鸡新城疫LaSota株油乳剂灭活疫苗抗体消长规律的研究-

1、摘要用鸡新城疫LaSot a 株接种10日龄SPF 鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活后与10号白油佐剂混合乳化制成油乳剂灭活疫苗。抽取其中三批,接种14日龄非免疫鸡100羽,4d 后检测抗体,以后每隔1周或2周采血检测N D -H I抗体,并于抗体水平为2l og 2、4l og 2、6l og 2左右时攻毒。结果表明,免疫后4d 即能检测出抗体,之后逐渐上升,至第4周抗体水平达到高峰且较稳定,然后缓慢下降,150d 后H I 抗体降至临界值以下。攻毒结果表明,能使鸡抵抗强毒攻击的抗体临界值为6l og 2。关键词新城疫灭活疫苗抗体鸡新城疫又名亚洲鸡瘟或伪鸡瘟,广泛分布于世界各地,是由新城疫病毒感

2、染引起的一种高度接触性致死性传染病。新城疫病毒属副粘病毒科,副粘病毒亚科,腮腺炎病毒属。近几年来,新城疫疫苗的普及使用有效地控制了鸡新城疫的发生,高发病、高死亡的急性典型新城疫病已很少发生。1材料与方法1.1材料1.1.1新城疫种毒:制苗用种毒为鸡新城疫LaSot a 株,由中国兽医药品监察所提供。攻毒用毒株为LaSot a 株由中国兽医药品监察所提供。1.1.2新城疫N D -LaSot a 阳性血清及抗原:由中国兽医药品监察所提供。1.1.3试验用鸡胚:试验用SPF 鸡胚由北京梅里亚维通实验动物技术有限公司提供,经检验该鸡胚无N D 和A I 抗体。1.1.4试验用鸡:14日龄非免疫健康易

3、感鸡,由广东大华农动物保健品有限公司动物房提供。1.1.5疫苗:将新城疫LaSot a 株病毒用生理盐水500倍稀释,尿囊腔内接种10日龄SPF 鸡胚,收获感染鸡胚液,经0.20%甲醛灭活18h ,与10号白油佐剂混合乳化制成。该制作过程在广东大华农动物保健品有限公司G M P 车间内进行,取其中三批,批号为060104、060105、060106备用。1.1.6攻毒试验:攻毒试验在肇庆大华农生药品有限公司新兴灭活疫苗厂动物房负压隔离器中进行。1.2方法1.2.1疫苗接种:取14日龄健康易感鸡100羽,颈部皮下注射N D -LaSot a 油乳剂灭活疫苗,每羽注射0.20m l ,于免疫后分别

4、在4、7、10、14、21、28、35、42、49、56、70、84、98、110、120、135、150、180天随机取8羽鸡,翅静脉采血,在室温中离心,析出血清,-20保存、备用。1.2.2H I 抗体检测方法:参照中华人民共和国兽用生物制品质量标准(二00一年版进行。1.2.3攻毒方法:根据抗体水平检测结果,将H I 抗体效价按2l og 2、4l og 2、6l og 2左右的鸡随机分为3组,每组8羽,翅静脉注射10倍稀释的N D -LaSot a 株毒,每羽鸡注射0.20m l,同时设非免疫鸡作为对照组,观察并记录结果。2结果2.1疫苗免疫后的抗体消长规律经新城疫油乳剂灭活苗免疫后第

5、4天可检测出H I 抗体,所占比例为25.00%(2/8;免疫后1014d ,H I 抗体6l og 2者由25.00%(2/8上升到75.00%(6/8;免疫后21d ,平均H I 抗体效价为7.50l og 2;免疫后2835d 为H I 抗体达到高峰时段,平均H I 抗体效价为8.25l og 2;免疫后98180d ,H I 抗体逐渐下降,免疫后120150d ,H I 抗体6l og 2的比率由75.00%(6/8下降到25.00%鸡新城疫LaSota 株油乳剂灭活疫苗抗体消长规律的研究527400广东大华农动物保健品有限公司靖宁华中农业大学动物医学院陈关平诊断和治疗,建立相应的治疗

6、体系,结合免疫预防体系是必不可少的。免疫是群体,治疗则主要是针对个体。只有个体的健康才能保证群体的健康。个体的健康得不到及时处理,弱毒就会变成强毒,贻害群体。所以,治疗是必要的,也是必须及时的。防和治是一个统一体,密不可分。2.9树立共同协作理念指导下的快速应急处理体系的建立出现疫情后,建立快速的应急体系,是有效及时扑灭疫情的有效手段。所以必须建设完善的应急方案,便于有效的领导和物资准备以应对不测风云,包括紧急预案的制订、启动,紧急屠宰等。总之,一个有效的防疫体系的建设,必须遵循系统论的观点,在以上九个体系共同、完整协调和密切的配合下才能有效的发挥作用,缺失其中一个,都有可能是功亏一篑。所以我

7、们必须从各个方面入手,只有每个体系都做好尽善尽美,才可能做到万无一失。参考文献1规模养猪最新流行疫病防治技术.代广军主编.中国农业出版社2现代无公害养猪.杨中和、方旭主编.中国农业出版社3瘦肉型猪饲养管理及疫病防治.徐有生主编.中国农业出版社4集约化猪场疫病防治.林绍荣广东科技出版社!-40-(2/8,至180dH I 抗体平均值仅为2.88l og 2。(见表1表1疫苗免疫后的抗体消长规律2.2攻毒结果分别于H I 效价在2l og 2左右(免疫后7d 左右或180d 前后、4l og 2左右(免疫后10d 前后或150d 前后、6l og 2左右(免疫后14d 或120135d时,用N D

8、 -LaSot a 株毒株在负压隔离器内进行攻毒。结果为H I 效价在2l og 2左右时,隔离器内8羽试验鸡全部死亡,症状表现为全身黏膜和浆膜出血;在4l og 2左右时,8羽试验鸡有5羽呼吸困难、下痢和伴有神经症状,其它正常;6l og 2左右时,试验鸡未出现发病与死亡。(见表2表2免疫后不同抗体水平攻毒结果(单位:羽HI 效价攻毒剂量攻毒鸡数死亡鸡数正常鸡数2log 20.20ml8804log 20.20ml 8536log 20.20ml 8083讨论3.1从表中的数据来看,新城疫N D -LaSot a 株油乳剂灭活苗在免疫后4d 即能检测出抗体,至28d 达到高峰,高峰期抗体水平

9、比较平稳且维持时间长,至120d 抗体水平降至临界线以下,至180d 下降至2.88l og 2,降幅较大,这可能与疫苗中的抗原含量有关,油苗注入体内由于佐剂存在减缓抗原的降解速度,使抗原徐徐释放,不断地刺激机体产生抗体,但经过一个长时间后抗原利用完则抗体水平迅速下降。3.2从攻毒试验结果发现,只有当H I 抗体水平在6l og 2时,才能有效防止N D -LaSot a 株病毒的发病,因此建议当H I 抗体水平6l og 2时,应通过加强免疫来提高新城疫H I 抗体水平,从而有效抵抗新城疫病毒的感染。3.3从该实验结果中可看出未经弱毒疫苗免疫过的14日龄鸡用该疫苗注射后14d 产生免疫力,免

10、疫期可达4个月。在实际生产中,一般要对雏鸡用弱毒活疫苗进行免疫,当再次使用N D -LaSot a 株油乳剂灭活苗注射后7d 可产生免疫力,免疫期为12个月。3.4根据N D -LaSot a 株灭活疫苗抗体消长规律以及攻毒试验结果,我们可以用来参考制定合理的免疫程序,使预防工作更加完善,从而有效地防止新城疫疾病的发生。参考文献1张晓根、汪德刚、邢钊主编.畜禽免疫防制手册M .中国农业大学出版社,2000.2王明俊.兽医生物制品学M .北京:中国农业出版社,1996.3郑明球.家畜传染病实验指导M .北京:中国农业出版社,2001.4710142128354249567084981101201351501801HI (log 200366898897787766632HI (log 200245779988778766533HI (log 201266788888876675544