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文档简介
1、习题:一、名词解释1 .临床检验生物化学(Clinical Biochemistry)2 .组合试验(profile tests)二、问答题1 .试述临床检验生物化学的研究领域。2 .试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。3 .简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。第一章 绪论答案一、 名词解释1. 临床检验生物化学 (Clinical Biochemistry): 临床检验生物化学是在人体正常生物化学基础上,研究病理状态下生物化学改变,寻找这些改变的特征性标志并建立可靠实用检测方法,通过对这些特征性标志物的检测,为健康评估、疾病预防、诊断、治疗、病情和预后判断等提供生物化学信息和决策依据
2、的一门学科。2. 组合试验 (profile tests): 在循证检验医学基础上,将某些疾病或器官系统功能的有关检验项目,进行科学合理的组合,以便获取更全面完整的病理生物化学信息的方法。如了解肝脏功能的组合试验。二、问答题1. 试述临床检验生物化学的研究领域。临床检验生物化学的学科领域主要包括以下三方面: 1. 揭示有关疾病的病理生物化学改变,从本质上阐明疾病发生、发展、转归的生物化学机制,为疾病的预防、诊断、疗效及预后评估,提供理论基础。2. 在上述研究基础上,寻找具有疾病特异性的生物化学标志物,并建立特异度、灵敏度高,简便而高性价比的检测方法,从而在临床开展有关项目的检测,提供反映这些标
3、志物改变的客观数据。 3. 将检测项目的数据,转化为预防、诊断和疗效及预后评价信息。2. 试述临床检验生物化学在医学中的地位及应用。在医学中,临床生物化学是阐明疾病发生、发展及转归的分子机制,从本质上认识病变准确部位及具体环节,为寻找有效的预防和治疗靶点,疾病的诊断及病情和预后判断,提供理论基础的一门重要病理学学科。其在医学中的应用主要包括: 1. 揭示疾病发生的分子机制。 2. 通过对有关疾病生物化学改变的特征性生物标志检测方法的建立和实施,为判断有无及何种疾病提供客观依据。而动态观察这些标志物的改变,可对病情发展、转归、预后及治疗方案的制定和效果判断,提供依据。 3. 临床检验生物化学技术
4、,涵盖了当前医学研究中常用的主要方法技术。因此,也是医学特别是临床医学各个领域研究的一门共同性工具学科。3. 简述临床检验生物化学的进展及发展趋势。 分子诊断学迅速发展,代表了的发展方向; 深入寻找高诊断特异性和灵敏性的新生物化学标志,提高诊断性能; 检测技术和方法的更新完善,更加及时、准确地提供检验结果; 全程质量管理; 以循证检验医学为基础,科学评价有关检测项目的诊断性能,合理有效地开展临床生物化学检验。一、单项选择题 (A 型题 )1 转氨酶的辅酶是A 磷酸吡哆醛BNADPHCNADHDFADE FMN2 SI 制中酶活性单位为AU/LBKatalCg/LDml/LE pmol3 酶的活
5、性国际单位(U) 是指A 在 25 及其他最适条件下,每分钟催化 lmol 底物反应所需的酶量B .在特定的条件下,每分钟催化1科mol底物发生反应所需的酶量C 在 37 条件下,每分钟催化 lmmol 底物发生反应所需的酶量D 在规定条件下,每秒钟催化lmol 底物反应所需的酶量E 在最适条件下,每小时催化lmol 底物发生反应所需的酶量4 目前我国临床实验室测定酶活性浓度推荐温度为A(250.1)B(370.5)C(370.3)D(370.1)E(371) 5 下列哪种酶是血浆特异酶A 淀粉酶B 凝血酶原C 碱性磷酸酶D 酸性磷酸酶E 脂肪酶6 下列哪一种酶只位于细胞浆A 酸性磷酸酶B 谷
6、氨酸脱氢酶C 乳酸脱氢酶D 天冬氨酸脱氢酶E 异柠檬酸脱氢酶7 在正常妊娠过程中血清酶增高最明显的是A LDB ALPC CKD AMYE LPS8 下列哪一种辅因子的生成可通过测定340nm 处吸光度的降低数来表示A FADH2B NAD+C NADHD FMNE NADPH9 血清保存在室温活性会升高的酶是A LDB ALPC ACPD ALTE AST 1 0 ALT 在人体各组织中含量最多的是A 肾脏B 心脏C 骨骼肌D 红细胞E 肝脏1 1 改变连续监测法测酶活性浓度的常数K 值大小最方便的途径为A 改变酶反应温度B 改变监测时间长短C 改变底物浓度D 改变标本稀释度E 改变酶反应的
7、 pH 值12 酶促反应进程曲线通常可用于确A 酶反应线性范围B 适宜的 pHC 适宜的酶量范围D 反应线性期的时间范围E 底物的浓度13 目前国内外应用连续监测法测血清ALT 所选测波长为A280nmB340nmC405nmD450nmE560nm14 进行酶活性浓度测时,常推荐加入磷酸吡哆醛的酶是AALPBALTCCKDLDE AMY15 连续监测法测ALT 所用基质通常是A 丙氨酸-a 酮戊二酸B 丙酮酸- 谷氨酸C 门冬氨酸-a 酮戊二酸D 草酰乙酸- 谷氨酸E 谷胱甘肽- 氨基酸16 显示“胆酶分离”前兆的疾病是A 急性心肌梗死B 肝癌C 脂肪肝D 肝坏死E 胆石症1 7 LD 催化
8、乳酸生成丙酮酸的反应较适当的 pH 是A10.5B9.0C7.6D7.0E 4.61 8 乳酸脱氢酶一般形成的同工酶的种类有A2种B3种C4种D5种E6种19骨折时血清LD 同工酶上升最高的是ALDlBLD2CLD3DLD4ELD520 CK含量最多的人体组织是A 肝脏B 肌肉C .肺D 肾脏E 心脏21 急性心肌梗死时,最先增高的酶是A ALTBLDC CKDASTE a-HBD22 在测定肌酸激酶试剂中含有巯基化合物,如 N- 乙酰半胱氨酸,目的是A 使酶分子有别构效应B 稳定酶活性中心的二硫键C 除去腺苷激酶(AK) 的影响D 巯基化合物是肌酸激酶底物之一E 除去肌酸激酶抑制剂23 对乙
9、醇中毒最敏感的血清酶是A GGTB ALPC CKD LDE ALT24 与心脏是否受损关系不大的血清酶是A ASTB a-HBDC CKD LDE ALP25 ACP 含量最多的人体组织是A 肝脏B 骨骼C 红细胞D 血小板E 前列腺26 为防止红细胞对 ACP 测定的干扰,常加入下列何种抑制剂以提高检测的特异性A 苯丙氨酸B L- 酒石酸C 尿酸D EDTAE L- 半胱氨酸27 在碱性溶液中进行醋酸纤维薄膜电泳时,最接近正极 ( 移动最快 ) 的 ALP 同工酶是A肝ALPB骨ALPC肠ALPD 胎盘 ALPE肾ALP28 同时测定下列哪种血清酶有助于鉴别 ALP 升高的来源A ACPB
10、 GGTC LDD CKE AST29 在骨骼和肝脏疾病的诊断中最重要的酶是A LDB CKC ALPD ACPE AMY30 人血清中的淀粉酶是A a 淀粉酶B . 3淀粉酶C . 丫淀粉酶D A+BE A+C31 用于辅助诊断有机磷中毒的酶是AAMYBACPCLPLDChEE ALP32 临床上常用来分析同工酶的方法A 电泳法B 层析法C 沉淀法D 热失活分析法E 蛋白酶水解法33 患者,男, 32 岁,饮酒饱餐后上腹部剧痛 6 小时,伴大汗,频吐。查体:面色苍白,血压34 3/6.7kPa(70/50mmHg) ,心率 132 次分,左上腹肌紧张,压痛及反跳痛,腹部移动性浊音阳性,血淀粉
11、酶740U L( 正常上限为 220U/L) 。该患者首先考虑的诊断为A 急性胆囊炎B 肝性黄疸C 急性胰腺炎D 溶血性黄疸E 胆石症二、多项选择题 ( B 型题 )A. a-HBD B. LD C. AST D . CKE. ACP1 对前列腺癌诊断价值最大的血浆酶是( )。)。2 急性心肌梗死时,最先恢复正常的血浆酶是(A AST 和 ALTD AST 和 AMSB ALP 和 CKC LPS 和 AMSE CK 和 CK-MB3 多用于胰腺炎诊断的酶是( )。4 多用于肝脏疾患诊断的酶是()。5 多用于急性心肌梗死诊断的酶是( )。6 多用于骨骼疾患诊断的酶是()。三、多项选择题 (X
12、型题 )1 影响血清酶变异的生理因素有A 性别B 年龄C 进食D 运动E 以上都不是2 下列酶中具有酶原形式的酶有A 胃蛋白酶B 胰蛋白酶C ALTD ALPE 糜蛋白酶3 下列对酶活性浓度测定描述正确的是A 可测定产物生成量B 可测定底物消耗量C 与底物浓度无关D 需最适温度E 需最适酸碱度4 临床上应用酶检测诊断疾病时,一般考虑下列哪些因素A 组织与血清酶活性比值在100 倍以上B 组织损伤后,酶能较快地释放到血液中C 要有合适的生物半寿期D 同工酶有一定组织分布特异性E 酶的组织分布广5 肌酸激酶存在于A 心肌B 骨骼肌C 脑组织D 红细胞E 肝6 标本溶血对测定结果有影响的血清酶是A
13、CKB LDC ALTD ASTE GGT7 CK 的变异体主要是指A 巨 CK1B CK-MBC CK-MMD 巨 CK2E CK-BB8 ACP 与 ALP 作用类似,主要区别在于A 最适 pH 不同B 组织来源不同C 所作用的底物种类相近D 缓冲液种类不同E 稳定性不同9 连续监测法进行酶学测定中常见的干扰因素有A 样本本身含有其他酶和物质干扰B 工具酶中混有其他酶的污染C 非酶反应的干扰D 分析容器的污染与沉淀形成E 使用双试剂10 下列代谢物与其酶法测定所用试剂的组合,正确的是A 尿酸- 尿酸酶- 过氧化氢酶B 葡萄糖 - 葡萄糖氧化酶- 葡萄糖 -6 磷酸脱氢酶C 尿素- 尿素酶-
14、 谷氨酸脱氢酶D 甘油三酯- 脂蛋白脂肪酶- 甘油激酶E 胆固醇 - 胆固醇氧化酶- 过氧化物酶11 下列血清酶及其测定所用试剂的组合,正确的是A ATP-GGT 、B alanine-ALTC NAD-LDD p-nitrophenyl phosphate-ALPE ADP-CK12 碱性磷酸酶活性升高可见于A 变形性骨炎B 骨肿瘤C 恶性贫血D 甲状腺功能低下E 梗阻性黄疸13 G6PD 可用于测定A 葡萄糖B 淀粉酶C 脂肪酶D 乳酸脱氢酶E 肌酸激酶四、名词解释1 酶2 血浆固有酶3 酶的半寿期 4 连续监测法5 工酶6 酶活性 IU 定义 7 同工酶8 底物启动模式五、问答题1 .根
15、据米 - 曼式方程计算,当 s=3Km 时,其反应速度V 为多大 ?2 .简述正常血浆中的酶动态特点及影响酶浓度的因素3 .简述病理性血浆中酶浓度异常的机制4 .简述酶浓度的测定方法。5 .简述酶偶联反应法的原理。6 .简述临床同工酶的分析方法。7 .简述体液中酶浓度测定的主要影响因素及控制8 .临床酶学测定之前,标本的采集、处理与贮存有何注意点 ?9 .简述自动生化分析仪进行临床酶学测定时系数K 值的计算与应用。10 . 简述ALT 测定及其临床意义。11 . 简述CK 及其同工酶测定的临床意义。12 . 试述血清 ACP 活性测定的临床意义。13 . 试述血清淀粉酶测定有何临床意义?第二章
16、 生物化学检验中的诊断酶学参考答案(A 型题 )1 A 2 B 3 B 4 D5 B 6 C 7 B 8 C 9 B1 01 1 D 12 D 13 B 14 B 15 A16 D 1 7 B 1 8 D 19 E20 B21 C 22 B 23 A 24 E 25 E 26 B 27 A31 D 32 A 33 C28 B 29 C 30 A二、多项选择题 ( B 型题 )1 E 2 D 3 C4 A5 E 6 B三、多项选择题1 ABCD7 AD(X 型题 )2 ABE8 ABDE3 ABDE9 ABCD4 ABCD10 ACDE5 ABC11 BCDE6 ABCD12 ABE13 AE四
17、、名词解释1 酶是一种由活细胞产生,具有高度专一性、高度催化活性的物质,又称为生物催化剂士圭旦, 上女ZE白质2 血浆固有酶指属血浆蛋白的固有成分,在血浆中发挥特定催化作用的一类酶,也称血浆特异酶。3 酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期( t 1/2 )。半寿期可用来代表酶从血中清除的快慢。4 .连续监测法是指每隔一定时间(260s),连续多次测定酶反应过程中某一反应产物或底物量随时间变化的数据,求出酶反应初速度,间接计算酶活性浓度的方法。5 在酶学分析中,作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。6 酶活性 IU 定义为:在特定条件下, 1 min 能转化 1 m mo
18、l 底物 的酶量,即 1IU=1 m mol.min1 。目前国内外大多数临床实验室常省略国际二字,即将IU 简写为 U 。7 同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体,具有相同的催化作用,但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细胞内定位不同的一组酶称为同工 酶。8 底物启动模式是指样品先与缺乏某种底物的试剂 1 预孵育一定时间后,再加入含这种底物的试剂 2 , 启动样品中的待测酶的酶促反应。五、问答题1 V=Vms/(Km+s)= Vm*3Km /(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm ,即 V/Vm=0.75 。2 .正常血浆中酶的动态变化特
19、点:正常血浆酶根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况,可将血浆酶分成血浆特异酶和非血浆特异酶两大类,非血浆特异酶可进一步分为外分泌酶、细胞内酶和其他酶。一般认为,血液中酶的消除方式与其他血浆蛋白质类似,但是具体清除途径尚未完全明了。血浆酶主要在血管内失活或分解,尿液则是小分子酶排出的途径。影响酶浓度的因素包括 影响正常血浆酶含量的自身因素和生物学因素,前者主要有细胞内外酶浓度的差异、酶的相对分子量、酶的组织分布、酶在细胞内的定位和存在形式、酶的半寿期等;后者主要是性别、年龄、食与药物、运动、妊娠与分娩、体位改变、昼夜变化及家庭因素等。3 血浆酶的病理性变化主要包括酶合成异常、酶释放增加、酶
20、清除异常等。酶合成异常包括合成减少和合成增多。酶从病变(或损伤)细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机制。炎症、缺血、坏死、创伤和肿瘤等是细胞释放大分子酶蛋白的重要原因。此外,血液含抑制物、代谢紊乱、药物、遗传性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。4 酶 浓度 测定方法分为绝对定量法和相对定量法两大类。绝对定量法是直接测定酶蛋白量或酶摩尔浓度。相对定量法是根据酶的催化活性或酶促反应速度来间接测定酶浓度的方法。目前临床上所用的方法多属相对定量法。5 在酶活性测定时,如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定,可采用酶偶联法测定,即在反应体系中加入一个或几个工具酶,将待测酶生成的某一产物转化为新的
21、可直接测定的产物,当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时,指示酶的反应速度即代表待测酶的活性 。6 临床同工酶的分析方法有 电泳法、免疫分析法、 色谱法、动力学分析法、蛋白酶水解法。7 体液中酶浓度测定时,要控制的主要影响因素包括标本及标本采集和处理因素、试剂及方法学因素、仪器及操作因素,以及最适测定条件选择与条件的优化。8 测定酶浓度的样本来自不同的组织和器官,但以血清和血浆最为常用,特别是血清,既可避免抗凝剂的影响,又可防止抗凝时因振摇所致的溶血。 临床酶学测定之前,标本的采集、处理与贮存应注意:防止 溶血、合理使用抗凝剂、适宜的温度、减少副反应干扰。此外,采集各种体液样本的器皿质地
22、和洁净度,采血部位,以及血清中过量的胆红素、脂质,样品制备过程中的振摇等,均影响酶活性测定。9 用自动生物化学分析仪测定酶活性,通常采用公式进行计算。当条件固定时, 理论 K 值为常数。 由于仪器等诸多因素的影响, 在临床实际工作中,均需用校准物 定期检查和校正实际测定 K值。10 转氨酶的测定方法有许多种,以往多用比色法如赖氏法( Reitman-Frankel ) 、金氏法( King ) 和改良穆氏法( Mohun ) ,其中以赖氏法最常用,由于此法操作简便、经济,一些小型实验室仍在使用。目前,国内外实验室多采用IFCC推荐的连续监测方法对ALT进行测定。ALT 主要用于肝脏疾病的诊断。
23、 由于肝细胞中 ALT 浓度比血液高约 7000 倍,只要有1/1000 肝细胞中的 ALT 进入血液就足以使血中 ALT 升高 1 倍,故此酶是反映 肝损伤的一个很灵敏指标。 但应特别注意的是,重症肝炎时由于大量肝细胞坏死, 血中 ALT 可仅轻度增高,临终时常明显下降,但胆红素却进行性升高,出现所谓“酶胆分离”现象,常是肝坏死的前兆。11 CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍,所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法,其中后者最常用,为国内外测定CK 的参考方法。 CK 同工酶 多用电泳和免疫抑制法测定,
24、但两法均会受溶血和巨 CK 的干扰,免疫抑制法还会受到 CK-BB 的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定 CK-MBmass ,可不受溶血和巨 CK 的干扰。 CK 同工酶亚型( CK-MM 亚型 和 CK-MB 亚型 )多用琼 脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。CK 及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶,主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和 鉴别诊断及预后判断。12 ACP 的测定多是利用磷酸苯二钠法和磷酸对硝基酚法等在酸性条件下测定 ACP 。国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法,因为前列腺ACP 对此底物亲合力高,测定结果基本能反映ACP含量高低。不同方法参考值也不同。
25、此外还可通过用 L- 酒石酸这类抑制剂鉴别和估量 PAP 活性。由于 ACP 不稳定,酶活性测定困难,目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定ACP 特别是PAP 。总 ACP 升高可作为前列腺癌、骨疾病或网状内皮系统疾病的诊断指标。13 .临床上测定血液AMY主要用于诊断急性胰腺炎,常在腹痛后23 h开始升高(也有延至12h后升高者),多在1224 h 达峰值,25 d恢复正常。 峰 值一般为4 ULN6 ULN ,最高可达 40 倍。此值愈高,急性胰腺炎的可能性就愈大, 但 高低和疾病预后关系不大,但若持续性升高达数周,常提示胰腺炎有反复,或有并发症发生。尿 AMY约于发病后1224 h开
26、始升高,下降也比血液 AMY 慢,因此在急性胰腺炎后期测定尿AMY 更有价值。唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY 也可升高,但临床表现迥异 ,且主要为 S-AMY 升高,有别于胰腺炎以 P-AMY 升高为主。第二章 生物化学检验中的诊断酶学参考答案(A 型题 )1 A 2 B 3 B 4 D5 B 6 C 7 B 8 C 9 B1 0 E1 1 D 12 D 13 B 14 B 15 A16 D 1 7 B 1 8 D 19 E20 B21 C 22 B 23 A 24 E 25 E 26 B 27 A31 D 32 A 33 C28 B 29 C 30 A二、多项选择题 ( B 型题 )1 E
27、2 D 3 C 4 A5 E 6 B三、多项选择题1 ABCD7 AD(X 型题 )2 ABE8 ABDE3 ABDE9 ABCD4 ABCD10 ACDE5 ABC11 BCDE6 ABCD12 ABE13 AE四、名词解释1 酶是一种由活细胞产生,具有高度专一性、高度催化活性的物质 ,又称为生物催化剂 ,主要是蛋白质。2 血浆固有酶指属血浆蛋白的固有成分,在血浆中发挥特定催化作用的一类酶,也称血浆特异酶。3 酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期( t 1/2 )。半寿期可用来代表酶从血中清除的快慢。4 .连续监测法是指每隔一定时间(260s),连续多次测定酶反应过程中某一反应产物或
28、底物量随时间变化的数据,求出酶反应初速度,间接计算酶活性浓度的方法。5 在酶学分析中,作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶称为工具酶。6 酶活性 IU 定义为:在特定条件下, 1 min 能转化 1 m mol 底物 的酶量,即 1IU=1 m mol.min -1 。目前国内外大多数临床实验室常省略国际二字,即将IU 简写为 U 。7 同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体,具有相同的催化作用,但其分子构成、空间构象、理化性质、生物学性质以及器官分布或细胞内定位不同的一组酶称为同工酶。8 底物启动模式是指样品先与缺乏某种底物的试剂 1 预孵育一定时间后,再加入
29、含这种底物的试剂 2 ,启动样品中的待测酶的酶促反应。五、问答题1 V=Vms/(Km+s)= Vm*3Km /(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm ,即 V/Vm=0.75 。2 .正常血浆中酶的动态变化特点:正常血浆酶根据酶的来源及其在血浆中发挥催化功能的情况,可将血浆酶分成血浆特异酶和非血浆特异酶两大类,非血浆特异酶可进一步分为外分泌酶、细胞内酶和其他酶。一般认为,血液中酶的消除方式与其他血浆蛋白质类似,但是具体清除途径尚未完全明了。血浆酶主要在血管内失活或分解,尿液则是小分子酶排出的途径。影响酶浓度的因素包括 影响正常血浆酶含量的自身因素和生物学因素,前者主要有细胞内外酶浓度的差
30、异、酶的相对分子量、酶的组织分布、酶在细胞内的定位和存在形式、酶的半寿期等;后者主要是性别、年龄、食与药物、运动、妊娠与分娩、体位改变、昼夜变化及家庭因素等。3 血浆酶的病理性变化主要包括酶合成异常、酶释放增加、酶清除异常等。酶合成异常包括合成减少和合成增多。酶从病变(或损伤)细胞中释放增加是疾病时大多数血清酶增高的主要机制。炎症、缺血、坏死、创伤和肿瘤等是细胞释放大分子酶蛋白的重要原因。此外,血液含抑制物、代谢紊乱、药物、遗传性酶缺陷等原因也可致酶活性下降。4 酶 浓度 测定方法分为绝对定量法和相对定量法两大类。绝对定量法是直接测定酶蛋白量或酶摩尔浓度。相对定量法是根据酶的催化活性或酶促反应
31、速度来间接测定酶浓度的方法。目前临床上所用的方法多属相对定量法。5 在酶活性测定时,如果底物或产物不能直接测定或难于准确测定,可采用酶偶联法测定,即在反应体系中加入一个或几个工具酶,将待测酶生成的某一产物转化为新的可直接测定的产物,当加入酶的反应速度与待测酶反应速度达到平衡时,指示酶的反应速度即代表待测酶的活性 。6 临床同工酶的分析方法有 电泳法、免疫分析法、 色谱法、动力学分析法、蛋白酶水解法。7 体液中酶浓度测定时,要控制的主要影响因素包括标本及标本采集和处理因素、试剂及方法学因素、仪器及操作因素,以及最适测定条件选择与条件的优化。8 测定酶浓度的样本来自不同的组织和器官,但以血清和血浆
32、最为常用,特别是血清,既可避免抗凝剂的影响,又可防止抗凝时因振摇所致的溶血。 临床酶学测定之前,标本的采集、处理与贮存应注意:防止 溶血、合理使用抗凝剂、适宜的温度、减少副反应干扰。此外,采集各种体液样本的器皿质地和洁净度,采血部位,以及血清中过量的胆红素、脂质,样品制备过程中的振摇等,均影响酶活性测定。9 用自动生物化学分析仪测定酶活性,通常采用公式进行计算。当条件固定时, 理论 K 值为常数。 由于仪器等诸多因素的影响, 在临床实际工作中,均需用校准物 定期检查和校正实际测定 K值。10 转氨酶的测定方法有许多种,以往多用比色法如赖氏法( Reitman-Frankel ) 、金氏法( K
33、ing ) 和改良穆氏法( Mohun ) ,其中以赖氏法最常用,由于此法操作简便、经济,一些小型实验室仍在使用。目前,国内外实验室多采用IFCC推荐的连续监测方法对 ALT进行测定。ALT 主要用于肝脏疾病的诊断。 由于肝细胞中 ALT 浓度比血液高约 7000 倍,只要有1/1000 肝细胞中的 ALT 进入血液就足以使血中 ALT 升高 1 倍,故此酶是反映 肝损伤的一个很灵敏指标。 但应特别注意的是,重症肝炎时由于大量肝细胞坏死, 血中 ALT 可仅轻度增高,临终时常明显下降,但胆红素却进行性升高,出现所谓“酶胆分离”现象,常是肝坏死的前兆。11 CK 的测定方法有比色法、紫外分光光度
34、法和荧光法等。由于以磷酸肌酸为底物的逆向反应速度为正向反应速度的6倍,所以采用逆向反应进行测定较为普及。如肌酸显色法和酶偶联法,其中后者最常用,为国内外测定CK 的参考方法。 CK 同工酶 多用电泳和免疫抑制法测定,但两法均会受溶血和巨 CK 的干扰,免疫抑制法还会受到 CK-BB 的干扰。因此现在推荐用免疫化学方法直接测定 CK- MBmass ,可不受溶血和巨 CK 的干扰。 CK 同工酶亚型( CK-MM 亚型 和 CK-MB 亚型 )多用琼脂糖凝胶高压电泳和等电聚焦电泳等。CK 及其同工酶和亚型是目前临床上测定次数最多的酶,主要用于心肌、骨骼肌和脑疾患的诊断和鉴别诊断及预后判断。12
35、ACP 的测定多是利用磷酸苯二钠法和磷酸对硝基酚法等在酸性条件下测定 ACP 。国外多推荐使用磷酸百里酚酞为底物的比色法,因为前列腺ACP 对此底物亲合力高,测定结果基本能反映ACP含量高低。不同方法参考值也不同。此外还可通过用 L- 酒石酸这类抑制剂鉴别和估量 PAP 活性。由于 ACP 不稳定,酶活性测定困难,目前已发展一些免疫学方法特异而灵敏地测定ACP 特别是PAP 。总 ACP 升高可作为前列腺癌、骨疾病或网状内皮系统疾病的诊断指标。13 .临床上测定血液AMY主要用于诊断急性胰腺炎,常在腹痛后 23 h开始升高(也有延至12 h后升高者),多在1224 h 达峰值,25 d恢复正常
36、。 峰 值一般为4 ULN6 ULN ,最高 可达 40 倍。此值愈高,急性胰腺炎的可能性就愈大, 但 高低和疾病预后关系不大,但若持续性升高达数周,常提示胰腺炎有反复,或有并发症发生。尿 AMY约于发病后1224 h开始升高,下降也比血液 AMY 慢,因此在急性胰腺炎后期测定尿AMY 更有价值。唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY 也可升高,但临床表现迥异 ,且主要为 S-AMY 升高,有别于胰腺炎以 P-AMY 升高为主。第三章 血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验一、单项选择题1. 下列物质属于含氮化合物 的是:( )A. 蛋白质B. 氨基酸C. 嘌呤核苷酸D. 嘧啶核苷酸E. 以上都是2.
37、临床上血清总蛋白的首选最方便、最实用的常规方法是: ()A. 凯氏定氮法B. 双缩脲法C. 酚试剂法D. 紫外分光光度法E. 染料结合法3. 正常血清蛋白电泳上显示的宽T区带主要成分是:()A. 转铁蛋白B. 结合珠蛋白C. 免疫球蛋白D. 血 色 素结合蛋白E. 铜蓝蛋白4. 下列血浆蛋白质中哪些 不属于 运输载体类:( )A. 血浆脂蛋白B. 转铁蛋白C. 铜蓝蛋白D. 结合珠蛋白E. a 1 -抗胰蛋白酶5. 下列关于清蛋白说法错误 的是:( )A. 由肝实质细胞合成B. 血浆中含量最多的蛋白质C. 维持血浆胶体渗透压的主要蛋白D. 在血浆中 的 半寿期 1 0dE. 唯一一种不含糖 的
38、血浆蛋白质6. 临床上检测血清蛋白的最常用方法是:( )A. 溴甲酚绿法B. 电泳法C. 免疫扩散法D. 免疫比浊法E. 电化学测定法7. 下列关于a 1-抗胰蛋白酶 说法,错误 的是:()A. 分子量 约 为5 2kDB. 发挥作用时与pH 高低无关C.醋酸纤维素薄膜电泳中位于a1区带D. 主要由肝细胞合成E. 人血浆中主要的丝氨酸蛋白酶的抑制剂8.关于a 2-巨球蛋白,下列说法错误的是:()A. 属于急性时相反应蛋白B. 血 浆中分子量最大的 糖 蛋白C.低清蛋白血症a 2-MG含量可显著增高D.严重的急性胰腺炎时a 2- MG含量降低E. 检测方法主要是免疫比浊法9. 铜蓝蛋白 的功能
39、不包括 :()A. 血浆铜的转运B. 具有铁氧化酶作用C. 抗氧化作用D. 可将大部分Fe 3+ 运输到骨髓,用于 Hb 合成E. 铜的 无 毒性代谢库10. 下列关于C-反应蛋白 说法 错误 的是:()A. 在 钙离子 缺乏情况 下 , 可结合 磷酸胆碱, 卵磷脂和核酸B. 属于典型的急性时相反应蛋白C. 血浆中 CRP 浓度在急性心肌梗死、创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速显著地增高D. 在钙离子存在下, CRP 可 结合多种细 菌 、真菌及原虫等体内的多糖物质E. 电泳迁移率易受如钙离子及缓冲液的成分的 影响11. 下列哪些蛋白属于负性时相反应蛋白?()A. AATB. AAGC
40、. AlbD. CpE. CRP12. 现已阐明肾小管细胞膜上有4 种与氨基酸吸收有关的载体 ,下面哪种 不是? ()A. 中性氨基酸载体B. 酸 性氨基酸载体C. 碱 性氨基酸载体D. 丙 氨酸载体E. 甘氨酸载体13. 苯丙酮酸尿症是由于下列何种酶的缺乏所致?( )A. 酪氨酸羟化酶B. 苯丙氨酸羟化酶C. 多巴脱羧酶D. 酪氨酸酶E. 酪氨酸转氨酶14. 关于 苯丙酮酸尿症 ,下列说法不正确 的是:( )A. 因患儿尿液中排出大量苯丙酮酸等代谢产物而得名B. 原因是 苯丙氨酸 羟化 酶 先天性 缺乏C. 患 儿 还表现有毛发和皮肤色素较正常人略浅D. 可 给予高苯丙氨酸及酪氨酸膳食进行治
41、疗E. 患 儿存在 智力缺陷,其严重程度与血苯丙氨酸升高的水平和持续时间有关15. 白化病是由于下列何种酶的缺乏所致?( )A. 酪氨酸酶B. 酪氨酸羟化酶C. 苯丙氨酸羟化酶D. 色氨酸加氧酶E. 酪氨酸转氨酶16. 下列尿黑酸尿症,说法 错误 的是:( )A. 尿黑酸还原酶缺陷可引起该病B. 因尿 放置后变黑色,因此常会引起注意而被发现C. 目前本症没有满意的治疗方法D. 服用维生素C 可能会减少尿黑酸在体液中含量和在组织中沉积E. 诊断本病的方法是尿黑酸的还原试验17.关于 胱硫醴-伊合酶 缺失 所致的 同型胱氨酸尿症,下列说法 错误 的是:()A.胱硫醴-伊合酶 缺失所致的是 同型胱氨
42、酸尿症 是最常见的原因B. 血浆同型胱氨酸达到可检测水平, Met 水平升高C. N 5 甲基四氢叶酸或其转甲基酶的缺失导致的 同型胱氨酸尿症较罕见D.胱硫醴-伊合酶完全缺失的可用低Met饮食并补充胱氨酸治疗E. 新生儿就会出现症状,因此适合进行新生儿筛选试验18. 关于 核苷酸代谢 ,下列说法错误的 是:( )A. 嘌呤核苷酸最常 见的代谢紊乱是高尿酸血症B. 嘧啶核苷酸从头合成途径中的酶缺陷可引起乳清酸尿症C. 嘌呤和嘧啶核苷酸的合成均包括从头合成和补救合成途径D. 嘌呤核苷酸从头合成途径是先合成嘌呤环再与磷酸核糖相连而成E. 人体因缺乏尿酸酶嘌呤核苷酸的最终分解产物是尿酸19. 关于 尿
43、酸生成过多 的原因,下列说法哪个不正确? ()A. 葡萄糖 -6- 磷酸酶缺乏B. 嘌呤吸收增多C. PRPP 合成酶活性减弱D. 嘌呤分解 过多20. 尿酸 测定的参考方法是:( )A. 磷钨酸还原法B. 尿酸酶 - 过氧化物酶偶联法C. HPLC 法D. 干化学法E. 尿酸酶紫外法二、B 型题(配伍题)问题1-3A 清蛋白 B 前清蛋白 C 结合珠蛋白D. a 1-酸性糖蛋白E. a 1-抗胰蛋白酶1 血浆中主要的载体蛋白2 人血浆中主要的丝氨酸蛋白酶的抑制剂3 活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一问题 4-7A 可以防止 Hb 从肾 脏 丢失8 可将大部分Fe 3+ 运输到骨髓C 铜的 无
44、 毒性代谢库D 将 Fe 3+ 还原 为 Fe 2+E.血浆中分子量最大的糖蛋白4 结合珠蛋白5 . a 2-巨球蛋白6 铜蓝蛋白7 转铁蛋白问题 8-10A 酪氨酸酶 缺乏8 酪氨酸转氨酶缺乏C 苯丙氨酸羟化酶缺乏D .苯丙氨酸还原酶缺乏E.延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性降低8 .苯丙酮酸尿症是由于9 . I型酪氨酸血症是由于10 .II型酪氨酸血症 是由于三、多选题(X型题)1 .醋酸纤维素薄膜电泳一般可将血清蛋白质分为哪几条带?()A.清蛋白B. a 2球蛋白C. B球蛋白球蛋白E.纤维蛋白原2 .下列有关前清蛋白,说法 正确 的是:()A.半寿期仅1.9dB.正性急性时相反应蛋白C.组织修
45、补材料和运载蛋白D.作为营养不良的指标 时,50100mg / L为重度 营养不良E.作为肾功能不全的指标3 .下列关于清蛋白的功能,正确的是:()A.维持血浆胶体渗透压B.作为 血浆中主要的载体蛋白,具有结合各种配体分子的能力C.参与凝血D.具有缓冲酸碱维持酸碱平衡作用E. 具有 营养 作用4. a 1 -酸性糖蛋白是:()A. 血浆中含糖量最高的糖蛋白B. 血浆中酸性最强的糖蛋白C. 活动性溃疡性结肠炎最可靠的指标之一D. 属于急 性时相反应蛋白E. 人血浆中主要的丝氨酸蛋白酶的抑制剂5. 关于 结合珠蛋白 ,说法正确的是:( )A. 急性时相蛋白和转运蛋白B.在醋纤膜电泳及琼脂糖凝胶电泳
46、中位于T区带C. 运输血管内游离的 Hb 到网状内皮细胞降解D. 每分子 Hp 可结合 2 分子 HbE. Hb-Hp 的结合 是 可逆 的6. 关于 Wilson 病 的 说法正确的是:( )A. 属于 常染色体隐性遗传病B. 又称为肝豆状核变性C. 一般不伴有神经系统症状D. 此病是进行性和致命的 ,应 及时治疗E. 铜螯合剂- 青霉胺治疗7. 关于 Wilson 病 的诊断下列说法正确的是:( )A. 血中铜蓝蛋白下降B. 血清游离铜降低C. 血清总铜浓度降低D. 尿铜排泄增加E. 肝中铜含量升高8. 关于 转铁蛋白 说法正确的是:(A. 每分子可结合4 个 Fe 3+B. 主要由肝细胞
47、合成C. 正性急 时相反应 蛋白D. 用于贫血的鉴别诊断E. 作为营养状态的一项指标9. C- 反应蛋白是非特异性指标,在临床上的主要用途是: ()A. 筛选器质性疾病B. 评估炎症性疾病的活动度和疗效监控C. 识别 系统性红斑狼疮、白血病和外科手术后 等 并发的感染D. 监测肾移植后的排斥反应E. 作为营养状态的一项指标10. 以下属于 急性时相反应蛋白 的是:( )A. a 1-抗糜蛋白酶B. 血红素结合蛋白C. a 2- MGD. 纤维蛋白原E. Cp11. 以下属于负性急性时相反应蛋白的是:( )A. AATB. AlbC. C3D. PAE. TRF12. 属于 氨基酸代谢 产物的有
48、:(A. 酮体B. a -酮酸C. CO 2D. 胺类E. NH 313. 氨基酸的分析的三组检验方法是:( )A. 总 氨基酸的分析B. 筛选试验C. 定量试验D. 特异性试验E. 全自动氨基酸分析仪分析法14. 氨基酸分析的筛选试验包括:( )A. 薄层层析B. 尿呈色试验C. Guthrie 试验D. 气相色谱E. HPLC15. 氨基酸分析的定量试验包括:( )A. 毛细管电泳B. 气相色谱C. HPLCD. 串联质谱E. 分子遗传学试验16. 采用酶法测定的氨基酸有:( )A. 苯丙氨酸B. 酪氨酸C. 亮氨酸D. 谷氨酰胺E. 缬氨酸17. 在酶法测定氨基酸的原理中通过检测 340
49、nm 吸光度变化来定量的氨基酸有:( )A. 苯丙氨酸B. 酪氨酸C. 谷氨酰胺D. 亮氨酸E. 异亮氨酸18. 目前国际上进行新生儿 PKU 筛查的常用方法有:( )A. Guthrie 试验B. 荧光光度法C. 苯丙氨酸脱氢酶法D. 色谱法E. PCR-RFLP 法19. 关于 Lesch-Nyhan 综合征的说法正确的是:( )A. 病因是 HGPRT 完全缺乏B.属染色体X-连锁遗传C. 又称 自毁容貌综合征D. 有明显的高尿酸血症E. 仅见男性小儿1 岁内发病20. 关于痛风的叙述正确的是:( )A. 属于一组疾病B. 由遗传性和(或)获得性的尿酸排泄减少和(或)嘌呤代谢障碍所致C.
50、 高尿酸血症合并尿酸性结石 也属于 痛风D. 原 发性痛风患病率女 性高于 男 性E. 可用 别嘌呤醇 治疗四、 名词解释1 血浆蛋白2 急性时相反应蛋白3氨基酸代谢库4 氨基酸血症与氨基酸尿症5 PKU6 痛风五、 问答题1 简述血浆蛋白质的功能。2 试述测定血清铜蓝蛋白的方法及参考值和临床意义。3 简述 低 清蛋白血症的 临床意义 。4 简述转铁蛋白的临床意义。5 简述新生儿 PKU 的诊断方法6 简述高尿酸血症的发病因素。第三章 血浆蛋白质与含氮化合物的生物化学检验参考答案一、单选题1E2B3C4E5D6A7B8A9D10A11C12D13B14D15AB17E18C19C20EB 型题
51、(配伍题)A2E3D4A5EC7B8C9E10B多选题ABCD2AC3ABCE4ABCD5ACDABDE7ACDE8BDE9ABCD10ABDEBDE12ABCDE13BCD14ABC15ABCDEABCDE17ACDE18ABC19ABCDE20ABE名词解释血浆蛋白质它 是 指血浆和组织液中蛋白质,是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能。急性时相反应蛋白 在急性炎症性疾病如手术、创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等, AAT 、AAG、Hp、Cp、CRP,以及a i-抗糜蛋白酶、血红素结合蛋白、C4、C3、纤维蛋白原等,这些血浆蛋白浓度显著升高或升高;而血浆PA、 ALB 、 TRF 则出现相应的低下。这些血浆蛋白质统称为急性时相
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