实验课生化试验仪器培训

1、 步骤一：制胶步骤一：制胶2g琼脂糖+0.5x TBE 200ml 锥形瓶，盖上牛皮纸， 用橡皮筋捆紧 微波炉加热n次,直至溶解， 1min/次，中高温（一般35次） 加 20ul荧光染料（有毒需带上手套） 混匀 倒入凝胶托盘（大小凝胶托盘，梳子套 好）， 托盘高度1/3 （约3mm） 冷凝 轻轻取下梳子，大凝胶托盘 置于电泳槽中 ，小托盘上面的黑带靠近负极 加缓冲液刚好没过凝胶注意事项：1、注意用微波炉加热溶解琼脂糖时，分多次溶解，1min/次，以防爆沸。2、荧光染料有毒，操作时戴手 套和穿白大褂3、倒入托盘中胶的高度只能是托盘高度的1/3，不能过多也不能过少。4、冷却后取梳子时必需小心，以

2、防加样孔受破坏。步骤二：加样步骤二：加样用加样枪加样，记住自己加入样品的位置。盖上电泳仪上盖。（注意正负极）注意事项：注意事项： 加样时加样枪要垂直，加完样品后手指仍不能松开，直至加样枪高于液面，以免吸出样品和缓冲液。步骤三：调电泳仪用途：用途：适宜普通蛋白 核酸电泳面板说明：面板说明：操作步骤：1、接好电源并确认与有接地保护的电源插座相连2、按颜色接好电泳槽和电泳仪的连接导线3、确认电源符合要求后，开启仪器的“电源开关”4.按选择键，当箭头指向某一项时，可按数值调节按键调本项数值本实验所用各项数据如下Us=80vIs=100mATs=0:305.按【启/停】键后，仪器鸣响4声，输出启动，“输

3、出指示灯”闪亮6.电泳完成后，电泳仪发出鸣响。此时按电源键关闭电源。取出凝胶。注意事项：注意事项：1、注意正负极的链接2、仪器使用中，请勿将电泳槽 放在电泳仪上进行实验操作， 严禁溅入电解质溶液。若有电泳液溅入，切勿接通电源，以免造成事故。3、开机后人体不宜和电泳槽溶液或样品接触，严禁打开电泳槽的上盖进行加样。必须是需要电泳的样品添加完毕后才可以接通电源。若需要看样品，最好是关机后再看。电热恒温培养箱电热恒温培养箱l使用操作接通仪器电源将仪器放置平整地面或台面上。打开电源开关，电源指示灯亮按培养物的所需温度进行温度设定，仪器开始加热工作，控温仪开始显示工作室的温度。达到设定温度自动恒温半小时后

4、放入培养物。试验结束后关闭电源开关，仪器即停止工作。l注意事项实验物品摆放时在箱内不宜过挤，要让空气流动畅通，使箱内温度均匀。内室底板接近加热器，故不宜将实验物直接放置其上。培养箱工作时应将风顶适当旋开，以利箱内温度均匀和有适当的换气量。通电使用时不要用手触及带电部位。培养箱上面不得放置任何物品。电热恒温水箱电热恒温水箱CU600型恒温水浴箱l使用方法开启电源开关，电源开关指示灯亮，设备的电源已接通，温度控制仪表显示的数值是当前的水温值。 按照所需要的工作温度进行温度的设定，此时温控仪表的绿灯亮，电加热器开始加热，待水温接近设定温度时，温控仪表的红绿灯开始交替亮灭，温控仪表进入了比例控制带，加

5、热器开始断续加热以控制热惯性。当水温升至设定温度时，红绿灯按照一定的规律交替亮灭，设备进入恒温段。举例，数字显示双列三孔恒温水浴锅，工作温度65，其操作程序如下：加注清水开启电源开关温度设定：依次按动各位上的拨码开关，使个位显示为5，十位显示为6，百位显示为0温控仪表的绿灯亮，加热器开始工作温控仪表的红绿灯开始交替亮灭，进入比例加热阶段直至恒温。试验工作结束以后，关闭电源开关，切断设备的电源，并将水槽内的水放净。l注意事项 本系列产品的各项技术指标出厂前均经过实际运行检验，如果用户因工艺要求需采用自备的温度计（具有一定准确度）进行测定时，以用户的温度计为准，如果温控仪表显示的数值与温度计有差异

6、，用户可将温度设定旋钮略做微调即可满足工艺要求。水浴锅使用时，必须先加水后通电，严禁干烧。水浴锅使用时，必须有可靠的接地以确保使用安全。水位低于电热管，不准通电使用，以免电热管爆裂损坏水位也不可过高，以免水溢入电器箱损坏元件。低速冷冻离心机 操作方法：操作方法：1.打开电源开关2.设定参数，温度，时间，转数3.开始离心，转数逐渐升值设定值，到达设定时间后，减速降至04.停止键参数设定1.温度设定 a.按选择键，上限指示灯亮，按加减设定 b。按选择键，下限指示灯亮，按加减设定时间与转数设定1.按选择键，出现p0000，按记忆键，出现上次转数设定，按加减和左移，输入，最后按记忆键存储2.按加键，显

7、示p0001,为时间设定，单位为分钟，按记忆键，出现上次时间设定，按加减和左移，输入，最后按记忆键存储3.按选择键，退出设定4.完成设定之后，按离心键工作注意事项1.离心前必须配平2.过长离心管放于外侧3.已设定好的参数不要随意修改4.一次离心不要超过60分钟5.离心结束后，未能及时打开盖子，可关闭电源之后再接通，然后打开盖门微型离心机 1.打开开关2.配平3.设定转数与时间4.开始离心5.关闭电源注意：离心时一定要配平，要把里面的盖子扣上MLSMLS37503750高压灭菌锅使用说明及相关高压灭菌锅使用说明及相关注意事项注意事项MLS-3750高压蒸汽灭菌锅整体控制盘控制盘电源开关电源开关排

8、气贮存桶：排气贮存桶：里面的水不得里面的水不得低于最低刻度低于最低刻度线，也不得高线，也不得高于最高警界线于最高警界线机械开关（控制机械开关（控制锅盖开关）锅盖开关） ： 只有电源开只有电源开关打开的状态关打开的状态下才能够打开下才能够打开MSL-3750高压蒸汽灭菌锅MSL-3750高压灭菌锅内部构造内部结构内部结构主要两个主要两个不锈钢框不锈钢框构成，不构成，不锈钢框用锈钢框用于放需要于放需要灭菌的物灭菌的物品品不锈钢框底在灭菌不锈钢框底在灭菌前加入一定量的前加入一定量的水水(水不能高于不水不能高于不锈钢下框锈钢下框）高压灭菌锅操作盘使用压力表：显示灭菌锅内部压力压力表：显示灭菌锅内部压力

9、工作指示灯：指示当前工作内容工作指示灯：指示当前工作内容select：选择切换键，切换设置项：选择切换键，切换设置项timer：设定预定开始的时间：设定预定开始的时间开始键：各项设置完毕启动开始键：各项设置完毕启动显示设定目标温度显示设定目标温度、升温过程降温过程、升温过程降温过程温度温度显示预设灭菌时间等显示预设灭菌时间等显示最终设定的要求温度显示最终设定的要求温度加压过程指示灯：加压过程亮加压过程指示灯：加压过程亮停止按钮停止按钮:终止终止作业运行及预定作业运行及预定、保温状态、保温状态高压灭菌锅基本操作流程检查并放置排气储存桶检查并放置排气储存桶接通电源开关接通电源开关打开盖子打开盖子注

10、入加热用水注入加热用水放入灭菌物品放入灭菌物品关闭盖子关闭盖子选择过程：选择过程：操作操作盘操作操作盘选择作业内容选择作业内容按下启动钮按下启动钮灭菌溶解、保温灭菌溶解、保温运行完毕运行完毕打开盖子打开盖子去除灭菌物品去除灭菌物品切断电源开关并排出加热用水切断电源开关并排出加热用水使用高压灭菌锅注意事项1 待灭菌的物品放置不宜过紧2 待灭菌器内压力降至与大气压相等后才可 开盖3 装培养基的试管或瓶子的棉塞上，应包油纸或牛皮纸，以防冷凝水入内4 当需要一定高温打开盖子取出灭菌仪器等时，面部远离灭菌锅盖口，以免被蒸汽烫伤。5 使用灭菌锅灭菌前必须将冷空气充分排除，否则锅内温度达不到规定温度，影响灭

11、菌效果6 灭菌完毕后，不可放气减压，否则瓶内液体会剧烈沸腾，冲掉瓶盖而外溢甚至导致容器爆裂。PTC-1148PTC-1148一、梯度一、梯度PCRPCR仪仪把一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（温度梯度），通常12钟温度梯度，这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段，其最适退火温度不同，通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增，就可以筛选出表大量高的最适退火温度，进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样节约成本的同时也节约了时间。梯度PCR仪，在不设置徒弟的情况下也可以做普通PCR扩增。二、二、PCRPCR仪的具体性能：仪的具体性

12、能：6 x 8 的样品板排列，一次可以容纳48 个0.2ml 的PCR 反应管，0.2ml 的PCR 8 联反应联管，48 孔PCR反应板。如果是0.5ml PCR 反应管，一次最多可以加12 个；梯度PCR 功能允许在同一反应中设置8 个不同温度，方便优化反应条件。三、简单的程序编辑选项三、简单的程序编辑选项MJ Mini PCRMJ Mini PCR仪提供两种程序编辑的选项，图示的方法可以快速的编仪提供两种程序编辑的选项，图示的方法可以快速的编辑循环参数，菜单式的文字编辑方法可以输入一些高级的选项。在辑循环参数，菜单式的文字编辑方法可以输入一些高级的选项。在PCR PCR 运行过程中，按下

13、一个键，可以在不同的显示模式下切换，显示运行过程中，按下一个键，可以在不同的显示模式下切换，显示运行程序各个步骤，图示实时显示模块、热盖和样品温度，以及剩余运行程序各个步骤，图示实时显示模块、热盖和样品温度，以及剩余的运行时间。的运行时间。 文字模式显示程序的步骤，并可以输入高级的选项文字模式显示程序的步骤，并可以输入高级的选项 “Screen”Screen”键可以在文字和图示之间切换；图示模式显示循环的示意键可以在文字和图示之间切换；图示模式显示循环的示意图，可以修改温度和时间图，可以修改温度和时间 在在PCR PCR 运行过程中，图示模式显示模块、热盖和样品温度运行过程中，图示模式显示模块

14、、热盖和样品温度 四、正面图解四、正面图解五、使用方法五、使用方法1、开机：打开开关，自我检查（“self-testing”）后视窗上显示主页面。2、装样品：向已有样品的0.5ml离心管中加入 0.3ml的液态石蜡油，防止液体样品蒸发。逆时针扭转齿轮打开PCR仪的盖子。进行一次PCR可装载12个0.5ml离心管，因为0.5ml离心管比较粗，所以相邻的两个管子要隔着一个空格。装好样品后顺时针旋转齿轮盖上盖子。 打钩的空格可放0.5ml离心管3、如果要运行已经编好的程序：则直接选择“run”按Proceed，用箭头键选择已储存的程序，若选择“run”，按proceed，则开始执行程序；若选择“vi

15、ew”,则预览程序步骤。4、如果要输入新的程序：则在主菜单上用箭头键选择NEW，按Proceed。1）命名新的程序：最多8个字母，输入后按Proceed确认。2）输入程序条件：名字输入、按Proceed后则可以输入热盖温度，然后可以输入反应容量（1-100L）。3）选择程序步骤：选择“TEMP”后按Proceed,“1=”后输入0-99之间的任意温度，按Proceed后输入持续时间，再按proceed，然后选择“yes”“no”或“option”；当需要斜度的时候就选择“GRAD”，按proceed，输入一个较低的温度值后按proceed，再输入一个较高的温度、再按proceed，选择持续时间

16、，最后选择“yes”“no”“option”。4）循环步骤：选择”GOTO”，输入程序应该循环回到的步骤数（如，要回到第2部，就按2），按proceed，再输入循环次数，按proceed。 5）结束程序：完成编写程序后选择“END”。此程序还可被储存。5、输入完成的程序后，到按cancel回到RUN菜单，选择新编写的程序，开始运行。6、其它：用pause可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。按Cancel可停止运行的程序、或返回上一菜单。 六、设置一个六、设置一个PCRPCR体系：体系： 一般分为一般分为8 8步：步：1、预变性：可用94，5min。2、变性：一般用94，30s。3、退火：

17、温度自定，30s2min。4、延伸：一般72，对于2kb，1min；2kb，每增加1kb加1min。5、循环数：一般2535个循环。6、最终延伸：72，515min。7、保存：4，时间设为0。(屏幕将会显示FOREVER)8、END。屏幕显示：屏幕显示： NEW： Lid：100 （程序的名字） Vol：50L 1=94.0 5:00 2=94.0 0:30 3=56.0 0:30 4=72.0 0:30 5=GOTO 2， 30 TIMES 6=72.0 5:00 7=4.0 FOREVER 8=END七、注意事项七、注意事项1、不要拉齿轮以打开PCR仪，这样会损坏仪器。2、仪器内至少要装8

18、个离心管，并且要均匀放置；4个在中间，另外4个离心管四个角上的空格各一个。3、仪器内可一次放12个0.5ml离心管；最外周的空格不能放离心管，避免随坏扩增效果。4、转齿轮时不要多于3/4圈。5、要用石蜡油来封闭样品，不能用硅酮油，因为这样会损坏样品。6、按pause后或中途关掉电源而又重启后，可继续原程序的操作。1 为了尽量减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.11.5A。在此范围内颗粒的干扰相对较小，结果稳定。样品的浓度不能过低或者过高。2 混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值；3 混合液中不能有气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈；4 必须使用相同

19、的比色杯测试空白液和样品，否则测定浓度结果差异太大；5 换算系数和样品浓度单位选择要一致；6 不能采用窗口磨损的比色杯；7 样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积（50ul）；8 使用时避免接触比色杯的光面。低温保存箱的使用低温保存箱的使用使用方法设备安装后必须静置至少24小时以上才能通电。在通电时，要先打开机器后背电控箱上的充电电池开关（从机器背后可以看到）注：不打开该开关，通电后会有电池电量低报警。使用方法初次开机运行时，将温度设在-40，达到设定温度后稳定运行8小时以上，再将温度设在-70 ，达到-70 后稳定运行24小时后，再根据需要将温度继续调整到要求温度，达到设定温度后稳定运行24

20、小时，若运行正常则空箱运行完成。使用方法按操作2确认保存箱运行正常后，可以向箱内存放-40以下冷冻物品，同时调整设定温度，使设定温度高于冷冻物品温度3，稳定运行8小时后，再分阶段降温。每次存放物品不能超过1/3箱体容量，达到设定温度并正常运行24小时后，再放入另1/3 箱体容量物品，按上述方法降温。降温过程中尽量不要开门，否则会造成温度上升。使用方法使用时环境温度超过28时，需开空调或打开门窗给环境降温。如果环境温度超过32，低温保存箱设置自动进入保护程序，最低只能设置-82，建议此环境时使用时间不超过10小时。环境温度超过32的情况下，禁止使用低温保存箱，否则易烧毁压缩机。 实验室一般都将温度控制在25注意事项注意事项保存箱内禁止放入易燃、易爆的危险品和强腐蚀性的酸、碱等物品。保存箱一旦切断电源，需待五分钟以上方可重新接通，以免压缩机或系统损坏。维护保养，必须拔下电源插头。切勿滚压或损坏电源线。注意事项注意事项在放入物品前，请确认该物品适合于低温储存。严禁一