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文档简介
1、细胞工程1、知识网络生物膜系统细胞工程植物细胞工程动物细胞工程细胞全能性植物组织培养植物体细胞杂交动物细胞培养性单克隆抗体动物细胞融合2、本单元分课时复习方案基础过关第一节 生物膜系统一、各种膜在结构、功能上的联系(一)生物膜:细胞膜、核膜、内质网、高尔基体、线粒体等细胞器都由膜构成,这些膜的化学成分相似,基本结构大致相同,统称为生物膜。(化学成分注意各种膜中蛋白质与脂类的含量)(二)联系1.结构联系(1)直接:内质网与核膜、细胞膜相连,与线粒体膜也存在一定联系(代谢旺盛时,内质网与线粒体相连)。(2)间接:相关生物膜间通过小泡相互转化内质网高尔基体细胞膜(反向也成立)2功能联系功能:蛋白质较
2、成熟的蛋白质成熟蛋白质特定功能的蛋白质翻译 加工 加工 分泌结构:核糖体 内质网 高尔基体 细胞膜(注意:内质网内的加工包括折叠、组装和加上一些糖基团等)二、生物膜系统(一)概念:细胞膜、核膜以及内质网、高尔基体、线粒体等由膜围绕而成的细胞器,在结构和功能上是紧密联系的统一整体,它们形成的结构体系,叫做细胞的生物膜系统。(二)功能 1 细胞膜不仅使细胞具有一个相对稳定的内环境,同时在细胞与环境之间进行物质运输、能量交换和信息传递的过程中也起决定性作用2 细胞内广阔的膜面积为酶提供了大量的附着位点,有利于化学反应的顺利进行3 各种生物膜把细胞分隔成一个个小区室,使得细胞内能够同时进行多种化学反应
3、,不会相互干扰,保证了细胞生命活动高效、有序地进行三、研究生物膜的意义(一)理论上:有助于阐明细胞的生命活动规律(二)实践中:1 农业:研究农作物的抗寒、抗旱、耐盐的机理,寻找改善农作物品质的新途径。2 工业:模拟生物膜,用于海水淡化和污水处理等3 医学:用人工合成的膜材料,代替人体的病变器官行使正常的生理功能。(如人工肾中的血液透析膜等)细胞工程:应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程学手段,在细胞整体水平或细胞器水平上,按照人休养的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。第二节 细胞工程一、细胞的全能性(细胞工程的理论基础)(一)概念:生物体的细胞具有使后
4、代细胞形成完整个体的潜能,细胞的这种特性叫做细胞的全能性。(二)表达 受精卵的全能性最高1生物体内 卵细胞也具有较高的潜在全能性(另:植物花粉或精子) 体细胞的全能性较低(含有该物种特有的全套遗传物质,理论上也具全能性。但在生物体内,特定的时间、空间使体细胞只能表达特定的基因,因而全能性难以表现。)2生物体外:离体的植物细胞,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。3全能性比较(1)受精卵>卵细胞(花粉、精子)>体细胞(2)植物体细胞>动物体细胞(3)未分化或分化程度低的细胞>分化程度高的体细胞二、植物的组织培养(一)概念:愈
5、伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间后,通过细胞分裂形成的排列疏松无规则,高度液泡化的呈无定形状态的薄壁组织。(分化程度低、全能性较高)脱分化:高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的脱分化。再分化:脱分产生的愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官,这个过程叫再分化。(二)过程离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织根、芽植物体(形成愈伤组织之前不需光,而后一般需光;CO2也是这样)(三)植物组织培养基的成分:矿质元素(或无机盐)、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加剂(四)应用:提取紫草素(愈伤组织只进行传代培养,不使其再分化)、制造人工种子等三、植物体细胞杂交
6、(一)概念:用两个来源于不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,并且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。 去掉细胞壁,分离出有活力的原生质体 分离 方法:用纤维素酶和果胶酶(二)过程 原生质体的融合 融合 物理法:离心、振动、电刺激(重压不行) 方法 化学法:聚乙二醇等 诱发(新壁) 植物组织培养:获得杂种植株。(与动物细胞融合的区别)(三)意义和成果:意义:克服远缘杂交不亲和的障碍、大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。成果:“番茄马铃薯”等四、动物细胞培养(一)培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清(与植物组织培养基的区别) 取材:动物胚胎细胞或出生不久的幼龄动物的器官或组织 分离
7、细胞 方法:用胰蛋白酶(二)过程 原代培养传代培养 10代左右细胞株:40-50代细胞系:无限传代(部分遗传物质发生了改变,具癌变特点)(三)应用:1 生产有重要价值的蛋白质生物制品2 培养用于移植的组织或器官3 检测有毒物质4 进行生理、病理研究,为治疗和预防疾病提供理论依据五、动物细胞融合(一) 与植物体细胞杂交的比较1 相同:动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的,诱导融合的方法类似。(如都可用聚乙二醇PEG)2 不同(1) 物体细胞杂交在植物原生质体融合后,还有把杂种体细胞培育成新个体这一步骤。而动物细胞融合则无这一步。(2) 动物细胞融合常用灭活的病毒。(二)最重要的用途制
8、备单克隆抗体六、单克隆抗体(一)与血清抗体的区别单克隆抗体:由单个B细胞通过无性繁殖(克隆)形成细胞群,由它们产生出化学性质单一,特异性强的抗体。血清抗体:从动物血清中分离所得的抗体,产量低、特异性差、纯度低,反应不够灵敏。(二)制备小鼠脾脏B淋巴细胞+小鼠的骨髓瘤细胞(经过免疫、效应) 灭活病毒或PEG(融合后有个筛选问题,剔除相同细胞的融合细胞) 具效应B淋巴细胞分泌特异性抗体的能力杂交瘤细胞 具骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力挑选出能产生特定抗体的细胞群、继续培养(用选择培养基选出能产生单克隆抗体的)体内或体外培养单克隆抗体(三)应用1 对理论研究有重要意义2 实践中的应用:疾病
9、的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,优越性非常明显。(治疗癌症的“生物导弹”)考点分析1.细胞的生物膜系统真核细胞有一个复杂的膜系统,各种细胞器的膜和核膜、细胞膜在分子结构上都是一样的,它们统称为生物膜。真核生物的生物膜约占细胞干重的7080,最多的是内质网膜。生物膜主要由磷脂和蛋白质分子组成,其基本骨架为磷脂双分子层,蛋白质分子覆盖、贯穿或镶嵌在磷脂双分子层中。生物膜不是固定不变的,而是经常处于动态变化之中,磷脂双分子层具有一定的流动性,其磷脂类分子可以自由地移动,蛋白质分子也可以在磷脂双分子层中移动。其中需要注意的是内质网膜,它向外与细胞膜相连,向内与核膜的外膜相通
10、,形成细胞内的管道运输系统。生物膜在结构和功能上是密切联系的,可用如下的图示表示:(1)生物膜在结构上的联系(2)生物膜在功能上的联系(以分泌蛋白的合成为例)2.原生质体和动物细胞的融合过程原生质体和动物细胞的融合过程,包括细胞膜融合、细胞核融合。在这里,细胞膜融合是细胞核融合的先导,没有细胞膜的融合就没有细胞核的融合。但是,细胞膜不会无缘无故地发生融合,必须经过诱导。所用的诱导方法包括物理方法和化学方法。诱导能使原生质体或动物细胞紧密的接触,从而发生细胞膜的融合。动物细胞膜融合所用的诱导剂还有灭活的病毒,其实是病毒感染的一种应用。在低温状态下,细胞发生集聚,在两个细胞间的病毒会同时感染两个细
11、胞,使两个相邻细胞之间有了一个通道,细胞膜的融合就开始了。3如何理解细胞的全能性?细胞全能性是指已经分化的细胞,仍然具有发育的潜能,大量科学实验证明,高度分化的植物细胞仍然有发育为完整植株的能力。例如,1958年曾有美国科学家将胡萝卜韧皮部的一些细胞进行培养,而最终发育成完整的新植物,体现了细胞的全能性。 细胞全能性的原因是,由于体细胞一般是通过有丝分裂繁殖而来的,一般已分化的细胞都有一整套和受精卵相同的染色体,携带有本物种相同的DNA分子。因此,分化的细胞具有发育成完整新个体的潜能。在合适的条件下,有些分化的细胞具有恢复分裂、重新分化发育成完整新个体的能力。 高度特化的动物细胞,从整个细胞来
12、说,它的细胞全能性受到限制,主要是细胞质内的遗传物质有所变化,但是它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为细胞核内含有保持物种遗传性所需要的全套遗传物质。 可以说,任何一个具有完整结构的体细胞都可以在一定条件下发育成一个完整的生物体的能力。现代克隆技术的理论基础就是细胞的全能性。4植物细胞体现出全能性需要那些条件?植物体内的生活细胞尽管具有全能性,但受基因选择性表达的调控,一般要进行定向的、不可逆转的分化,因此全能性不能表现出来。当已发生分化的细胞处于离体状态,且环境条件适合(营养物质、激素、温度),这时方可进行脱分化而表现出全能性,发育成完整的植株。3植物体细胞杂交与动物细胞融合有何区别?植物体
13、细胞杂交是用两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞,并且把杂种细胞培育成新植物体的方法。从这句话可以看出,植物体细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成新的植物体结束。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是相同的,诱导融合的方法类似,动物细胞的融合还常常用到灭活的病毒作为诱导剂。植物体细胞杂交的一项重要目的是克服植物间远源杂交不亲和的障碍,培育作物新品种。动物细胞融合技术最重要的用途,不是以培养新品种为目的,而是制备单克隆抗体。单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,与常规抗体相比,特异性强,灵敏性高,优越性非常明显。6花药离体培养属于植物组织培养吗?花药离体培养主要在无菌条件下,取出花药或从花
14、药中取出花粉粒,置于人工培养基上进行培养,形成花粉胚或花粉愈伤组织,通过再分化长出根茎叶,最后长成花粉植株。由于这种植株所含的染色体数目只有正常植株的一半,故又称为单倍体植株。因此花药离体培养属于植物组织培养。只不过是利用成熟的生殖细胞进行离体培养,因此这个过程应该属于特殊的有性生殖过程。7如何从细胞亚显微结构图上认识细胞的生物膜结构?(1)找出细胞内单层膜和双层膜的结构。如单层膜结构有细胞膜、内质网膜、高尔基体膜、液泡膜;双层膜结构有叶绿体膜、线粒体膜、核膜。 (2)找出细胞内各种生物膜在结构上的联系,哪些是直接相连,哪些是间接相连。如直接联系是膜与膜能直接连接在一起。例如内质网与核膜,内质
15、网与细胞膜,内质网与线粒体膜都属直接联系;而高尔基体膜与内质网膜、细胞膜是通过小泡间接相连。 (3)根据分泌蛋白的形成过程图,理解内质网、高尔基体、线粒体、细胞膜在分泌蛋白合成和分泌过程中的有序分工和紧密联系。内质网把核糖体合成的分泌蛋白加工成比较成熟的蛋白质,然后通过出芽形成小泡,转移到高尔基体上,形成成熟的蛋白质,再通过小泡与细胞膜融合把分泌物排出,此过程需要线粒体提供能量才能完成。分析生物膜结构和功能上的联系,理解它们形成的是统一的整体,并通过生物膜系统的作用,加深对生物膜系统概念理解。总结分析1.植物组织培养与动物细胞培养的比较比较项目植物组织培养动物细胞培养生物学原理细胞全能性细胞分
16、裂培养基性质固体液体培养基成分蔗糖、氨基酸、维生素、水、矿物质、生长素、细胞分裂素、琼脂葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、水、动物血清取材植物器官、组织或细胞动物胚胎、幼龄动物器官或组织培养对象植物器官、组织或细胞分散的单个细胞过程脱分化、再分化原代培养、传代培养细胞分裂生长分化特点分裂:形成愈伤组织分化:形成根、芽只分裂不分化贴壁生长接触抑制培养结果新的植株或组织细胞株或细胞系应用快速繁殖培育无病毒植株提取植物提取物(药物、香料、色素等)人工种子培养转基因植物生产蛋白质生物制品皮肤细胞培养后移植检测有毒物质生理、病理、药理研究培养条件无菌、适宜的温度和pH2.植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较
17、比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合生物学原理膜的流动性、膜融合特性前期处理原生质体制备:纤维素酶和果胶酶处理细胞分散: 胰蛋白酶处理方法和手段物理:离心、振动、电刺激化学:聚乙二醇(PEG)(同前)生物:灭活的病毒应用进行远缘杂交,创造植物新品种制备单克隆抗体基因定位下游技术(后续技术)植物组织培养动物细胞培养名师解析【例1】 (2006江苏高考,35)下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图,据图完成下列问题:(1)_技术是单克隆抗体技术的基础。(2)根据培养基的用途分类,图中HAT培养基属于_培养基。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是_。(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质
18、体融合常用的诱导剂外,还可以采用_。(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_特点,又具备淋巴细胞的_特点。(6)淋巴细胞是由动物体_中的_细胞分化、发育而来。(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。解析:抗体是由B淋巴细胞分泌的,每一种淋巴细胞只能分泌一种抗体。要想获得大量单一抗体,需要将某一种淋巴细胞大量克隆,但在体外培养的条件下,B淋巴细胞不能无限增殖,而癌细胞(骨髓瘤细胞)可以在体外无限增殖,科学家将这两种细胞通过灭活的病毒诱导融合,在特定的选择培养基中筛选出杂交瘤细胞,再将杂交瘤细胞分开培养,从中选育出产生高特异性抗体的细胞进行体外大规模培养,从而获得大量的单克隆
19、抗体。单克隆抗体与常规抗体相比,特异性强,灵敏度高,可被广泛应用到疾病诊断、治疗和预防等方面。淋巴细胞都是由动物骨髓中的造血干细胞分化发育来的。杂交瘤细胞培养过程中需要吸收氨基酸、葡萄糖等营养物质,是通过主动运输进入细胞内的。答案:(1)动物细胞培养(微生物培养)(2)选择(3)特异性强,灵敏度高(4)灭活的病毒(5)在体外大量增殖分泌特异性抗体(6)骨髓造血干(7)主动运输(主动吸收)点评:综合考查单克隆抗体的制备原理、操作步骤与应用,并联系细胞结构部分的细胞分化、膜的运输功能。【例2】(08山东.2)已知分泌蛋白的新生肽链上有一段可以引导其进入内质网的特殊序列(图中P肽段),若p肽段功能缺
20、失,则该蛋白( ) A. 无法继续合成 B可以进入高尔基体 C可以被加工成熟 D. 无法被分秘到细胞外解析此题主要考查必修一第三章细胞器的中的生物膜系统的各细胞器的分工协作,中等难度题目。解答本题是需要弄明白以下几个问题:1.合成肽链的场所2.肽链合成后的加工过程。肽链在核糖体合成后,先进入内质网进行加工,然后交给高尔基体再加工,最后由高尔基体形成高尔基体小泡与细胞膜结合,由细胞膜分泌到细胞外。在该题中P太短功能缺失后,合成的分泌蛋白就不能进入内质网中,也就不能被高尔基体在加工,也就不用谈分泌到细胞外了。但是 ,在核糖体中的合成照常进行。答案:D。【例3】(09上海卷)回答下列有关植物组织培养
21、的问题。(1)用于植物组织培养的植物材料称为_。(2)组织培养中的细胞,从分化状态转变为未分化状态的过程称为_。(3)在再分化阶段所用的培养基中,含有植物激素X和植物激素Y,逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比,未分化细胞群的变化情况如下图所示,据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系:1)当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时,_;2)_;3)_;(4)若植物激素Y是生长素,在植物组织培养中其主要作用是_;则植物激素X的名称是_。(5)生产上用试管苗保留植物的优良性状,其原因是_。答案:(1)外植体(2)去分化(脱分化)(3)1)未分化细胞群经分裂形成愈伤组织; 2)当植
22、物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时,未分化细胞群分化形成芽; 3)当植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时,未分化细胞群分化形成根。(4)促进细胞的生长(伸长)、分裂和分化 细胞分裂素(5)组织培养形成试管苗的过程属于无性生殖,后代不发生性状分离。解析:本题主要考查植物组织培养相关知识。(1)植物组织培养的材料叫外植体;(2)植物组织培养的核心过程是脱分化与再分化,脱分化指由分化状态变为未分化状态,再分化指由未分化状态变为分化状态;(3)仔细分析所给示意图,可知植物激素X与植物激素Y浓度比为1时,利于愈伤组织的形成,大于1时利于细胞群分化出芽,小于1时利于细胞群分化出根;(4)生长素在植物组
23、织培养中主要作用是促进细胞生长、分裂和分化,植物组织培养过程中除需要生长素外还必需细胞分裂素,二者共同起作用;(5)植物组织培养是一种无性繁殖技术,利于保持亲本的优良性状。【例4】下列物质中属于分泌蛋白的是( )肠肽酶 抗体 载体 氧化酶 性激素 胰岛素A、 B、 C、 D、【解析】 本题首先明确中,性激素尽管是分泌物但它是脂类而不是蛋白质。然后分析由内质网上的核糖体合成的一类分泌蛋白,经内质网、高尔基体加工后将分泌到细胞外,如上面的肠肽酶(腺细胞合成并分泌)抗体(效应B细胞产生)胰岛素(胰岛B细胞分泌)而游离于细胞质基质中的核糖体合成的蛋白质多为供细胞自身利用的,不向外分泌,如上面的载体呼吸
24、氧化酶。【答案】 C【例5】下列过程中,没有发生膜融合的是A植物体细胞杂交B受精过程C氧进入细胞中的线粒体D效应B细胞产生抗体【解析】 膜的融合表现在同一细胞的生物膜以出芽方式形成的具膜小泡移到另一膜上,与该膜融合后成为该膜的一部分。其中D选项中效应B细胞产生抗体就是以这种结构转化为基础,不断合成和分泌出抗体的过程。另外也表现在不同细胞生物膜的融合,如有性杂交的精子与卵细胞结合,植物体细胞杂交两种原生质体的融合,都体现了细胞膜等膜的融合,而氧进入到线粒体内只是物质出入生物膜的物质运输过程。【答案】 C【例6】有关动物细胞培养的叙述中正确的是A动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散B动物细胞培养的
25、目的是获得大量的细胞分泌蛋白C细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中D培养至50代后能继续传代的传代细胞叫细胞株【解析】 明确动物细胞的培养过程,用到胰蛋白酶使细胞分散开,进行了原代培养及传代培养。再比较植物组织(或细胞)培养与动物细胞的培养的目的:前者是为了获得新的植物体,后者为了获得细胞群或细胞产品。【答案】 A【例7】动物细胞融合的目的中最重要的是A克服远源杂交不亲和B制备单克隆抗体C培育新物种D生产杂种细胞【解析】 动物细胞融合不像植物体细胞杂交那样,主要是为了克服远源杂交不亲和,以培育新品种为目的。动物细胞目前只见到高度分化的细胞核在去核卵细胞中表现全能性,还未见到融合细胞核表现出全
26、能性的例子,因此动物细胞融合不能用来培育新的物种。生产杂种细胞,不是细胞融合的主要目的,只是细胞完成后所形成的结构的名称。目前动物细胞融合技术最重要的用途就是制备单克隆抗体。【答案】 B【例8】植株组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是体细胞全能性 离体植物器官、组织或细胞 根、芽 生长素和细胞分裂素 生长素和乙烯 愈伤组织 再分化 脱分化 植物体A、B、C、D、【解析】 通过分析本题,注意对问题的系统总结,不难解答出来。【答案】 A单元测试题目1(2003·江苏生物·21)用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是(
27、)A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的B.该愈伤组织的细胞没有全能性C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构2.(2003·江苏生物·31)要将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株,需要( )A具有完整细胞核的细胞 B离体状态C导入外源基因 D一定的营养物质和激素3.(2003·全国·6)甘薯种植多年后易积累病毒而导致品种退化。目前生产上采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗,以保证该品种的品质和产量水平。这种通过分生组织离体培养获得种苗的过程不涉及细胞的( )A有丝分裂 B分化 C减数分裂 D全
28、能性4正常人体内的造血干细胞能分裂产生各种血细胞,在体外,在某些因素的诱导下,却可以分化为神经细胞和肝细胞。其根本原因是这些造血干细胞 A有旺盛的分裂能力 B能合成神经细胞或肝细胞需要的蛋白质C还没有分化 D具有与受精卵相同的全套遗传基因5胰岛B细胞是合成胰岛素的场所并分泌血液中,与此生理功能有关的细胞结构是 ( ) A线粒体、核糖体、内质网、高尔基体、中心体 B线粒体、核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜 C线粒体、核糖体、内质网、高尔基体、溶酶体D线粒体、核糖体、内质网、高尔基体、中心粒6(2006·北京·1)以下不能说明细胞全能性的实验是( )A.胡萝卜韧皮部细胞培育出植
29、株B.紫色糯性王米种子培育出植株 C.转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株D.番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株7.从某腺体的细胞中提取一些细胞器,放入含有14C氨基酸的培养液中,培养液中有这些细胞器完成其功能所需的物质和条件,连续取样测定标记的氨基酸在这些细胞器中的数量,下图中能正确描述的曲线是 ( )8.真核细胞内的膜系统如核膜。质膜与内质网膜相连,这种结构特点说明内质网的重要功能A扩大膜面积 ( )B提供细胞内物质运输通道 C核糖体附着支架 D参加多种物质的合成9(多选.08·江苏生物·25)某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件
30、除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是A污染主要不是培养基灭菌时间短造成的B污染主要来源于组织培养所用的离体组织C调节培养基pH不能解决污染问题D调节培养温度不能解决污染问题10、抗原侵入到宿主细胞内部时,体液中的抗体不能直接与这些抗原发生特异性结合,人体通过免疫细胞消灭清除这些抗原。在效应T淋巴细胞中与淋巴因子形成、运输、加工、分泌有关的膜结构有 ( )A、线粒体、核糖体、内质网 B、核糖体、内质网、高尔基体C、细胞膜、核糖体、中心体 D、内质网、线粒体、高尔基体11.(09南京)关于现代生物技术相关知识的叙述,其中正确的是 A动物细胞培养与动物组织培养过程均需使用
31、胰蛋白酶处理B试管苗、试管牛和克隆羊都属于无性生殖且能保持母本性状C用DNA连接酶将一个目的基因和质粒连接形成重组DNA分子D将玉米花粉和水稻花粉进行细胞杂交,获得的植株为二倍体,且可育12.(09南京)下列与应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤如下,其中对单克隆抗体制备的相关叙述中不正确的是 将X抗原注入小鼠体内,获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞从腹水中提取抗体A实验顺序应当是 B过程中产生的多个杂交瘤细胞也为克隆C过程获得的细胞均可无限增殖 D到的
32、过程中通常要经过两次筛选13.(09海门)下列有关细胞工程的叙述,正确的是A细胞工程在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质 B叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C通过动物细胞培养技术可以生产许多有重要价值的生物制品 D动物细胞融合技术最重要的用途是生产杂种细胞14、生物膜在结构和功能上具有一定的联系。高尔基体具有极性,靠近细胞核的一面称为形成面,接近细胞膜的一面称为成熟面。从形成面到成熟面,膜的厚度和化学成分发生逐渐改变,下列叙述正确的是( )A形成面似核膜,成熟面似内质网 B形成面似内质网,成熟面似细胞膜C形成面似核膜,成熟面似细胞膜 D形成面似内质网,成熟面似核膜15.(09上海)11.
33、 从某腺体的细胞中,提取出附着有核糖体的内质网,放入含有放射性标记的氨基酸的培养液中。培养液中含有核糖体和内质网完成其功能所需的物质和条件。很快连续取样,并分离核糖体和内质网。测定标记的氨基酸出现在核糖体和内质网中的情况,结果如下图所示。下列说法不正确的是( )A. 放射性氨基酸的量在核糖体上不断增加,原因是与核糖体 合成蛋白质有关B. 在前4分钟内质网中的放射性氨基酸量的积累比核糖体快C. 实验中培养液相当于细胞中的细胞质基质D. 图中可推知氨基酸先进入核糖体,合成蛋白质后再进入内质网16.(09上海)单克隆抗体产生于( )A脾脏中产生单一抗体的浆细胞 B促融剂作用下形成的杂交瘤细胞CB淋巴
34、细胞突变形成的瘤细胞 D单个杂交瘤细胞增殖产生的细胞群17.(09上海)连接沟通细胞膜、高尔基体膜、核膜,使三者相互联系、构成有机整体的结构是( )A中心体 B内质网 C线粒体D核糖体18.(09上海)在下列选项中,不需要采用植物组织培养技术的是( ) A利用基因工程培育抗棉铃虫的棉花植株 B利用细胞工程技术培养“番茄一马铃薯”杂种植株 C. 利用花药离体培养得到单倍体植株 D利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,得到染色体数目加倍的植株19.(09上海)下列哪一项属于克隆 A将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA中B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤
35、细胞D将肿瘤细胞在体外培育繁殖成一个细胞系20.(09上海)人类的下列基因可以在同一个细胞内表达的是 胰岛素基因和胰高血糖素基因 促性腺激素基因和生长激素基因 促性腺激素基因和性激素基因 胰蛋白酶基因和解旋酶基因 A. B. C. D. 21.(09上海)试管婴儿、试管苗和克隆羊均属于生物工程技术的杰出成果,下面叙述正确的是:( )A.都属于无性生殖能保持母本性状 B.都是细胞工程的技术范围C.都充分体现了已分化体细胞的全能性 D.都不会发生基因重组和染色体变异22、(08理综)5下列关于细胞工程的叙述,错误的是A电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合B去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散
36、成单个细胞均需酶处理C小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制务单克隆抗体D某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同23、(08天津)2下列有关生物膜的叙述,正确的是A大鼠脾细胞与兔造血干细胞的细胞膜能够发生融合B用蛋白酶处理生物膜可改变其组成,不改变其通透性C在生长激素的合成和分泌过程中,生物膜只发生结构上的联系D兴奋在神经纤维上传导和在神经元间传递时,生物膜发生的变化是相同的24.(09石家庄)根据所学的生物学知识,结合植物组织培养判断下列叙述,正确的是A.细胞的全能性是植物组织培养和动物细胞培养的理论基础B.通过植物组织培养获得的幼苗并不都是无病毒植株
37、C.离体的细胞、组织或器官在培养过程中,经过细胞分裂、分化形成愈伤组织D.将脱分化产生的愈伤组织包裹上人造种皮,制备人工种子25.(09石家庄)下列有关动物细胞工程的叙述,不正确的是A.限制性内切酶的发现使细胞工程应运而生和快速发展B.培养杂交瘤细胞的过程中,要从中挑选出能够产生所需抗体的细胞群C.单克隆抗体的制备综合利用了B淋巴细胞和癌细胞的特性D.单抗诊断盒利用的是单克隆抗体特异性强,灵敏度高的特性26、(08上海生物)11制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括细胞培养 细胞融合 胚胎移植 细胞核移植A B C D27.(09石家庄)单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细
38、胞群产生的化学性质单一,特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中,错误的是A.作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位B.单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术.C.在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选D.只有用物理或化学的方法,才能促使效应B细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞28.(原创)右图表示神经细胞神经递质分泌过程前后几秒钟三种生物膜面积的变化,其中能够正确表示内质网的是A.B.C.D.不存在29.(原创)下图所示为细胞融合技术的一些过程,有关说法错误的是( )A.如果该过程表示的是原生质体的融合,在形成A、B细胞之前,应该先用相应的酶进行处理B.从A和B细胞到C细胞的过程中,必
39、须进行诱导处理C.该过程是要制备单克隆抗体,A为骨髓瘤细胞,D则应为杂交瘤细胞D.如果该过程是植物体细胞杂交的一部分,D细胞表示原生质体已经完全融合30.(原创)有关植物组织培养与动物细胞培养的比较,下列说法错误的是()A.生物学原理相同B.培养基性质不同C.培养的结果不同D.培养条件大体相同二、非选择题31.(09山东卷)34.(8分)(生物一生物技术实)人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下:悬浮培养细胞分离诱导人参根切块愈伤组织单细胞或小细胞团细胞培养物培养物干粉人参皂苷收集提取请回答:(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行
40、。接种前,要对人参根进行 。(2)用于离体培养的根切块,叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染,若是有颜色的绒毛状菌落,属于 污染;若是有光泽的黏液状菌落,属于 污染。(3)用少量 酶处理愈伤组织,获取单细胞或小细胞团,在液体培养基中进行悬浮培养,可有效提高人参皂苷合成量。(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶液,从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法,操作时应采用 加热。32(2004·江苏·39)紫草素是紫草细胞的代谢产物,可作为生产治疗烫伤药物的原料。用组织培养技术可以在生物反应器中通过培养紫草细胞生产紫草素。下图记录了生物反应器中紫草细胞产量、紫草素产量随培养时
41、间发生的变化。 (1)在生产前,需先加入紫草细胞作为反应器中的“种子”。这些“种子”是应用组织培养技术,将紫草叶肉细胞经过_而获得的。这项技术的理论基础是_。 (2)从图中可以看出:反应器中紫草细胞的生长呈现_规律;影响紫草素产量的因素是_和_。 (3)在培养过程中,要不断通入无菌空气并进行搅拌的目的是_和_ 。33(2006·重庆· 31)植物甲、乙是两种濒危药用植物(二倍体)。请按要求回答问题:(1)以植物甲、乙的茎尖和叶片为材料,通过组织培养获得了再生植株,解决了自然繁殖率低的问题。这表明植物细胞具有_。由叶片等材料形成的愈伤组织的形态结构特点是_。(2)题31图1和
42、题31图2分别是植物甲、乙的萌发花粉粒和未受精胚珠的示意图。在分离珠被细胞的原生质体时,通常使用纤维素酶和果胶酶破除细胞壁。其原理是利用了醉的_性质。 如果将题31图1中的1个精子与题31图2中的1个_细胞或2个_融合,可培育出三倍体植株。用适当浓度的秋水仙素处理该三倍体植株的幼苗。可能获得药用成分较高的六倍体植株。秋水仙素的作用机理是_。(3)植物乙自然结实率低,主要原因是花粉粒萌发后多数花粉管不能伸长。为探究生长素对植物乙花粉管伸长的影响,某生物兴趣小组进行了课外实验,得到下表结果:请结合表中数据对实验结果进行简要分析:_。根据上述分析,可以得出的结论是:_。34(08·海南
43、183;25)某二倍体植物是杂合体,图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答:(1)图中表示的是该花粉培养过程中的 过程,表示的是 过程,X代表的是 ,表示的是 过程,表示的是诱导 过程。(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条,具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中 的种类及最后其浓度配比,获得的来源于未成熟花粉的完整植株都程为 植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株,说明未成熟花粉具有 。(3)植株甲进行 ,才能使其结实,产生后代(乙),否则植株甲只有通过 的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中,能产生可育花粉的是 植株,该植株群体中每一植株产生
44、可育花粉基因组成种类数为 种,该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种。花粉培育在育种上的特殊意义是 ,从而开辟育种新途径。35、(08宁夏)38生物选修3现代生物科技专题(15分)回答下列有关动物细胞培养的问题:在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的。此时,瓶壁上形成的细胞层数是。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是。随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞,该种细胞的黏着性,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量。现用某种大分子染料,
45、对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是。检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到期的细胞用显微镜进行观察。在细胞培养过程中,通常在条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中的活性降低,细胞的速率降低。给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作进行攻击。36.(08江苏生物)B题。下面是以小鼠为对象进行的研究工作,请分析回答问题。(1)进行小鼠胚胎工程操作时,首先在光控周期下(光照14h,黑暗10h)饲养成年雌鼠,并注射促进性腺激素,目的是 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子,在一定条件下培养成熟;并从雄鼠附睾中取出精子
46、,在一定条件下培养一段时间,目的是 。再在37,5%CO2条件下,精卵共同作用4h,冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化,第5天右以看到胚胎发生收缩,细胞间隙扩大,接着胚胎内部出现裂隙,这是胚胎_期开始的标志。(2)如果体外受精后,在精核与卵核融合之前,用微型吸管除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 。(3)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中,由重组细胞发育成小鼠丙,则小鼠丙的基因来源于 。(4)如果将外源基因导入小鼠受精卵,则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵
47、有的可发育成转基因小鼠,有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因 。37.(2007天津理综)30(14分)在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。侵染抗虫基因含kan质粒重组质粒土壤农杆菌含重组质粒土壤农杆菌 A构建导入 B培养选择转基因抗虫植株再生植株愈伤组织离体棉花叶片组织 C诱导选择分化 D检测请据图回答:(1)A过程需要的酶有_。(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是_。(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入
48、_。(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测,D过程应该用_作为探针。(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。将转基因植株与_杂交,其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1:1。若该转基因植株自交,则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为_。若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养,则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_%。参考答案:1.解析高度分化的细胞都具有全能性,愈伤组织的细胞经过脱分化形成,具有更高的全能性。答案B2. 解析将胡萝卜韧皮部细胞培养成完整植株是组织培养的过程,必要条件是离体,外界条件是一定的营养物质和激素以及无菌操作,自身条件是具有完整细胞核的细胞。导入外源基因是基因工程的操作程序。答案ABD3. 解析采用茎尖分生组织离体培养的方法快速繁殖脱毒的种苗是组织培养的过程,在这个过程中,细胞进行有丝分裂和发生分化,属于无性繁殖,不涉及减数分裂的过程。答案C4. 解析导入导入指定基因是基因工程的操作程序。答案D5.解析胰岛素的成分是蛋白质,是在核糖体上合成的,需要内质网和高尔基体的加工,最后由细胞膜分泌到细胞外。答案B6. 解析紫色糯性王米种子培育出植株是利用种子进行繁殖,是有性生殖过程,不能说明细胞全能性。答案 B7.解析从题意中可以看出,该物质是分泌蛋白。分泌蛋白的和场合分泌
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