虫草多糖对小鼠皮肤光老化的保护作用

1、虫草多糖对小鼠皮肤光老化的保护作用 09-09-03 14:54:00 编辑：studa20 作者：李华 叶杰 李伯勤 应馨萍【摘要】 目的探讨冬虫夏草多糖对小鼠皮肤光老化的保护作用。方法用8-甲氧补骨脂素（8-MOP）联合UVA制备小鼠皮肤光老化模型，在造模前给皮肤涂抹虫草多糖溶液，造模后24 h内取皮肤组织，进行HE染色和电镜观察并检测组织羟脯氨酸含量。结果光老化组皮肤真皮层明显增厚，炎细胞浸润，皮脂腺不规则增生，纤维组织疏松紊乱，常见断裂，成纤维细胞形态不规则，内质网少，虫草多糖保护组明显改善，羟脯氨酸含量较光老化组明显增加。结论 虫草多糖对皮肤光老化具有保护作用。 【关键词】 虫草多糖

2、 皮肤 光老化虫草多糖（CP）是虫草的主要活性成分之一，具有抗肝纤维化、抗肿瘤、免疫调节、降血糖等药理作用1。近年研究发现虫草多糖对急慢性肾衰有改善作用2，3，抗衰老方面的研究相对较少，李连德等4采用从虫草深层发酵产物中提取的多糖进行果蝇抗衰老实验，结果表明，不同来源的虫草多糖对果蝇寿命均有不同程度的延长作用，从而证明虫草多糖有延缓衰老的作用；并且延寿的效果随纯度的增大而提高。皮肤是机体最大的器官，皮肤老化是机体衰老的重要组成部分，与许多皮肤病如脂溢性角化、日光性角化、基底细胞癌、鳞状细胞癌等的发生也有着病因学的关系，而且有损于美容，因此预防和延缓皮肤衰老已成为生命科学研究的热点之一。皮肤老化

3、包括两个过程，内在老化(intrinsic或chrondogic aging)和光老化(actinic aging或Photoaging)5。前者主要受遗传和代谢等因素的影响，可通过改善全身营养代谢平衡等措施加以防护；后者则主要由长期紫外线照射所致，只能通过避免阳光照射和使用防晒药物来预防，而在实际生活中后者是很难避免的。有人用冬虫夏草来抗皮肤衰老，但其是否有效及其作用机制还未见报道。本课题就虫草多糖对皮肤光老化的保护作用进行了实验研究。 1 材料 1.1 药物和制剂虫草多糖由中草药冬虫夏草提取，纯度大于95，由上海中医药大学肝病所提供。组织羟脯氨酸试剂盒,购自南京建成生物工程研究所。 1.2

4、 动物昆明种小鼠，雌鼠，体重2025 g，78周龄，由上海中医药大学实验动物中心提供。 2 方法 2.1 动物分组及模型制备用电动理发器将小鼠背部皮肤剃净，约2 cm2 cm，裸露皮肤，随机分3组。第1组为正常对照组，皮肤每天涂抹一次双蒸水，无其他任何处理；第2组为光老化模型组，皮肤每天涂抹1% 8-甲氧补骨脂素（8-MOP）1次，1.52 h后，给予190 w的UVA照射，累积照射138 h（累积强度95 J/cm2），照射结束后24 h内取皮肤；第3组为药物保护组，皮肤每天涂抹浓度为20 mg/ml的虫草多糖溶液，稍干后再涂抹18MOP，1.52 h后，给予190 w的UVA照射，累积照射

5、138 h（累积强度95 J/cm2），照射结束后24 h内取皮肤；3组同时取皮肤组织，固定、HE染色和电镜，并取组织同时进行羟脯氨酸含量测定。 2.2 标本制备 3 结果 3.1 肉眼观察正常对照组，皮肤色泽红润有弹性，光老化组皮肤颜色灰暗，弹性差，局部变硬，毛发脱落，虫草多糖保护组，肉眼看与正常对照无差异。 3.2 HE染色结果光老化组较正常对照组相比，出现典型的光老化病理变化：表皮厚度不均一，常有脱落，真皮层变厚明显，炎性细胞浸润多见，微血管扩展，毛囊减少，皮脂腺不规则增生。虫草多糖保护组较光老化组，病理变化有明显改善，真皮层较光老化组薄，炎性细胞浸润较少。见图1。 3.3 电镜结果电镜

6、下观察真皮层的纤维分布和成纤维细胞的形态，结果显示，正常对照组，纤维分布整齐，规则、紧密，无断裂现象，成纤维细胞外形清晰，内质网扩展明显，说明成纤维细胞的蛋白质合成功能旺盛；光老化组，纤维分布疏松，局部出现不规则分布，有断裂现象，成纤维细胞形态变形，外形不规则，细胞质较少，内质网较少，并且有变异的细胞器，说明细胞的蛋白质合成不活跃；虫草多糖保护组，明显改善，纤维排列和成纤维细胞形态及细胞器更接近于对照组。见图2。 a对照组 b光老化组 c虫草多糖保护组 图1 实验皮肤HE染色光镜观察图（100） a对照组 b光老化组 c虫草多糖保护组 图2 电镜下观察各组小鼠皮肤结果（6000） 3.4 羟脯氨酸含量的测定取各组皮肤组织测定组织羟脯氨酸含量，计算平均值，并做各组间的t检验分析。光老化组的羟脯氨酸含量（羟脯氨酸/总蛋白）