氧化应激应激

1、第一页，共36页幻灯片2第二页，共36页幻灯片3 无症状隐匿期：粥样硬化斑块已形成，但尚无明显狭窄，因此无器官受累临床表现。（脂质条纹多于510岁的儿童开始，粥样斑块始见于20岁)。 缺血期：粥样硬化斑块导致血管狭窄、器官缺血，根据累及器官不同临床表现也不同。 坏死期：动脉堵塞或血管腔内血栓形成造成相应器官组织坏死产生的症状。 纤维化期：长期缺血导致相应器官组织纤维化萎缩第三页，共36页幻灯片4?1第四页，共36页幻灯片5?2第五页，共36页幻灯片6?3第六页，共36页幻灯片7?4第七页，共36页幻灯片8? ?ROSROS可导致脂质、蛋白质和可导致脂质、蛋白质和DNADNA的修饰的修饰第八页，

2、共36页幻灯片9 1983年,美国国家科学院院士Daniel Steinberg提出动脉粥样硬化脂质氧化学说,认为与天然LDL相比,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)更容易被巨噬细胞识别并吞噬形成泡沫细胞,奠定了ox-LDL在动脉粥样硬化发生过程中的中心地位。第九页，共36页幻灯片10机体机体自由基自由基抗氧化抗氧化 有害刺激有害刺激组织损伤组织损伤Reactive OxygenSpecis (ROS) 氧化氧化 应激应激第十页，共36页幻灯片11ROS的作用的作用 机体防御机体防御 细胞内第二信使，参与细胞内第二信使，参与 正常生理功能正常生理功能 过量，导致病理损伤过量，导致病理损伤第十一

3、页，共36页幻灯片12O O2-2-O O2 2- -LDLLDL表面多不饱和表面多不饱和脂肪酸双链断裂脂肪酸双链断裂 ApoB ApoB氧化氧化共轭共轭双烯双烯修改修改LDLLDL表面结构表面结构交联交联LDLLDL表层表层LDLLDL不再被不再被LDL-RLDL-R识别识别转而被转而被SR-AISR-AI受体识别受体识别Witztum, J.L. et al. J. Clin. Invest. 1991. 88, 1785-1792第十二页，共36页幻灯片13内皮细胞管腔单核细胞巨噬细胞泡沫细胞内膜细胞增殖、退化MCP-1穿越VCAM-1ICAM-1粘附高脂血症细胞因子第十三页，共36页幻

4、灯片14ROS与与AS第十四页，共36页幻灯片15LDL体内氧化机制体内氧化机制LDLLDL氧氧化化中性粒细胞中性粒细胞单核细胞单核细胞巨噬细胞巨噬细胞 EC SMC成纤维细胞成纤维细胞NADPH氧化酶氧化酶髓过氧化酶髓过氧化酶细胞色素细胞色素P450线粒体电子传递链线粒体电子传递链过氧化亚硝酸盐过氧化亚硝酸盐黄嘌呤氧化酶黄嘌呤氧化酶血浆铜蓝蛋白血浆铜蓝蛋白脂氧化酶：体内脂氧化酶：体内/外外第十五页，共36页幻灯片16OxLDL的致的致AS特性特性 促进促进SMC增殖增殖 抑制内皮细胞的血管舒张抑制内皮细胞的血管舒张 具有免疫原性具有免疫原性 细胞毒作用：破坏血管内膜完整性（炎细胞毒作用：破坏

5、血管内膜完整性（炎症因子和炎症介质）症因子和炎症介质） T细胞趋化因子细胞趋化因子 MMP，影响斑块稳定性，影响斑块稳定性第十六页，共36页幻灯片17OxLDL的致的致AS特性特性 上调清道夫受体表达上调清道夫受体表达 易被巨噬细胞迅速摄取，无负反馈易被巨噬细胞迅速摄取，无负反馈 调节，形成泡沫细胞调节，形成泡沫细胞 刺激刺激EC释放释放MCP-1、CSF，促进单核，促进单核 细胞趋化并分化成组织巨噬细胞细胞趋化并分化成组织巨噬细胞 抑制局部巨噬细胞迁移；抑制局部巨噬细胞迁移； 刺激单核细胞刺激单核细胞/巨噬细胞表达巨噬细胞表达IL-1 第十七页，共36页幻灯片18丙二醛丙二醛（MDA）循环抗

6、循环抗oxLDL抗体抗体F(2)- 异前列烷异前列烷(IsoPs)定量方法定量方法 体内、简便、准确体内、简便、准确 人体液：血浆和尿液人体液：血浆和尿液 AS危险因素如吸烟、高胆固醇、危险因素如吸烟、高胆固醇、 糖尿病、肥胖时，糖尿病、肥胖时，F(2)-IsoP增加增加ROS的检测的检测第十八页，共36页幻灯片19 nLDL oxLDL底物 oxLDL 形成AS的主要原因 MMPS 斑块破裂的关键因素 血栓形成 不良事件 第十九页，共36页幻灯片20 外因：各种危险因素：高血压、糖尿病、高半胱氨酸血症、吸烟、饮酒。 内因：斑块破裂，其中基质蛋白酶（MMPS）是影响斑块稳定性的关键生物酶。第二

7、十页，共36页幻灯片21 CRP大于3.0 栓子监测 脑彩超 颈动脉易损斑块成像（MRE）第二十一页，共36页幻灯片22抗氧化治疗抗氧化治疗第二十二页，共36页幻灯片23 Probucol Statins AT1RB and ACEI Vitamins E and C PPAR- ligands.抗氧化治疗抗氧化治疗第二十三页，共36页幻灯片24中度降低中度降低LDL有效抑制有效抑制LDL氧化修饰，独立于其氧化修饰，独立于其 降脂作用降脂作用 恢复恢复NO生物活性生物活性 抑制抑制VCAM-1和和MCP表达，表达， 抑制人主动脉抑制人主动脉SMC增殖增殖 抑制模型动物抑制模型动物AS形成形成

8、Probucol第二十四页，共36页幻灯片25第二十五页，共36页幻灯片26抗氧化剂循证研究结果VitE CHAOS(Cambridge Heart Anti-Oxidant Study) +HOPE(Heart Outcome Prevention Evaluation)-ATBC(Alpha Tocopherol Beta Carotene Prevention) -SPACE(Secondary Prevention with Antioxidants of Cardiovascular Disease in Endstage Renal Disease) +ASAP(Antioxida

9、nt Supplementation in Atherosclerrosis Prevention) PPP(Primary Prevention Project) -GISSI(Gruppo Italiano per lo Studio della Sorpravivenza nelInfarto miocardico)-胡萝卜素ATBC(Alpha Tocopherol Beta Carotene Prevention) -CARET(Beta-Carotene & Retinol Efficacy Trial) -VitCCLAS(Cholesterol Lowering Ath

10、erosclerosis Study) -复合维生素IEISS(The Indian Experiment of Infare Survival Study)-第二十六页，共36页幻灯片27普罗布考是目前最强的断链抗氧化剂普罗布考是目前最强的断链抗氧化剂, ,其抗氧化能力是其抗氧化能力是VitEVitE的的5 56 6倍倍, ,且且结合氧自由基反应为不可逆结合氧自由基反应为不可逆普罗布考分子具有普罗布考分子具有1414个亲脂性甲基个亲脂性甲基, ,决定了普罗布考与决定了普罗布考与LDLLDL结合能力远强于结合能力远强于其他脂溶性抗氧化剂其他脂溶性抗氧化剂(1(1个个LDLLDL颗粒仅能结合颗粒

11、仅能结合6 6个个VitEVitE和和2 2个个-胡萝卜素分胡萝卜素分子子),),因此与因此与LDLLDL结合的普罗布考分子消耗氧自由基的能力远强于结合的普罗布考分子消耗氧自由基的能力远强于VitEVitE和和-胡萝卜素。胡萝卜素。除了抗氧化作用外除了抗氧化作用外, ,普罗布考还是个降胆固醇药物普罗布考还是个降胆固醇药物, ,且对动脉粥样硬化过程且对动脉粥样硬化过程中诸多的炎性细胞因子有较强抑制作用中诸多的炎性细胞因子有较强抑制作用VitEVitE和和-胡萝卜素在大多研究中剂量不足。值得注意的是胡萝卜素在大多研究中剂量不足。值得注意的是,VitE,VitE每日每日剂量在剂量在400IU400I

12、U以上的临床试验结果均为阳性以上的临床试验结果均为阳性, ,而每日剂量在而每日剂量在400IU400IU以下则对动以下则对动脉粥样硬化无明显效果。脉粥样硬化无明显效果。VitCVitC为水溶性抗氧化剂为水溶性抗氧化剂, ,抗脂质氧化作用微弱。抗脂质氧化作用微弱。第二十七页，共36页幻灯片28他汀类药物他汀类药物 抑制抑制NAD(P)H氧化酶表达氧化酶表达 降低降低oxLDL对氧化的易感性对氧化的易感性 抑制抑制LOX-1上调上调 增加增加eNOS表达及表达及mRNA 稳定性，稳定性， NO 抑制抑制ATR1表达表达抗氧化剂抗氧化剂第二十八页，共36页幻灯片29ACEI和和ARB-从源头阻断从源

13、头阻断ROS产生产生 抑制抑制NAD(P)H氧化酶活性氧化酶活性 SOD表达表达 改善改善NO生物活性，改善内皮功能生物活性，改善内皮功能 抑制早期斑块形成抑制早期斑块形成 ACEI 缓激肽水平缓激肽水平NO释放释放第二十九页，共36页幻灯片30 ApoE敲除小鼠高脂喂养：敲除小鼠高脂喂养：LOX-1、MMP-1, MMP-2, MMP-9, CD40，p38 MAPK活性活性 rosuvastatin或或 candesartana：中度抑制：中度抑制 rosuvastatin加加 candesartana：完全抑制：完全抑制-Chen J, et al. J Am Coll Cardiol

14、(in press)ACEI/ ARB与与statins的协同作用的协同作用第三十页，共36页幻灯片31 抑制抑制NADPH 氧化酶表达、氧化酶表达、 ROS 产生产生 抑制抑制EC和和SMCs表达致表达致AS蛋白蛋白 调节巨噬细胞调节巨噬细胞-泡沫细胞形成和泡沫细胞形成和 炎症反应，炎症反应， AS病变病变 高胆固醇兔的血管壁白细胞聚集高胆固醇兔的血管壁白细胞聚集 TNF-介导的人冠状动脉介导的人冠状动脉EC凋亡凋亡 PPAR-配体配体第三十一页，共36页幻灯片32 增加局部增加局部NO生物利用度生物利用度 抑制抑制LDL氧化氧化 动物模型：糖尿病、高血脂动物模型：糖尿病、高血脂 改善内皮功

15、能，减缓改善内皮功能，减缓AS进展进展Vitamins E局限性局限性对对O2-、OH-、ONOO-无效无效作用限于亲脂环境作用限于亲脂环境需要协同抗氧化因子需要协同抗氧化因子致氧化作用致氧化作用第三十二页，共36页幻灯片33 直接清除直接清除ROS( O2-、OH-、 H2O2) 增加局部增加局部NO生物利用度生物利用度 抑制抑制NAD(P)H氧化酶活性氧化酶活性 抑制抑制LDL氧化氧化 动物模型：糖尿病、高血脂动物模型：糖尿病、高血脂 改善内皮功能，减缓改善内皮功能，减缓AS进展进展Vitamins C局限性局限性直接清除直接清除O2-需要较高浓度需要较高浓度(mM)致氧化作用致氧化作用第三十三页，共36页幻灯片34 5个阳性结果：显示主要联合终点获益个阳性结果：显示主要联合终点获益 CHAOS、 SPACE、ASAP、Nurses Health Study 、移植物相关、移植物相关AS研究研究 7 个阴性结果：不降低与个阴性结果：不降低与AS有关的终点事件有关的终点事件 HOPE、HPS、GISSI、ATBC、CARET、PQRST、PHS有关抗氧化维生素的有关抗氧化维生素的12临床研究临床研究第三十四页，共36页