方法：（一）称取10g样品于烧杯中，加入100毫升蒸馏水，搅拌、过滤。取滤液1毫升于滴板上，加入23滴甲基红指示剂，再滴加23滴尿素酶溶液，约经5分钟，如点滴板上呈深红色，则说明含有尿素。尿素酶溶液配制：称取0.2克尿素酶溶解于100毫升95%的乙醇中。甲基红指示剂配制：称取甲基红0.1克。溶解于100毫升95%乙醇中。

11、（二）取2份1.5克样于两只试管中,其中一只放少许黄豆粉.两只试管加蒸馏水5毫升,振荡.置于30 温水中水浴30分钟(60-70水浴3分钟) .滴67滴甲基红指示剂.若加豆粉的试管中出现深紫红色,则说明掺有尿素.（3）蛋氨酸掺假鉴别外观白色或淡黄色,结晶性粉末或片状,真蛋氨酸手感滑腻无粗糙感,具有较浓的腥臭味,用口尝带少许甜味.蛋氨酸灼烧的烟为碱性气体有特殊气味可是广泛试纸变兰色若用淀粉冒充产生的烟使广泛试纸变红第三课 饲料中常规成分的测定一 饲料中水分的测定（吸湿水的测定）：本方法适用于测定配合饲料和单一饲料中水分的含量，但用作饲料的奶制品，动物，植物油脂和矿物质则除外。1 测定方法：常压烘

12、干减量法（GB）2 测定原理：样品在105±2烘箱内，在一个大气压下烘干，直至恒重，逸失的质量为水分。3 实验准备：实验室用样品粉碎机，分样筛（40目），电子天平（万分之一），水分皿，干燥器，电热恒温干燥箱，坩埚钳，药匙，样品等4 测定步骤：（1） 准备水分皿 洗净，烘干（105110）一小时，冷却，称重，再烘干，再冷却，称重（W1），记号（盖和底分开记，例34）。（2） 称样 2g左右，固定称量法，W2W1样品重（3） 烘干 放入烘箱105±2 46小时（4） 冷却称重（5） 再烘干，再冷却再称重 （W3）5 计算公式：吸湿水（）（W2-W3）（W2-W1）100W1水分

13、皿重（g） W2样品水分皿重（g） W3烘干后的W2二 饲料中粗灰分的测定：试样的灰分测定应采用灰化法，所谓灰化就是高温灼烧试样，试样中有机物质在灼烧过程中大部分生成气体逸出，其余的矿物质以氧化物和盐类留下来。用灰化法测得的不仅是矿物质而且还有少量粘土，泥沙等物质，故测得结果称为粗灰分或总灰分。1 适用范围：本方法适用于各种混合饲料，配合饲料，浓缩料和单一饲料。2 测定原理：灰分即为饲料中的无机物质。根据无机物不能燃烧的特性，将试样在550的高温电炉中灼烧将有机物除去，根据灼烧前后的重量测定饲料中粗灰分的含量。3 实验准备：实验室用样品粉碎机，电子天平（万分之一），高温电炉（马福炉），坩埚，干

14、燥器，坩埚钳，药匙，样品等4 测定步骤：（1） 准备坩埚 洗净，烘干，放入马福炉中灼烧30分钟，冷却，记号（盖和底分开记，例34），称重。直至恒重，为坩埚重（W1）（2） 称样 用固定称量法，称取2g左右样品于坩埚中，不要超过坩埚的12，坩埚样品重（W2）（3） 低温碳化 将坩埚盖上34的盖（防止在碳化过程中样品随气体逸出），放到电炉上烧至不冒白烟为止。（4） 高温灼烧 将碳化好的坩埚移至550的高温电炉中灼烧3小时。（5） 冷却、称重 将坩埚取出在空气中冷却1分钟，放入干燥器中冷却至室温，称重（6） 再灼烧，再冷却再称重 。坩埚灰分重（W3）5 计算公式：粗灰分（）（W3-W1）（W2-W1

15、）100W1坩埚重（g） W2样品坩埚重（g） W3烧后的W2注意事项:1用电炉碳化时应小心,防止碳化过快,样品飞溅。2灼烧残渣的颜色与试样中各元素的含量有关，含铁高时为棕红色，含锰高时为淡蓝色。但有明显的黑色碳粒时为灼烧不完全。应延长灼烧时间。3新坩埚编号：将新坩埚洗净烘干，放入马福炉中灼烧30分钟，取出后用钢笔蘸5g/L氯化铁墨水溶液（称0.5g三氯化铁溶于100ml蓝黑墨水中）编号，即可。三 粗蛋白质的测定：饲料中含氮物质包括纯蛋白质和氨化物（氨化物有氨基酸、酰胺、硝酸盐及铵盐等），两者总称为粗蛋白质。粗蛋白质的含量是评定饲料的营养价值很重要的指标。测定粗蛋白质的方法很多，常用的是凯氏定

16、氮法即通过测定样品中的含氮量推算蛋白质含量的方法（GB）。1 适用范围：本方法适用于配合饲料、浓缩料和单一饲料等粗蛋白质的测定。2 测定原理：各种饲料的有机物质再还原性催化剂（如五水硫酸铜、无水硫酸钠等）的帮助下，用浓硫酸进行消化作用，使蛋白质和其他有机态氮在一定处理下也包括硝酸态氮都转化为氨气，并被浓硫酸吸收变为硫酸铵；而非含氮物质则以二氧化碳、水、二氧化硫的气体状态逸出，消化液在过量浓碱的作用下进行蒸馏，释放出的氨态的氮，用硼酸吸收并结成硼酸氨，以甲基红和溴甲酚绿混合作为指示剂，用已知浓度的盐酸标准溶液进行滴定，根据消耗的盐酸的体积计算出氮的含量，根据不同的饲料乘以一定的系数（通常为6.2

17、5），即为粗蛋白的含量。3 实验准备：分析天平（1/10000）、消煮炉或电炉、凯氏烧瓶（100ml）、三角瓶（100ml）、容量瓶（100ml）、移液管（10ml）、微量滴定管（10ml）、量筒（20、100ml）、可调定量加液器、凯氏定氮消化装置、凯氏定氮蒸馏装置等。 4 试剂及配置：（1） 浓硫酸（2） 五水硫酸铜（3） 无水硫酸钠（4） 40氢氧化钠：40g溶于100ml水 （饱和氢氧化钠溶液：450g/L）（5） 2硼酸溶液：2g硼酸溶于100ml水 （饱和硼酸溶液：50g硼酸溶于1000ml水，按1：2的比例配制接受液）（6） 盐酸标准液配制与标定：C(HCL)0.1mol/L 取

18、分析纯盐酸8.5ml 注入1000ml蒸馏水中摇匀即可。 C(HCL)=0.05mol/l取分析纯盐酸4.2ml，注入1000ml蒸馏水中摇匀即可（保存于容量瓶中）标定方法：称取下述规定量的（于300干燥至恒重）基准无水碳酸钠（准确至0.0001g）溶于50ml水中，加10滴甲基红溴甲酚绿混合指示剂，用配制好的盐酸标准液滴定至暗绿色变为紫红色，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液呈紫红色，同时做空白试验。C(HCL) mol/L基准无水碳酸钠g 1 1.6 0.5 0.8 0.1 0.2 0.05 0.1公式:C=m/(v1-v2)*0.05299式中:C-盐酸标准液的浓度 (mol/L)

19、v1-滴定时消耗盐酸标准液的量 (ml) v2-空白试验盐酸标准液的用量 (ml) m-无水碳酸钠的称取量 (g) 0.05299-与1ml盐酸标准液C(HCL)=1.00mol/L相当的以克表示的无水碳酸钠的质量(7) 混合指示剂:0.1%甲基红乙醇溶液,0.5%溴甲酚绿乙醇溶液,两溶液等体积混合. 5 测定步骤:（1） 消化A 称样:用分析天平准确称取样品0.5g左右，通过一光滑的硬纸条转移到凯氏烧瓶中。B 加催化剂：用药物天平称取硫酸铜0.2g、无水硫酸钠3g，依次加入凯氏瓶中，然后边弹边将纸条抽出。C 加浓硫酸：将20ml浓硫酸加入凯氏烧瓶中。D 加热消化:将上述凯氏瓶放到电炉上低温加

20、热（100200），注意防止泡沫溢出。待泡沫消失后提高电炉温度（410）。消化至液体澄清无黑点并呈蓝绿色时为完全消化，整个加热过程约为1-2小时。（2） 蒸馏、吸收A 定容：将冷却的消化液加入少量蒸馏水（约加20ml水），冷却（可用自来水冲洗凯氏瓶外壁使之冷却）后将消化液转移至100ml容量瓶中，然后用蒸馏水反复多次冲洗凯氏瓶，洗液并入容量瓶中，直至消化液完全转入容量瓶中。将溶液冷却到室温后定容到刻度，摇匀。B 接收液的准备:取10ml硼酸接收液于100ml三角瓶中，加入甲基红溴甲酚绿混合指示剂2滴，使接收液呈现灰红色。C 蒸馏、吸收:a 在蒸汽发生器中加入甲基红溴甲酚绿指示剂3滴与硫酸数滴，

21、使之保持酸性状态。b 与凯氏蒸馏装置连接好。c 洗涤蒸馏装置。d 将盛有接收液的三角瓶置于冷凝管下端于液面下23处。e 用移液管准确吸取容量瓶中的消化液10ml注入蒸馏装置的反应室中。f 加入饱和氢氧化钠10ml，用少量蒸馏水冲洗加液口后将加液口封住。g 打开蒸汽通道开始蒸馏，当冷凝管处的第一滴液体开始下滴，溶液由灰红色变为蓝绿色时开始计时5分钟。h 将冷凝管下端离开接收液面，再蒸馏1分钟。i 用蒸馏水冲洗冷凝管末端，将三角平移开准备滴定。（3） 滴定：用0.05mol/l的盐酸标准液进行滴定至溶液由蓝绿色变为灰红即为终点。记录消耗盐酸的体积。（4）空白测定：进行样品测试的同时，要进行空白测定

22、。测定时除了不加样品外，其余的操作步骤与试样完全相同。（5）标样：在样品测定之前，先用硫酸铵做标样，如果结果在21.19±0.2左右则表示仪器、药品和蒸馏水均合格，可以开始测试样品。标样的测定步骤：精确称取0.2g硫酸铵代替试样，加入100ml容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，蒸馏、吸收，滴定。6 计算公式：粗蛋白质的含量CP（）(V-V0)*C*0.0140*6.25*100/m*(V1/V2)式中：v1滴定样品时消耗的盐酸标准液的体积 （ml） v2容量瓶体积（ml） C盐酸标准液的浓度 （mol/L） m样品的质量 (g)0014与1ml盐酸标准溶液C(HCL)1.000mol/

23、L相当的,以克表示的氮的质量6.25氮换算成蛋白质的平均系数真蛋白的测定铜盐沉淀法一 原理: 根据蛋白质能被重金属眼所沉淀的特性，将试样中的蛋白质用碱式硫酸铜沉淀,过滤,使蛋白质和非蛋白氮分离,然后进行消化蒸馏,即可测出蛋白氮的含量.二 仪器滤纸 漏斗 烧杯200ml 量筒 凯氏瓶 滴定管 容量瓶 三角瓶三 试剂1. 6%硫酸铜溶液:称60克硫酸铜溶于1000ml水中2. 1.25%氢氧化钠溶液:称12.5g氢氧化钠溶于1000ml水中3. 浓硫酸4. 400g/L氢氧化钠溶液5. 混合指示剂 0.1%甲基红乙醇溶液（1 g/L），0.5%溴甲酚绿乙醇溶液（5 g/L），等体积混合6. 0.0

24、5mol/L盐酸标准液(4.2ml/L)标定详见粗蛋白的测定。7. 硫酸钠 硫酸铜8.20g/L的硼酸接收液 饱和硼酸溶液（50g/L）,硼酸接收液按1：2配制。9. 10%BacL溶液（100 g/L）四，步骤1. 沉淀:(1) 称样0.2-0.5g置于500ml烧杯中,加水50ml,在电炉上加热至沸,并不时搅拌.(2) 将烧杯从电炉上取下，趁热在不断搅拌下逐滴加入6%硫酸铜,1.25%氢氧化钠溶液各15毫升(用试纸检查勿使溶液呈碱性)静置数小时或陈化过夜.(3) 用倾注法过滤,然后用少量热水(60-80）洗涤残渣数次至滤出液中无硫酸根(用10%Bacl2溶液检查,)通常约洗15次左右 （4

25、）将洗好的沉淀连同滤纸稍晾干后移入培养皿，放入50-60烘箱中烘干2小时2 消化（1） 将干燥的式样连同滤纸一起包好放入凯氏瓶,（2） 加催化剂：用药物天平称取硫酸铜0.2g、无水硫酸钠3g，依次加入凯氏瓶中，然后边弹边将纸条抽出。（3） 加浓硫酸：将20ml浓硫酸加入凯氏烧瓶中。（4） 加热消化:将上述凯氏瓶放到电炉上低温加热（100200），注意防止泡沫溢出。待泡沫消失后提高电炉温度（410）。消化至液体澄清无黑点并呈蓝绿色时为完全消化，整个加热过程约为1-2小时。3. 蒸馏、吸收（1）定容：将冷却的消化液加入少量蒸馏水（约加20ml水），冷却（可用自来水冲洗凯氏瓶外壁使之冷却）后将消化液

26、转移至100ml容量瓶中，然后用蒸馏水反复多次冲洗凯氏瓶，洗液并入容量瓶中，直至消化液完全转入容量瓶中。将溶液冷却到室温后定容到刻度，摇匀。（2）接收液的准备:取10ml硼酸接收液于100ml三角瓶中，加入甲基红溴甲酚绿混合指示剂2滴，使接收液呈现灰红色。（3）蒸馏、吸收:a 在蒸汽发生器中加入甲基红溴甲酚绿指示剂3滴与硫酸数滴，使之保持酸性状态。b 与凯氏蒸馏装置连接好。c 洗涤蒸馏装置。d 将盛有接收液的三角瓶置于冷凝管下端于液面下23处。e 用移液管准确吸取容量瓶中的消化液10ml注入蒸馏装置的反应室中。f 加入饱和氢氧化钠10ml，用少量蒸馏水冲洗加液口后将加液口封住。g 打开蒸汽通道

27、开始蒸馏，当冷凝管处的第一滴液体开始下滴，溶液由灰红色变为蓝绿色时开始计时5分钟。h 将冷凝管下端离开接收液面，再蒸馏1分钟。i 用蒸馏水冲洗冷凝管末端，将三角平移开准备滴定。（3） 滴定：用0.05mol/l的盐酸标准液进行滴定至溶液由蓝绿色变为灰红即为终点。记录消耗盐酸的体积。（4）空白测定：进行样品测试的同时，要进行空白测定。测定时除了不加样品外，其余的操作步骤与试样完全相同。粗蛋白质的定量是基于测定饲料中的总有机氮。但在饲料中，特别是植物性饲料中含有较多的NPN（非蛋白氮）它不能很好的被单位动物利用。另外，由于当今蛋白质资源的缺乏，一些蛋白质饲料（如鱼粉）中常掺有不能被家畜利用的含N较

28、高的NPN如尿素等；再者，若鲜鱼粉变质腐烂。其粗蛋白质含量不变，但其纯蛋白质显著下降，因此，为了真正了解饲料中蛋白质的利用率，以及鱼粉的质量，则必需测定纯蛋白质的含量。第四课 饲料中常规成分的测定一 饲料中钙的测定（高锰酸钾滴定法）GB1 本方法适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中钙的测定。2 测定原理：将试样有机物破坏，钙变成溶于水的离子，并与盐酸反应生成氯化钙，然后在溶液中加入草酸铵溶液，使钙成为草酸钙白色沉淀，然后用硫酸溶液溶解草酸钙，再用高锰酸钾标准液滴定游离的草酸根离子。根据高锰酸钾标准液的用量，可以计算出试样中钙的含量。3 实验准备：实验室用粉碎机、分析天平、电炉、马福炉、坩埚、容

29、量瓶（100ml）、烧杯（500 ml）、表面皿、玻璃棒、玻璃漏斗、移液管（5、10 ml）、量筒（20、100 ml）、滴定管（酸式，25或50 ml）、定量滤纸（中速，12.5cm）等。4 试剂及配制：（1）盐酸溶液：1：3（V:V）（2）硫酸溶液：1：3（V:V）（3）氨水溶液：1：1（V:V）（4）草酸铵溶液：42g草酸铵溶于1000ml水。（5）甲基红指示剂：0.1g甲基红溶于100ml乙醇(95%)。（6）浓硝酸（7）氨水溶液：1：50（V:V）（8）10醋酸溶液（9）0.02 mol/L高锰酸钾标准液：配制：称取0.64g高锰酸钾溶于1000ml蒸馏水中，煮沸15分钟，冷却置于暗

30、处保存2周。玻璃坩埚过滤于干燥的棕色瓶中。C（高锰酸钾）mol/L（配制）高锰酸钾 g(标定)基准草酸钠g0.13.20.10.051.60.10.020.640.1标定：称取基准草酸钠（105干燥两小时，存于干燥器中）0.1g，准确至0.0002g，溶于50ml水中，再加硫酸（1：3）10ml，将此溶液加热至7585，用配制的高锰酸钾溶液滴定，溶液呈现粉红色且1分钟不退色为终点，滴定结束时，溶液温度在60以上。同时做空白试验。计算：Cm/(V1-V2)*0.0670式中：C为高锰酸钾标准溶液浓度（mol/L）m为基准草酸钠的质量(g)V1为滴定时高锰酸钾标准溶液消耗量(ml)V2为空白试验滴

31、定时高锰酸钾标准溶液消耗量(ml)0.0670为与1.00ml高锰酸钾标准溶液C1.000 mol/L相当的以克表示的草酸钠的质量。5 测定步骤：（1）试样的制备：取具有代表性试样用四分法缩减至200g，粉碎至40目，装入密封容器中（防止试样成分的变化或变质）。（2）试样的分解 准备坩埚：将坩埚洗净烘干，在550灼烧1小时，冷却、称重、记号。 称样、低温碳化：称取试样2-5g于坩埚中，准确至0.0002g，在电炉上低温碳化至无烟为止。 高温灼烧：将碳化好的试样移入马福炉中550灼烧3小时。 溶解灰分：用40ml盐酸溶液（1：3）反复洗涤坩埚，将灰分无损的转移至烧杯中，加入浓硝酸5ml，盖上表面

32、皿，煮沸约3分钟。 将分解好的溶液过滤至100ml容量瓶中，并用水洗涤烧杯一并滤至容量瓶中，冷却至室温后定容，摇匀。即为试样分解液。（3）草酸钙沉淀的形成及洗涤： 草酸钙沉淀的形成： 用移液管准确吸取10ml分解液于烧杯中,加入蒸馏水50ml,滴加甲基红指示剂2滴,使溶液呈粉红色,滴加1:1的氨水至溶液呈黄色(PH=5.6),再滴加10%醋酸至溶液又呈粉红色(PH=2.5-3.0)。将上述溶液在电炉上煮沸，在微沸的状态下慢慢滴加草酸铵溶液10ml，并不断搅拌（注意：如果溶液变为黄色，应补加醋酸溶液至粉红色）。煮沸数分钟后，放置过夜使沉淀陈化。 沉淀的收集和洗涤：用中速的定量滤纸过滤上述溶液收集

33、沉淀，然后用1：50的氨水洗涤沉淀68次，至无草酸根离子为止。（用试管接取滤液23ml，加1：3硫酸溶液数滴，加热至80，加高锰酸钾溶液1滴，溶液呈微红色，且30分钟不退色）。再用蒸馏水洗涤2次。（4）沉淀的溶解与滴定 将沉淀和滤纸转移至原烧杯中，加1：3硫酸溶液15ml，蒸馏水50ml，加热至7580，立即用0.02 mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至溶液呈微红色，且30秒不退色，即为滴定终点。记录消耗的高锰酸钾标准液的体积。（5）空白的测定：在干净的烧杯中加滤纸一张，1：3硫酸溶液15ml,蒸馏水50ml，加热至7580，立即用0.02 mol/L高锰酸钾标准溶液滴定至溶液呈微红色，且30秒

34、不退色即可。6 计算结果（1）计算公式：Ca(%)=(V-V0)*C*0.02/m*(V1/V2)*100式中：V滴定试样消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml） V0-空白测定时消耗的高锰酸钾标准溶液的体积（ml） C高锰酸钾标准溶液的浓度（mol/L） V1试样分解液的体积（ml） V2形成沉淀时吸取的分解液的体积（ml） m-试样的质量（g） 0.02-与1.00 ml1.000 mol/L的高锰酸钾标准溶液相当的钙的克数。（2）重复性：每个样品取两个平行样进行测定，如果相对平均偏差在允许的范围内，以其算术平均值为结果。含钙量在5以上时，允许相对平均偏差为3；含钙量在51时，允许相对平均偏差

35、为5；含钙量在1以下时，允许相对平均偏差为10。（3）注意事项 高锰酸钾标准溶液的浓度不稳定，至少1个月标定一次。 每种滤纸的空白值不同，至少每盒滤纸应作一次空白实验。 洗涤草酸钙沉淀时，必须沿滤纸边缘向下洗，使沉淀集中在于滤纸中心，以免损失。每次洗涤过滤时，都必须等上一次洗液完全滤净后再加，每次洗涤不得超过漏斗体积的23。二 饲料中总磷的测定（钼黄比色法）GB1本方法适用于配合饲料和单一饲料。测定范围磷含量020微克毫升。2 测定原理：样品经灰化后，磷形成各种金属的磷酸盐，（将试样中有机物破坏，使磷游离出来），在酸性溶液中与钒钼酸铵显色剂反应，生成黄色的磷钒钼酸复合体，在420纳米的波长下比

36、色测定。因为这种颜色的深浅与溶液中磷的含量呈正比，所以可以用比色法测定出饲料中磷的含量。（此法测得为总含磷量，其中包括动物难以吸收的植酸磷。）3 实验准备：实验室用粉碎机、分析天平、分光光度计电炉、马福炉、坩埚、容量瓶（50、100ml、1000ml）、移液管（0.1、0.5、2、5、10 ml）、量筒（20、100 ml）等。4 试剂及配制：（本方法试剂为分析纯，水为蒸馏水）（1）盐酸溶液：1：3水溶液（2）硝酸（3）钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵1.25 g置于1000 ml烧杯中 ，加硝酸250 ml，另取钼酸铵25 g置于500 ml烧杯中，加水400ml使之溶解，在冷却的条件下，将缓缓

37、倒入中，并用水定容到1000ml，（存于棕色容量瓶中）避光保存，若生成沉淀则不能继续使用。（4）磷标准液：将磷酸二氢钾105干燥1小时，在干燥器中冷却后称取0.2195克溶于水中，定量移入1000 ml容量瓶中，加入硝酸3 ml，用水稀释至刻度，摇匀，即为50微克毫升的磷标准液。5 测定步骤：（1）试样制备取具有代表性的样品，粉碎至40目，用四分法缩分到200克，装入密封的容器中。（2）试样分解同钙的测定。可用测定钙的试样分解液直接测定总磷。（3）标准曲线的绘制：吸取磷标准液准确移取磷标准液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0毫升分别放入9个编号的50毫升的容量瓶

38、中。加显色剂在上述的9个容量瓶中分别加入10毫升钒钼酸铵显色剂。定容在各容量瓶中加水定容到刻度，摇匀。静止1020分钟。比色用10毫米的比色皿，在420纳米的波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度（光密度）。绘制曲线以各溶液的吸光度为横坐标，磷的微克数为纵坐标绘制标准曲线。（4）试样的测定：吸取试液准确移取试样分解液0.15毫升（含磷在50750微克）于50毫升的容量瓶中。（空白：在50毫升容量瓶中加入10毫升显色剂，用水定容到刻度。）加显色剂 在容量瓶中分别加入10毫升钒钼酸铵显色剂。定容在容量瓶中加水定容到刻度，摇匀。静止1020分钟。比色用分光光度计测吸光度，将波长调至420纳米处，用空

39、白调“0”（用10毫米的比色皿）后，依次测出溶液的吸光度（光密度），代入相关方程求得P含量。根据测得的试样分解液的吸光度，在标准曲线上查出其含磷量（微克）6 计算结果（1）计算公式：P(%)=Y/ m *1000000*(V1/V2)*100式中：m-试样的质量（g）X-吸光度Y887.87*X+11.35V1试样分解液的体积（ml） V2测定时吸取的分解液的体积（ml）1000000克和微克的换算所得结果应精确到0.01（2）重复性：每个样品取两个平行样进行测定，如果相对平均偏差在允许的范围内，以其算术平均值为结果。含磷量在0.5以上时，允许相对平均偏差为3；含磷量小于0.5时，允许相对平均

40、偏差为10。Y887.87*X+11.35W样品重（Y）V取消化液的量（ml）Y=a+bxb= (xy-xy/n)/x2-(x)2/na=Y-bx只有相关系数0.99至少两个“9”以上才能使用该回归方程(xy-xy/n)/x2-(x)2/n*y2-(y)2/n0.5将试样的光密度最好在0.05-0.7之间。三 饲料水溶性氯化物的测定方法（硝酸银反滴定法-氟尔哈德法）GB 饲料中的氯化物大部分为氯化钠,氯化钠在机体内是以钠离子和氯离子的形成主要分布在细胞外液中,参与集体渗透压的调节,在维持畜禽的正常生理活动，以及酸碱平衡起着重要的作用。氯化钠还有增进食欲，促进生长等作用。但是，在植物饲料中，氯化

41、钠的含量较少，而且钠和氯的比例不平衡，不能满足动物的生理需求，必须人工喂一定的食盐，而过量的食盐又可以引起畜禽中毒，甚至死亡，因此测定单一饲料和配合饲料，特别是鱼粉中盐分的含量在饲料生产中具有重要意义。1 本方法适用于配合饲料和单一饲料。检测范围氯元素含量为660mg2 测定原理：测定可溶性氯化物的量作为盐分的量，采用硫氰酸铵反滴定法，在样品中加入过量的硝酸银，生成白色氯化银沉淀，除去沉淀后，在酸性溶液中用硫氰酸铵回滴过量的硝酸银。根据消耗的硫氰酸铵的量，则可计算出氯化物的含量，作为饲料中盐分的估计。3 实验准备：分析天平，移液管（10、25、50 ml），滴定管（50 ml），容量瓶（100

42、 ml），三角瓶（250 ml具塞1个其他2个）4试剂与配制使用试剂除特殊规定外均为分析纯。水为蒸馏水。1） 硝酸。2） 硫酸铁溶液（60g/L） 称取60克硫酸铁，加水微热溶解后，加水至1000ml.3） 硫酸铁指示剂 250g/L的硫酸铁水溶液，过滤除去水溶物，与等体积的浓硝酸混合均匀。4） 氨水溶液 10ml加蒸馏水190ml.5） 硫氰酸铵溶液（0.02mol/L） 称取硫氰酸铵1.52克，溶于1000ml水中。6） 氯化钠标准贮备溶液 基准级氯化钠，与500oC灼烧1h，干燥器中冷却保存。称取5.8454克溶解与水中，转入1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度摇均。此氯化钠标准贮备液的

43、浓度为0.1mol/L。7） 氯化钠标准工作溶液 准备吸取氯化钠标准20ml于1000ml容量瓶，用水稀释至刻度，摇均。此氯化钠标准溶液的摩尔浓度为0.02mo/L.8） 硝酸银标准溶液（0.02mol/L） 称取3.4克硝酸银溶于1000ml水中，贮于棕色瓶中。（1）体积比 吸取硝酸银溶液20ml，加硝酸4ml，指示剂2ml,在剧烈摇动下用硫氰酸铵溶液滴定，滴至终点为持久的淡红色。由下式计算两溶液的体积比（F）。 F=20/v2 式中 F-硫酸银与硫氰酸铵溶液的体积比； 20-硝酸银溶液的体积（ml）； V2-硫氰酸铵溶液体积（ml）;(2) 标定 准确称取氯化钠标准溶液10ml于100ml

44、容量瓶中，加硝酸4ml，硝酸银标准溶液25ml，振荡使沉淀凝结，用水稀释至刻度，摇均，静置5min，干过滤入干三角瓶中。吸取滤液50ml，加硫酸铁指示剂2ml，用硫氰酸铵溶液滴定出现淡红棕色，且30s不褪色即为终点。硝酸银标准溶液的浓度（c）按下式计算。C=(m*20/1000*10/100)/0.05845*(V1-FV2*100/50)式中 c-硝酸银标准溶液的浓度（mol/L） m-氯化钠质量（g）； V1-硝酸银标准溶液（ml）; V2-硫氰酸铵溶液体积（ml）; F-硝酸银与硫氰酸铵溶液的体积比； 0.05845-与1ml硝酸银标准溶液（1mol/L）相当的以克表示的氯化钠质量。所得

45、结果应表示至四位小数。（四）仪器设备1实验室用样品粉碎机或研钵。2分样筛 孔径0.45mm(40目)。3分析天平 感量0.0001克。4移液管 2或5、10、25、50ml.5 滴定管 酸式，25、50ml。6容量瓶 100、1000ml.7三角瓶 250ml。8滤纸 快速，直径15cm。（五）样品的选取与制备选取有代表性的样品，粉碎至40目，用四分法缩减至200克，密封保存，以防试样组分变化或变质。（六）测定步骤1准备移液管（25、50 ml）、容量瓶（100 ml 1个）、三角瓶（250 ml 4个，其中具塞三角瓶1个）2称样25克，（鱼粉0.5-1克）放入250 ml具塞三角瓶中（1号）

46、。3样品预处理：在三角瓶（1号）中加入50 ml硫酸铁溶液（用50 ml移液管吸取），再加入1：19氨水100 ml，剧烈震荡15分钟后，静置15分钟后干过滤至三角瓶（2号）中。4AgCl沉淀形成：准确吸取滤液50ml于100ml容量瓶中，加浓硝酸10ml，硝酸银标准溶液25ml，用力震荡使沉淀凝结，静止10分钟，用水稀释至刻度，摇均静置5min。 5过滤沉淀：将容量瓶中溶液干过滤至三角瓶中（3号）。6形成硫氰酸银：吸取50 ml滤液放入三角瓶中（4号），再加入10 ml硫酸铁指示剂用硫氰酸铵溶液滴定至砖红色，且30s不退色即为终点。（七）结果的计算与表述1计算 Cl(%)=(V1-V2F*1

47、00/50)C*150*0.0355)/m*50*100或 NaCl(%)=(V1-V2F*100/50)C*150*0.05845)/m*50*100式中 m-样品质量（g）; V1-硝酸银溶液的体积（ml）； V2-滴定消耗的硫氰酸铵溶液体积比； c-硝酸银溶液的浓度；（mol/L） 0.0355-与1.00ml硝酸银标准溶液c(AgNO3)=1.00mol/L 相当的以克表示的氯元素的质量； 0.05845-与1.00ml硝酸银标准溶液c(AgNO3)=1.00mol/L 相当的以克表示的氯化钠元素的质量。2允许误差 每个样品应取2份平行样进行测定，以其算术平均值为分析结果。氯含量在3%

48、以下，允许绝对误差0.05；氯含量在3%以上，允许相对偏差5%。二、氯离子选择电极法（快速测定法）（一）原理利用氯离子选择电极在溶液中的电位值与溶液中氯离子的对数值之间存在函数关系，即电极对氯离子的活度呈奈斯特响应，选择一定的缓冲溶液控制总离子强度，消除干扰元素的影响，从而快速测定饲料中可溶性氯化物的含量。（二）试剂与溶液本方法使用试剂除特殊注明均为分析纯，水为蒸馏水。1 氯化钠标准贮备液 称取于500oC灼烧1h冷却后的基准氯化钠20g入250ml烧杯中，用水溶解，转移到1000ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇均。此液含氯化钠20mg/ml.2 氯化钠标准工作液 移取氯化钠标准贮备液25ml

49、入100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇均。此液含氯化钠20mg/ml.3 总离子强度缓冲液 称取50.6g硝酸钾入500ml烧杯中，用0.01mol/L硝酸溶液溶解，转移至1000ml容量瓶中，并用硝酸溶液冲至刻度，摇均。（三）仪器设备1离子活度剂P*S-215型或PHS-2酸度计。2217型双盐桥甘汞电极（801型双接液电极）。3氯离子选择电极301型（PCL-1型）。4磁力搅拌器。（四）标准曲线的绘制分别吸取0.00、0.10、1.00、2.00、4.00、10.00ml氯化钠标准工作液加入六个50ml容量瓶中，不足10ml的用水补至10ml。用总离子强度缓冲液稀释至刻度，摇均，即为0.

50、00、0.50、5.00、10.00、20.00、50.00mg/ml的氯化钠标准系列，将上述标准溶液分别倒入50ml的干烧杯中，放入搅拌子一支，以PCL-1电极为指示电极，217型双盐桥电极（外接液电极内装2mol/L硝酸钾溶液）为参比电极，搅拌3min与离子活度计上读取毫伏数，用半对数坐标纸E值（毫伏数）为纵坐标，logCt氯化钠为横坐标绘制标准曲线。（四）测定步骤1样品处理 准确称取45g（精确至0.0002g）入200ml三角瓶中，准确加入100ml水，震荡5min干过滤（中速定性滤纸），滤纸用50ml干烧杯接取。2测定 吸取滤液10ml入50ml容量瓶中，用总离子强度缓冲液加至刻度，

51、摇均，按标准曲线操作步骤，测定电压（mV），用标准曲线查得氯化钠的含量。（五）结果计算可溶性氯化物（以NaCl计）含量按下式计算：NaCl(%)=m1/(mv1*100/v)*100式中 m1-由标准曲线查得氯化钠质量（mg）； V1-测定时所取滤液体积（ml）; V-式样溶液总体积（ml）; m-称取试样的质量（g）.第五课 饲料中常规成分的测定一 饲料中粗纤维的测定：粗纤维是一种类别名称,不是单一的物质,它是植物细胞壁的组成成分,粗纤维主要是由纤维素、半纤维素、木质素、果胶物质以及镶嵌物质所组成,纤维素是一种高分子化合物,不溶于水和任何有机溶剂。 无机物（灰分） 干物质 可溶性（无氮浸出物

52、）饲料 有机物 碳水化合物 水分 脂肪 不可溶性（粗纤维） 粗蛋白 维生素2 方法：酸碱水解法(GB)“强制公认的方法”本方法适用于各种混合饲料和单一饲料。3 原理：称取一定数量的样品，用一定浓度的沸热硫酸和一定浓度的氢氧化钠溶液进行处理（除去蛋白质、维生素、无氮浸出物），然后再加一定数量的有机溶剂（乙醚、乙醇，除去脂肪），再将残渣（灰分、粗纤维、水分）转移到古氏坩埚（或者玻璃坩埚）里，烘干除去水分（105110烘干46小时），称量结果(W1=灰分粗纤维)将坩埚放入马福炉里烧30分钟（550）得出W2（灰分）的重量，用W1W2，就得出粗纤维的重量。4 实验准备：古氏坩埚（或玻璃坩埚）、古氏漏斗

53、、安全漏斗、高型烧杯、表面皿、玻璃棒、抽滤瓶、真空泵、恒温干燥箱、马福炉、电子天平。5 试剂及配制：（） 0.128mol/L硫酸：3.4ml硫酸溶于1L水中。（） 0.313mol/L氢氧化钠：12.5g氢氧化钠溶于1L水中。（） 乙醚、乙醇（） 酸洗石棉6 测定步骤：（） 称样： 称取样品2g左右,放入500ml高型烧杯中。（） 酸处理：将200ml（0.128mol/L）热硫酸加入盛有样品的烧杯，盖上表面皿放在电炉上加热，并使溶液1分钟内沸腾，计时。微沸30分钟，（消煮过程中，用热蒸馏水冲洗粘在杯壁上的样品，并使杯内液面保持在200ml）取下，静置10分种，使样品下沉，然后在抽滤装置下抽滤，除去杯中的酸液，再加入100200ml蒸馏水，反复洗涤，（约洗涤45次后）用蓝色石蕊试纸检查，不变红为止。（表示杯中液体为中性）（） 碱处理：将200ml（0.313mol/L）热氢氧化钠加入上述烧杯中，盖上表面皿放在电炉上加热，并使溶液1分钟内沸腾，计时。微沸30分钟，(步骤同酸处理) 取下，静置10分种，使样品下沉，然后在抽滤装置下抽滤，除去杯中的碱液，再加入100200ml蒸馏水，反复洗涤，（约洗涤45次后）用红色石蕊试纸检查洗液不变色为止。（表示杯中液体为中性）（） 残渣转移到古氏坩埚中:首先