PCR实验室标准操作规程SOP

1、申报文件一、临床基因扩增检验实验室技术验收申请表二、医疗机构执业许可证复印件三、拟设置基因扩增检验实验室医院的医疗卫生资源状况对临床基因扩增检验的需求情况以及实验室运行的预测分析四、拟设基因扩增检验实验室的设置平面图五、实验室主要负责人简历表六、实验室工作人员一览表七、主要仪器设备表八、拟开展的临床基因诊断项目九、几点说明质量手册一、管理性程序：程序文件的管理和维护 1PCR实验室管理制度 2生物安全准则 4实验室生物防护措施 7实验室传染性废弃物管理制度 9PCR实验室的人员配置及管理制度 12PCR实验室的人员培训计划及措施 14PCR实验记录管理制度 15惠安县医院PCR检验报告单保密制

2、度 17检验结果的传送管理制度 19实验室的清洁制度 20化学试剂的管理程序 22实验室消耗品购买、验收和贮存程序 23新项目审批程序 25仪器设备的管理制度 26仪器设备的使用制度 28仪器设备的标准操作制度 29仪器设备的维护保养程序和制度 31仪器设备的校准制度 34仪器设备发生故障的应急处理制度 35PCR检测的标本管理制度 36二、检测项目操作程序：标本、样本编号唯一性程序 38临床标本的采集、运送和接收程序 39临床标本的保存程序 41临床标本的处理（核酸纯化）程序 42核酸扩增及产物分析检测的标准操作程序 43消毒液的配制程序 45室内质量控制操作程序 46实验室室间质量评价的操

3、作程序 49试剂的质检操作程序 50带滤塞吸头的质检操作程序 52人员流动程序 53抱怨处理程序 54应急处理程序 55生物污染废弃物处理标准操作程序 57乙型肝炎病毒DNA-荧光定量PCR测定 59沙眼衣原体 DNA-荧光 PCR 测定 61结核菌DNA-荧光定量 PCR测定 633、 仪器设备标准操作程序：GeneLight 9800实时跟踪荧光 PCR仪操作程序 66Reactor4800加热仪标准操作程序 67FX 1200-II - B2型生物安全柜操作程序 68SpanStar2418台式高速离心机标准操作程序 70加样器的操作程序 71医用低温冷冻冰箱标准操作程序 73移动紫外灯

4、操作程序 744、 仪器设备维护保养程序GeneLight 9800实时跟踪荧光PCR仪维护保养程序 75Reactor4800器加热仪维护保养程序 76FX 1200-II - B2型生物安全柜维护保养程序 77SpanStar2418台式高速离心机的维护保养程序 78医用低温冷冻冰箱保养程序 79XW-80A型旋涡混合器的保养程序 80移动紫外灯维护保养程序 815、 仪器设备校准程序：GeneLight 9800实时跟踪荧光 PCR仪校准程序 82Reactor4800器加热仪校准程序 83FX 1200-n - B2型生物安全柜校准操作程序 84加样器的校准程序 85SpanStar2

5、418台式高速离心机的校准程序 87温湿度表的校准程序 886、 附相关图表附表001送检标本接收记录表附表002送检标本拒收记录表附表003标本超低温保存及处置记录表附表004室内质量控制登记表附表005试剂验收记录表附表006试剂质检记录表附表007紫外灯强度监测表附表008消耗品验收记录表附表009消耗品质检记录表附表 010 冰箱温度记录表附表 011 PCR 日常工作核查表附表 012 PCR 检验结果记录本附表 013 移动紫外灯消毒记录表附表 014 实验室清洁消毒记录表附表 015 实验室紫外灯消毒记录表附表 016 垃圾处理记录表附表 017 应急处理记录表附表 018 PC

6、R 室间质量控制登记表附表 019 PCR 室内质量控制失控及纠正措施记录表附表 020 PCR 实验室人员培训计划及培训表附表 021 仪器故障处理登记表附表 022 抱怨记录表附表 023 仪器设备维护记录表附表 024 实验室工作人员一览表七、附相关复印件：厦门市安普利生物工程有限公司企业法人营业执照复印件；药品生产企业许可证 、 药品 GMP 证书复印件；乙肝病毒核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒新药证书复印件； 沙眼衣原体核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒新药证书复印件； 结核杆菌核酸扩增（PCR）荧光检测试剂盒新药证书复印件； 乙肝病毒核酸扩增荧光检测试剂盒新药证书及生产批件复印件；沙

7、眼衣原体核酸扩增荧光检测试剂盒新药证书及生产批件复印件；结核杆菌核酸扩增荧光检测试剂盒新药证书及生产批件复印件；检验结果报告样单复印件；临床基因扩增实验室技术人员培训证书复印件；临床基因扩增检验实验室技术验收申请表一、基因扩增检验实验室基本情况实验室所属法人单位名称： 地址： 邮编： 法定代表人： 实验室负责人： 联系人： email ： 电话： 传真： 实验室总人数： 名（其中初级职称人数人员 _名，占 ；中级职称人数人员 名，占 。 ）二、提供资料状况：（1） 医疗机构执业许可证复印件；（2） 拟设置基因扩增检验实验室医院的医疗卫生资源状况、 对临床基因扩增检验的要求情况以及实验室运行的预

8、测分析；（三）拟设基因扩增检验实验室的设置平面图；（四）实验室主要负责人简历表；（五）实验室工作人员一览表；（六）主要仪器设备表；（七）拟开展的临床基因诊断项目；（八）实验室相关程序文件和标准操作程序（SOP） ；（九）检验报告单份；（十）其它相关质量文件名称或证明材料。三、希望验收时间为 2005 年 月 日至 2005 年 月 日。四、声明：本实验室自愿申请卫生部临床检验中心组织的技术验收，并愿承担以下义务：（ 1 ）遵守临床基因扩增实验室管理暂行办法和临床基因诊断实验室工作规范及有关规定；（ 2 ）不论能否获准验收，预付验收阶段所需的全部费用。申请单位法定负责人（签名） 申请单位（盖章）

9、年月日拟设置基因扩增检验实验室医院的医疗卫生资源状况、对临床基因扩增检验的需求情况以及实验室运行的预测分析惠安县医院PCR 实验室平面布置图1cm ： 1.75m附表3实验室重要负责人简历表姓名性别女出生年月1965年1月年龄 41学历学位中专职务职称检验师所学 专业西医毕业 院校_ ,毕业泉州卫校.问1988年7月工作简历：88年8月至今在惠安县医院检验科工作.主要著作及成果实验室工作人员一览表序 号12姓 名性 别女女年 龄4129学历 学位中专职 务职 称检验师检验师所学专业西医临床医学毕业时间1988年7月2000年7月从事本专 业时间18年5年培训合格 证书号FJCCL-P-1512

10、00200251主要仪器设备一览序号仪器设备名称及编号型号规格数量生产厂家购买时间备注存放地点负责人1低温冷冻贮存 箱-40oCZKU-L2001中科生命科技股份 有限公司PCR1.2 区2紫外线消毒车豪华型2福州市医疗器械厂PCR.2.3 区3旋涡混合器XW-80A1上海医大仪器厂PCR2 区4微量加样器2-20U11芬兰雷勃分析仪器 有限公司PCR2 区5微量加样器20-200U11芬兰雷勃分析仪器 有限公司PCR2 区6台式高速离心 机SpanStar24181厦门安普利生物工 程有限公司PCR2 区7生物安全柜FX1200- n-B21上海瑞仰净化装备 有限公司PCR2 区8微量加样器

11、0.5-10ul1芬兰雷勃分析仪器 有限公司PCR2 区9微量加样器5-50ul1芬兰雷勃分析仪器 有限公司PCR2 区10微量加样器20-200U11芬兰雷勃分析仪器 有限公司PCR2 区11微量加热器Reactor48001厦门安普利生物工 程有限公司PCR2 区12实时跟踪荧光PCR仪GeneLight98001厦门安普利生物工 程有限公司PCR3 区附表4拟开展的临床基因扩增检验项目项目方法备注HBV-DNA 检测出PCR法试剂由安普利生物工程 有限公司提供CT-DNA检测出PCR法试剂由安普利生物工程 有限公司提供TB-DNA检测出PCR法试剂由安普利生物工程 有限公司提供几点说明1

12、 . 惠安县医院临床基因扩增实验室质量管理手册由以下部分组成：1.1 管理性程序；1.2 仪器设备标准操作程序；1.3 仪器设备校准程序；1.4 仪器设备维修保养程序；1.5 检测项目操作程序；1.6 相关图表；1.7 相关复印件2 .现有文件编号为临时编号，待科质量体系完成时，将使用与科质量体系要求一致的统一编码取代；3 .文件管理：3.1 现有的文件由PCR实验室主任负责管理；3.2 实验室主任保存全套文件一份3.3 各工作区保存该区使用的文件，以方便工作人员随时使用；4 .文件的有效期；4.1 文件的有效性：文件自科主任签字后即为现行有效文件；4.2 本文件为试运行文件， 通过实际工作的

13、检验、 修改完善后将形成正式的质量体系文件。4.3 正式的第一版质量体系文件将作为科质量体系文件的一部分出现；4.4 试运行文件的修订时间不得超过一年。5 .文件的修改：5.1 作为试运行文件，允许以眉批的方式进行细小的修改；5.2 文件修改最重要的是要维持各工作区文件的现行有效及其与 “保存文件” 的一致性；6 .科质量体系完成时，文件的管理、修改严格按质量体系文件管理要求进行。重要参考资料：1. 临床基因扩增检验实验室管理暂行办法。2. 临床基因扩增检验实验室基本设置标准。3. 临床基因扩增检验实验室工作规范。4. 临床基因扩增检验实验室技术人员培训班资料汇编，卫生部临床检验中心。5. 临

14、床检验及实验室设备。程序文件的管理和维护1 .目的：程序文件是指导临床基因扩增检验活动的法规性文件。本部分确立程序文件的 制定、控制和修改的程序，借此保持程序文件的持续适用性和现行有效性。2 .职责：程序文件由科主任批准和颁布实施，并负责解释。程序文件由基因扩增室负责 人主持编写、修订、审核并保持其现行有效性。3 .编制：程序文件由基因扩增室负责人主持编写，编写中充分与工作人员讨论，编写成 文并校准后交科主任。4 .发放：程序文件由科主任批准发放。发放和回收要登记签字，收回的旧版程序文件应 登记并销毁。保证现场只有唯一的、最新的使用版本。5 .持有者责任：程序文件属内部文件，由基因扩增实验室负

15、责人保管，不得擅自修改、 涂抹，不得遗失、外借和翻印。若意外丢失，应及时报告科主任，并作书面检查，经 核实后方可补发。实验室工作人员要认真学习程序文件、了解内容、熟悉其中各项规 定，并严格执行。程序文件执行情况纳入实验室目标管理，定期考核，与奖惩挂钩。 持有者调离时，要收回该程序文件。6 .内容：程序文件包括版次、批准页、修改页、程序文件的管理和修改、程序文件目录 等。7 .适用范围：临床标本核酸扩增。8 .修改：科室任何工作人员都可提出对程序文件的修改建议，由基因扩增实验室负责人 根据条件变化提出是否修改的决定。文件修改须经有关人员讨论。如果是小的修改， 则可在修改页上进行。修改文件经科主任

16、审核批准后填写程序文件修改页。如果文件 须作重大修改或小的修改超过十项，基因扩增室负责人可进行改版。9 .新版程序文件经科主任批准后起用，并收回旧版，发出新版，同时登记签字。回收的 旧版文件应予以销毁。编写人审核人批准人起用日期2005年9月1日惠安县医院PCR实验室编号：HYJ-06日期：2005年9月1日修订号：第1页，共2页临床基因扩增室管理制度一、目的规范PCR实验管理制度二、适用范围：PCR实验室的管理。三、 相关性文件：福建省临床基因扩增检验实验室技术人员培训班培训教材四、操作步骤：1 .基因扩增室分试剂准备、标本制备、基因扩增分析三个区，样品接受区独立于三区之 外。各区实验物品应

17、有明显的标示，严禁混用。2 .实验室审核人员须有卫生部临检中心或其授权机构颁发的培训上岗证方能进行基因扩 增检测工作。3 .实验室工作人员必须严格按照核酸扩增实验操作程序进行。实验开始前必须先做好实 验室内和工作台的清洁消毒，以及离心管、吸头等一次性用品的高压灭菌处理。4 .工作人员应遵循单项走动的原则：PCR1区 f PCR2区PCR3区。进入每一个区前必须更换有该区相应的不同颜色的工作服和拖鞋。5 .严格遵守室内质控，每批标本进行检测时都必须附上阴、阳性对照，必要时绘制质控 图。实验结束后若对照品结果出现异常时应立即暂扣本次结果，及时寻找原因并加以 纠正后，才能发出报告。6 .非本室工作人

18、员未经允许不得进入基因扩增实验室，工作人员在工作时也不能随意进 出，以免造成不应有的污染。7 .实验结束后应用10%次氯酸钠溶液消毒液消毒实验台面，并以紫外线照射实验室。试 验中使用过的吸头、离心管等应置于 10%次氯酸钠溶液中浸泡消毒后集中焚毁。8 .每天工作必须填写好日常工作核查表，下班前处理好废弃物品，关好水、电和门窗。9 .实验室工作人员必须严格遵守本室一切制度，保证实验室的诚实性。（一）试剂准备室管理制度1 .实验人员进入该区须穿本室专用白色工作服，戴手套，换拖鞋。2 .每天实验开始前用10%次氯酸钠溶液清洁实验台3 .取出当天实验需配制和使用的试剂，其余试剂应立即放回冰箱保存好。4

19、 .试验中使用的离心管、吸头均要高压灭菌处理（在消毒有效期内使用）5 .每日工作结束后必须立即清洁本区。 实验台以10%次氯酸钠消毒后，再以紫外灯照 射2小时；加样器用75%酒精擦洗；房间开紫外灯照射。6 .实验记录使用本室专用的记录本、笔和纸，不得将其它区的用品带入本区。当天实 验开始后不得返回本室。（二）标本处理区管理制度1 .实验人员进入该区须穿本区专用蓝色工作服和专用拖鞋，戴手套。2 .每天实验开始前用10%次氯酸钠溶液清洁实验台。3 .按相应的操作程序提取样品的核酸， 整个过程应使用本室专用灭菌的吸头、 离心管 和吸水纸等。未检测的血清标本保存于-20C。4 .抽提DNA或RNA前，

20、取出经高压灭菌的离心管，编写相应的血清号，认真核对 后做记录。实验记录使用本区专用的记录本、笔和纸，不得将扩增区物品带入本室。5 .使用过的离心管、吸头须经10%次氯酸钠溶液浸泡后，同其它废弃物和患者样品一 起集中焚毁处理。6 .每日工作结束后必须立即清洁本区。 实验台以10%次氯酸钠消毒后，再以紫外灯照 射2小时；加样器用75%酒精擦洗；房间开紫外灯照射。（三）基因扩增分析区管理制度1 .实验人员进入该区须穿本区专用红色工作服和专用拖鞋，戴手套。2 .每天实验开始前用10%次氯酸钠溶液清洁实验台。3 .按照实验要求选择相应扩增仪和程序进行样品扩增。4 .实验结束后及时清理扩增仪内的样品板，装

21、入密封的袋中焚毁处理。5.每日工作结束后必须立即清洁本区。 实验台以10%次氯酸钠消毒后，再以紫外灯照 射2小时；加样器用75%酒精擦洗；房间开紫外灯照射。编写人审核人批准人起用日期2005年9月1日编号：HYJ-06惠安县医院日期：2005年9月1日PCR实验室修订号：第1页，共3页生物安全准则本标准旨在规范临床实验室的安全管理，内容着重在实验室和工作人员安全的一般要求，防火、用电、化学危险物品、微生物的安全要求，以保证实验室的安全运作，将事故控制在最低限度。为各级临床实验室的安全管理提供依据。一、工作人员和实验室安全的一般要求1、实验室工作区内绝对禁止吸烟。2、实验工作区内不得有食物、饮料

22、及存在“手口 ”接触可能的其它物质。实验室工作区内的冰箱禁止存放食物。3、实验工作区内禁止使用化妆品进行化妆。4、处理腐蚀性或毒性物质时，须使用安全镜、面罩或其它保护眼睛和面部的防护用品。工作人员在实验室的危险区内不要佩戴隐形眼镜，除非同时使用护目镜或面罩。使用、处理能够通过粘膜和皮肤感染的试剂，或有可能发生试剂溅溢的情况时，必须佩带护目镜、面罩或面具式呼吸器。5、所有人员在实验区内必须穿着遮盖前身的长袖隔离服或长袖长身的工作服。当工作中有危险物喷溅到身上的可能时，应使用一次性塑料围裙或防渗外罩。有时还需要佩戴其它防护装备如： 手套、 护目镜、 披肩或面罩等。 不得在实验室内设值班床，严禁在实

23、验室内住宿。6、留长发的工作人员应将头发盘在脑后，以防止头发接触到被污染物和避免人体脱屑落入工作区。蓄有胡须的男性工作人员必须遵守这项。7、实验室工作人员在脱下手套后、离开实验室前、接触患者前后、以及在进食或吸烟前都应该洗手。接触血液、体液或其它污染物时，应立即洗手。8、谨慎处理针头、解剖刀、和碎玻璃等锐利物品。使用后的针具不要折断、弯曲、破损、重复使用或用手重装在针管上。一次性注射器上的针头用后不要取下。锐利物品应立即放置在不易刺破的容器内， 在完全装满之前就应及时丢弃。 接触患者时，实验室工作人员应遵守医院的隔离措施。9、外衣（实验服、工作服、和围裙）应悬挂在远离散热器、蒸汽管道、供暖装置

24、、以及有明火的地方，不要挂在压缩气瓶或灭火器上，也不要挂在门的玻璃隔板上，妨碍视线。 “清洁 ”的和 “非清洁 ”的个人防护服要分开存放。10、实验室的出口和通道必须保持畅通无阻，不准堆放物品、垃圾、装置、或设备。安全门必须保持畅通，不得堵塞。防火门前不能堆物，以确保失火时能够自动关闭。二、实验室用电安全准则1、作为仪器维护措施的一部分，应进行年度的安全用电检查并建立档案记录。实验室应装有足够的插座，分布要合理，以减少在插座上接上其它多用插座和避免拖拉过多的电线。2、所有电器设备的维修与维护只能由取得正式资格的维修人员进行。3、 化学危险物品使用准则临床化学实验室存有许多腐蚀性、毒性、易燃和不

25、稳定试剂，属化学危险物品。实验室工作使用化学危险物品，应向有关机构备案，并遵守相应管理规定。所有化学危险物品的容器都应有清晰标记。目前，广泛应用配制好的试剂和试剂盒，致使有些化学危险物品不易被识别，对这些试剂和试剂盒的成份应予复审并给予适当标记。实验室管理人员有责任向工作人员介绍化学危险物品。每一种化学危险物品应有材料安全数据表显示它的特性。实验室技术人员有责任熟悉并向同事介绍化学危险物品和遵照安全操作。1、每个实验室都应负责日常的清污工作。在结束常规工作时、工作交班、发生紧急事件如清除溅溢物后，都需要进行清污工作。2、所有废弃化学物品都应按危险物品处理，除非能够确定它们的性质。清洁溅溢有害物

26、质的所用材料，包括吸附物和中和物，都被认为是有害废弃物。3、实验室应指定专人协调和负责处理实验室有害化学废弃物。4、化学废弃物应放置在密闭、有盖的容器中。5、化学废弃物的包装应有标签，标签应包含以下内容：6、实验室应指定专责人员负责容器转运，并将其放置在指定的废弃物堆放场所。4、 实验室微生物安全准则在临床实验室，工作人员在接触标本和操作过程中，可能被感染。临床实验室可能接触的微生物可分为三类：病毒、细菌、其他具有高毒力的病原体，如出血热病毒和立克次体。因为从病史和体检不能可靠地鉴定所有病人的病原体，所以当接触和处理所有的体液时，均应执行 “常规预防措施”。1、 所有的单位都应执行 “常规预防

27、措施” 。 另外， 每个实验室都应确定每个职员工作岗位的潜接触的程度。一旦确定有接触潜在感染原的可能，应采取硬件控制和操作过程控制，以减少或消除接触这些潜在感染原的可能。各单位应提供相应的个人 防护装备，如手套、工作服、实验服、面罩、面具、护目镜、安全镜和鞋套等。并讲解何时使用和如何使用。2、来自所有病人的血液和体液都被认为是具有传染性的。所有血液和体液的标本都 应放置于具有安全盖的结构优良的容器里，以防在运输过程中发生泄漏。采集标 本时应防止污染容器的外表或随标本的检验单。如果存在潜在的或实际的污染， 则应再加一层包装（例如：包装袋）。所有的标本应加上生物危害标签。所有处理 血液和体液（例如

28、：取下真空试管的塞子）的工作人员都应戴上手套。如果有可 能发生血液或体液的喷溅，则应使用面部防护装备。3、血液或其他体液发生泄漏或工作结束后及，均应使用合适的化学杀菌剂对实验室 工作区进行表面消毒。可使用新鲜配制的漂白粉溶液（次氯酸钠1:10稀释液）和2.5%甲酚溶液或其它有效的溶液对所有的工作台进行消毒。漂白剂溶液应至少作 用15分钟，使用其它的消毒剂可参考其产品说明书。4、手或其他部位皮肤接触血液或其他体液后必须立即彻底清洗。在实验工作结束后 或取下手套后应立即洗手。在离开实验室之前应脱下所有的个人防护装备。5、必须采用通用的警告标志系统明确标识装有危险生物制品的容器或被其污染的物 品，在

29、危险废弃物的容器、存放血液和其它有潜在传染性物品的冰箱、以及处理 尖锐物品的容器上，所贴的标签应标明通用的生物危害标志。6、生物安全橱是微生物实验室里控制生物危害的最好的方式之一。实验室应制定安 全橱的维护规程，以确保安全橱内合适的气流流速，并适时更换滤器。安全橱的放 置应远离气流不稳定的地方，通风口的设置应根据产品说明书。在维护、移动和使 用或处理安全橱之前必须对生物安全橱进行消毒。编写人惠安具疾除审核人编p日期:HJ-起用日期PCR 实!1佥室修订第1卜：页，共2页2005年9月1日实验室生物防护措施、目的：规范实验室防护措施、适用范围:PC R实验室的生物防护措施三、相关性文件：福建省临

30、床基因扩增检验实验室技术人员培训班培训教材四、具体内容：实验室生物安全防护 biosafety protection for laboratories1：实验室工作人员所处理的实验对象含有致病的微生物及其毒素时，通过在实验室设计建造、使用个体防护设置、严格遵从标准化的工作及操作程序和规程等方面采取综合措施，确保实验室工作人员不受实验对象侵染，确保周围环境有受其污染。操作注意事项：1、 当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害， 必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。2、 在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服

31、。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。3、 当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套，如有伤口应先立即用10%次氯酸钠消毒受污染部位。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。4、 所有涉及感染性材料的操作应在生物安全柜中进行。当这类操作不得不在生物安全柜外进行时，必须采用个体防护与使用物理抑制设备的综合防护措施。5、 在二级以上的生物安全防护实验室的入口明显位置处必须贴有生物危险标志，并标明级别，所有盛装传染

32、性物质的容器表面明显位置处必须贴有生物危险标准，并按所在生物安全防护实验室的级别标明相同的级别。编写人审核人批准人起用日期2005年9月1日编号：HYJ-06惠安县医院日期：2005年9月1日PCR实验室修订号：第1页，共3页实验室传染性废物管理程序、目的：为防止实验室废弃物对环境造成污染。、适用范围：主要适用于实验室扩增前、扩增后的废弃物处理。、相关性文件：临床基因扩增检验实验室工作规范全国临床检验操作规程安普利仪器使用说明书福建省临床基因扩增检验实验室技术人员培训班培训教材四、传染性废物管理程序：实验室应按以下内容制定和完成传染性废物的管理程序：1.1 指定专人负责和协调传染性废物的管理。

33、1.2 确定传染性废物的产生地并确定废物的成份及数量。1.3 建立隔离、包装、转运、保存和处置程序。1.4 有关操作要求文件化，要有记录。2 传染性废物的操作2.1 隔离有关单位必须对实验室可能产生的传染性废物加以确定，并采取安全、有效、经济的隔离和处理方法。必须由专业人员严格区分传染性和非传染性废物，一旦分开后，传染性废物必须加以隔离。2.2 锐利物锐利物品包括针、刀和任何可以穿破聚乙烯包装袋的物品。实验室应尽量减少使用可生成锐利物的用品。采用有皱的包装材料包装易碎的玻璃和塑料制品，在包装中同时加入吸附性材料。针或刀应保存在有明显标记、防泄漏、防刺破的容器内。2.3 标签已经确认的传染性废物

34、应分类丢入垃圾袋， 所有收集传染性废物的容器都应有''生物危害 ''标志，使用红色或黄色容器。装有锐利物品的容器在任何时候都应有''生物危害''标志。所有运输未经处理的传染性废料的容器上都应有''生物危害''标志。2.4 包装所有的传染性废物都必须进行包装，并应依据废物的性质及数量选用适合的包装材料。应使用红色或桔黄色聚乙烯或聚丙烯包装袋，并应标记有传染性物品。有液体的传染性废料时，应确保容器无泄漏。3 传染性废物的处置传染性废物的处置即减少或限制其潜在致病性的过程，灭菌和焚烧是最常用的处置方法。处

35、置的主要目的是去除污染，使病源体数量减少到致病水平以下。3.1 压力蒸气灭菌：传染性实验室废物、设备和玻璃器皿均可通过压力蒸气灭菌去除污染去除污染。至少每月应使用一次生物指示剂（如： Bacillus stearothermophilus 孢子）监测处理效果。处理过程应保证在121c进行（被处理物中心温度不低于115C）,时间6090分钟（不少于 20 分钟） 。3.2 干热处理：由于不使用蒸气而需要更长的加热时间和更高的温度以达到去除污染的目的。必须对要处理的废物进行标准化分类，以适应不同物体的导热特性。3.3 气体灭菌：使用化学蒸气如环氧乙烷也可达到灭菌效果，但费用较高，常用于不可进行压力

36、消毒的器械或物品，并应确保传染性废物能充分暴露于化学蒸气中，且持续一定的时间。3.4 化学消毒：适用于处理液体废物和物体表面，对表面无孔和无吸附作用的废物，消毒效果较好。常用的化学消毒剂有酸、碱、醛、乙醇、过氧乙酸、H2O2 等。消毒方法应根据污染物种类、污染程度、蛋白含量等确定使用化学消毒剂的种类、浓度及消毒时间。4 传染性废物的贮存传染性废料的贮存地应有''生物危险 ''标志和进入管理限制，且应位于产生废物的实验室附近。传染性废物的贮存还应满足以下要求：4.1 保证包装内容物不暴露于空气和受潮；4.2 保存温度及时间应使保存物无腐败发生，必要时，可用低温保存

37、，以防微生物生长和产生异味；4.3 贮存地及包装应确保内容物不成为鼠类或其他生物的食物来源；4.4 贮存地不得对公众开放。5 传染性废物的转运运输工具应有明显的标记和防泄漏设备。在处理、运输、装卸过程中应确保传染性废物的包装完好，一般不得使用机械进行装卸。长途运输应请专业人员进行操作。6 传染性废物的处理6.1 填埋：应在指定的地点进行。6.2 焚烧：可使生物活性灭活90%以上，可用于所有种类的传染性废物。对空气的污染指标应符合有关规定。6.3 卫生间排水道： 得到有关部门许可后， 对少量的血液或体液废物可注入卫生间下水道，同时放水冲洗。处理大量废物时，工作人员应有防护措施。倾倒传染性废物的下

38、水道不得用于洗手。微生物培养基不得倒入卫生间下水道。7 紧急情况的处理实验室应有针对传染物泄漏、工作人员受伤及处理过程故障的解决计划。7.1 泄漏或溢出：对泄漏物去除污染的方法应可在工作台边查到，且应包含以下内容：7.1.1 对有致命微生物和剧毒材料的实验室，应设紧急疏散出口和必要的医疗救护设施；7.1.2 泄漏物性质和范围的评估；7.1.3 为去除污染的工作人员提供防护装备；7.1.4 完善的去污染工作程序及消毒剂选择程序；7.1.5 洗手及其他卫生防护程序。7.2 人员受伤：实验室应有书面文件规定工作人员受伤或受污染时的处理办法，包括紧急 处理、通知程序、体检和随访程序。应使所有工作人员知

39、道在受伤或受污染后的处理程序编写人惠安县医院审核人编号:HYJ-06日期：200堆虱9月1日修订号起用日期PCR：实验室第1页，共2页2005年9月1日PC读验室的人员配置及管理1 .目的：具有主观能动性的人力资源是实验室出具高质量检验报告的必要条件.为保证实验室具备足够数量的称职的工作人员，特制订本程序。2 .范围：PCR实验室的人员配置、培训及管理。职责：本程序由实验室主任在科质量负责人的监督、配合下负责实施。3 .工作流程：一）人员要求：1、鉴于PCR检测干扰因素较多，结果分析复杂，其应用需要与临床充分沟通.因此，PCR实验室工作人员应具备检验专业中专以上学历、具有 5年以上工作经验 并

40、掌握相关学科知识及应用能力（实验技能、分析能力、沟通能力）；2、PCR实验室工作人员应取得上岗培训合格证书；1）临床PCR检验过程须在具培训合格证书的技术人员监督指导下完成；2）临床PCR检验报告须由具培训合格证书的技术人员审核鉴发；3）实验室所有工作人员在条件许可时，应在最短时间内获得上岗培训合格证书；4） 工作人员上岗前必须学习掌握PCR 实验室管理文件及要求，并由实验室主任核查。2） 人员配置：实验室根据工作开展情况配备足够数量的工作人员。目前，实验室由实验室主任，资深检验技师组成，其中：1、实验室主任负责实验室全面管理、技术指导、解决与临床沟通及技术疑问题. 实验室主任不在岗时，应指定

41、代理人负责；2、资深检验技师负责实验室日常工作的管理，负责实验室技术管理及临床标本的检验；3、青年技师参与临床的检验，负责辅助性工作的完成，在资深人员的指导下负责实验室的日常维护等工作。3） 人员培训：1、实验室主任（或其指定代理人）每年必须参加部中心 PCR室间质评总结会议；2、根据 PCR 临床检验的发展动态，在有条件的基础上资深技术人员每年1-2 次参加有关技术进展或临床应用的国家级继续医学教育项目；3、青年技师在最短时间内，在有条件情况下，完成上岗培训，取得上岗培训合格证书；4、自学及考核：室主任督促指导工作人员通过自学提高业务素质，具体工作人员在主任指导下，根据自身情况，每年完成一篇

42、学术论文或综述或经验总结提交室主任。室主任以此为主要依据考评技术人员及其进展是否合格满意。4） 技术人员档案每两年修正补充一次。附表020PCR 实验室人员培训计划及培训表附表024实验室工作人员一览表编号 HYJ-06编写人惠安县PCR医院审核人1文七室日期：200K9月1日 修订号：“1IIJJ. IIIJU U起用日期第1页，共1页2005 4 9 月 1 日PC读验室人员培训计划与措施1 .目的：保证实验室工作人员的专业知识及时更新，提高技术水平。2 .适用范围：从事分子生物工作的检验人员。3 .职责：分子生物检验室派出工作人员学习、参加培训。该计划每年或必要时更新。4 .计划4.1

43、分子生物检验室派出 12名工作人员参加卫生部国家认可执证上岗人员再培训 （目前已有3名工作人员获得了上岗证）。4.2 每年派出1名工作人员进行短期培训（10天以内）。4.3 每季度举行一次PCR实验室工作人员学习探讨会，并邀请上级医院PCR专家参与指导解答工作中存在问题。4.4 经常组织工作人员上网或通过学习材料获取最新的PCR发展动态及工作中的注意事项。4.5 对没取得上岗证的工作人员，应由已取得证书的工作人员认真的进行指导，对其 讲解各种注意事项及操作方法，但主要操作由已取得培训证书的工作人员进行。5 .措施：5.1 目前在岗工作人员每月进行一次业务学习5.2 每月举行疑难技术问题讨论和总

44、结。5.3 每年对在岗人员进行理论和实验操作考试，记入业务档案5.4 要求实验室工作人员每年向室主任递交一篇专业论文。6 .归档：注重学习记录和讨论会材料的收集整理，将所有学习培训计划及实施方案归档，并 做出讨论研究，从而制订下一年的培训计划。编写人审核人编士n甘H HYJ-06t 人口 . cccu Zir C 口 4 口起用日期惠安县医PCR元实验室修）2: 2005 牛 9 刀 1 口号：2005年9月1日第1贝，共2贝实验室记录管理制度1 .目的：实验室记录是实验室质量证明资料及质量体系运作的重要组成部分，记录必须 真实完整地反映进行状态，并进行有效的规范化管理。2 .范围：记录范围涉

45、及实验室活动的各个环节，与质量体系运行直接相关。主要包括样 本信息、试剂采购和配制记录、实验操作记录、仪器使用和仪器维修保养记录、各区 温度和湿度、各区人员流动记录、冰箱温度、室内清洁、抱怨处理、加样器校准、温 度计校准、仪器校准、室内质控等纪录。3 .职责：基因扩增室工作人员应及时完整地填写记录，并保证质量。4 .程序：4.1 记录的管理4.1.1 记录分为书面记录和电子记录。4.1.2 记录由基因扩增室负责人每月收集一次，年底交科主任归档保管。4.1.3 所有的记录和报告都应长期保存，并为被检者保密，不得擅自向任何单位和个人透 略。4.1.4 记录是实验室的资料，不能为个人所有，应交科主任

46、统一归档保存。4.2 记录制度4.2.1 记录要完整、真实，按各项表格内容认真填写，不能空行，所有记录要有签名。4.2.2 数据不允许随意更改。若要更改，只许杠改，正确数据在上面，不能使用铅笔和涂 改液。4.2.3 检测报告由检测人员填写、审核人员审核签字后发出。5 应用的文件及表格5.1 接受标本登记表（放在接受标本的区域）5.2 拒收标本记录表（放在接受标本的区域）5.3 实验室环境温度、湿度记录表（ PCR 日常工作核查表）5.4 冰箱温度记录表（标本接受区、试验准备区和标本制备区各一本）5.5 实验室准备记录本（ PCR 日常工作核查表）5.6 检验过程记录本（ PCR 日常工作核查表

47、）5.7 检验结果记录本（放在分析区）5.8 清洁消毒处理记录本（三个试验区域各一本）5.9 SOP文件（三个试验区域各一本）5.10 文件柜的文件及表格包括：SOP文件、实验室工作制度、工作人员档案、人员培训计划及记录表、 仪器设备校准记录表、 标本超低温保存及处置记录表、 室间质控记录表、室内质控记录表、 应急处理登记表、 抱怨记录表、 试剂购买记录表、 试剂验收记录表、耗材购买记录表、 耗材验收记录表、 移动紫外灯消毒记录本、 实验室清洁消毒记录本、实验室紫外灯消毒记录本、垃圾处理记录本、仪器故障处理登记本编写人惠安县医院审核人编号：HYJ-06日期：20059月1日 祐w 丁旦.起用日

48、期PcF:头驯至第1页，共2页2005年9月1日惠安县医院PCR佥验报告单保密制度1 .目的：规范PCR检验报告单发放、保密管理制度。2 .范围：PCR实验室临床标本检验报告发放。3 .相关性文件：省临床基因扩增检验实验室技术人员培训班培训教材4 .内容：职责：工作人员对检验过程中获得的保密信息和本室内部的保密信息保密，并做好文 件资料、样品和记录的保密工作。1、须保密的内容包括以下方面：a.病员申请检验时提交的有关信息资料；b.检验过程中获得的病员要求保密的信息资料；c.检验工作中的各项原始数据和检验结果；d.本室业务数据；e.上级管理部门规定的保密信息等。2、未经病员同意，本室工作人员不得

49、将上一条中的 a.b.c条款的内容泄露给第三方；未经 主任同意不得将上一条中 d.条款的信息泄露；未经上级主管部门同意不得泄露上一条 中e条款内容。3、检测的记录不得随意放置，应妥善保管，以防无关人员了解检测信息。4、检验，结果未经审核，检验人员不得事先通知病员。5、本室报告只发给有凭证者，未经病员同意及主任批准不得复印外传。6、未经主任同意，外部人员不得调阅已有的检验记录、质量记录。7、对本室人员进行保密教育，室负责人有责任保证程序各条款的有效性。8、对违反本程序的人员，根据实际情况进行相应的处理。9、经确认本室人员有违反本程序规定的现象或行为，应迅速采取措施，使造成的影响及损失降低到最小程

50、度，以防止类似事件再发生。编写人审核人批准人起用日期2005年9月1日惠安县医院PCR实验室编号：HYJ-06日期：2005年9月1日修订号：第1页，共1页果的传送管理制度一、目的：保证将检验结果及时准确的发给患者。二、适用范围：对检验结果的获取有特殊要求（电话、传真等方式）的受检人员。三、职责：分子生物检验室的工作人员应及时准确的发出检验结果，并有责任为患者查询或传送 检验结果。四、工作程序：1 .患者一般凭取报告单凭证领取结果报告单。2 .需要电话查询结果的，在取样时将电话和查询时间和取报告单凭证留给被检测者。3 .接到查询电话时，核对姓名、性别年龄和取单凭证的单号，准确无误时方可发出口

51、头结果，同时提醒患者方便时到取单处取报告单结果，实验结果以发出的结果报告 单为准。4 .如患者需要邮寄检测结果，可在接收样本时，提供一份详细通信地址并登记，检测 报告以挂号的方式寄出。5 . 一般情况不提供电子、传真报告。特殊情况时可为患者提供传真服务，患者取样时将传 真号码留下，由实验室工作人员将结果传真给患者。编写人审核人批准人起用日期2005年9月1日惠安县医院PCR实验室编号：HYJ-06日期：2005年9月1日修订号：第1页，共2页实验室的清洁制度一、目的：为有效避免污染出现，制定防污染的措施，预防污染的发生。二、适用范围：主要用于防止实验室扩增前、后的产物造成的污染。三、相关性文件

52、：临床基因扩增检验实验室工作规范全国临床检验操作规程安普利仪器使用说明书福建省临床基因扩增检验实验室技术人员培训班培训教材四、具体操作：1、明确主要污染源：PCR片段污染；天然基因组DNA污染；试剂污染；以及交叉污染, 其中唯有试剂污染与实验室环境无关，其他均与实验室环境有密切相关。2、范围：要做好实验室的清洁，须从实验室布局、实验室人员、实验室清理等方面综合 考虑。3、实验室布局：1）、实验室的设置必须考虑空气的流向和人员行走的路线，PCR实验流程是单一方向的，不能反向行走，且进入下一个操作区应更换工作服和一次性手套。2）各实验区的仪器设备要各区专用，不能公用，尤其是加样器。4、实验室清理：

53、1）实验前，使用移动紫外灯调至60-90cm内照射30分钟.如有需要可延长照射时间。各实验区物品必须在使用前高温高压灭菌，不能受高温高压的用弱酸弱碱浸泡。2）实验后，由相关人员分别在试剂准备区、标本处理区、扩增区用各区专用工具以10%次氯酸钠擦洗地面和工作台面及加样枪.每区均有专用拖把和抹布。实验台面日常清洁时使用75%的酒精擦拭。地板：第一遍由外往里拖，第二遍由里往外拖，用拖把浸泡10%次氯酸钠溶液后将各工作区域拖擦干净。特殊处理：若某区域被明显污染如标本打翻、泼溅于表面，应立即用10%次氯酸钠溶液浸过污染物表面，消毒1小时后，再擦干净。4）将废液缸内倒入10%次氯酸钠。5）待实验结束后将浸泡在废液缸内的离