_环糊精包合广藿香和橘红挥发油的工艺研究

1、 2 中国科学院中国植物志编辑委员会 1中国植物志 M 1树脂上的吸附特性 ,可作为类似化合物在该型号大孔吸附树脂上吸附 、解吸特性的借鉴 。并且本实验 在对树脂吸附特性研究的基础上 ,完成了短瓣金莲 花黄酮部位大孔树脂纯化分离的工艺研究 ,为短瓣金莲花黄酮有效部位的工业生产及进一步开发利用 提供有力依据 。在实验过程中发现 ,树脂静态吸附时的最佳条 件并不一定符合生产工艺要求 ,如静态吸附时最佳 样品浓度一般较低 ,但工业化生产时 ,样品浓度过低会导致上样费时费力 ,因此在工艺研究时应对某些 条件重新筛选 。参考文献 1 李良千 1毛茛科金莲花亚科植物的地理分布 J 1植物北京 :科学出版社

2、 , 1997: 701 3 冉先德 1中华药海 (上部 ) M 1第 1版 1哈尔滨 :哈尔 滨出版社 , 1993: 3551 4 王昌荣 1金莲花颗粒剂治疗急性呼吸道感染 60例疗效 观察 J 1浙江中西医结合杂志 , 2003, 13 ( 3) : 17921801 5 周欣 ,范国荣 ,吴玉田 1 短瓣金莲花总黄酮及指标性成 分的体外抗氧化活 性研究 J 1 中 药 材 , 2007 , 30 ( 8 ) :1000210021 6 林秋凤 ,王凌云 , 李 药兰 , 等 1AB 28 大孔吸附树脂分离 长瓣金莲花总黄酮 J 1暨南大学学报 : 自然科学与医 学版 , 2003, 2

3、4 ( 1) : 55 25812环糊精包合广藿香和橘红挥发油的工艺研究穆启运 ,阮新民 3(广州中医药大学第二临床医院 ,广东 广州 510120 )摘要 目的 :考察用 2环糊精包合护心颗粒剂中广藿香和橘红的挥发油的工艺条件 。方法 : 以包合物的收率 和油转化率的综合评分作为评价指标 ,选择挥发油与 2环糊精的用量比 、2环糊精与加水量之比及研磨时间为主4要影响因素 ,进行 L9 ( 3 )正交试验 ,优化包合挥发油的工艺条件 。结果 :最佳包合工艺条件为挥发油与 2环糊精的用量比为 1 10 ,2环糊精与加水量之比为 1 3 ,研磨时间为 40 m in。结论 : 广藿香和橘红挥发油的

4、 2环糊精包合工 艺合理可行 。关键词 广藿香 ;橘红 ;挥发油 ;2环糊精 ;包合物中图分类号 : R943 文献标识码 : A文章编号 : 1001 24454 ( 2009) 0921454 204S tudy on the In c lu s ion of Vo la t ile O il Ex tra c ted from Herba Pogo stem on is an d E xoca rp ium c itr i by2C yc lodex tr inMU Q i2yun, RUAN X in2m in( The Second Co llege of C lin ica l M

5、 ed ic ine of Guangzhou U n ive rsity of TCM , Guangzhou 510120 , Ch ina)A b stra c t O b jec tive: To inve stiga te the inc lu sion techno logy cond ition s of vo la tile o il extrac ted from H e rba Pogo stemon is and Ex2 oca rpium citri in H uxin Fang granu le s by2cyc lodextrin1 M e thod s: The

6、o rthogona l de sign wa s u sed1 The p e rcen t conve rsion of the o il in inc lu sion and the yie ld of inc lu sion comp lex we re the ind ice s to de te rm ine the fac to rs con ta in ing the ra tio of the o il to2cyc lodextrin, the ra tio of2cyc lodextrin to wa te r and the grind ing tim e of the

7、 m ixtu re of the o il, 2cyc lodextrin and wa te r1 R e su lts: The op tim um con2 d ition s fo r the inc lu sion we re a s fo llow s: the ra tio of the o il to2cyc lodextrin wa s 1 10 , the ra tio of2cyc lodextrin to wa te r wa s 1 3,and the grind ing tim e wa s 40 m in1 Conc lu sion: The op tim um

8、 cond ition s fo r the inc lu sion we re steady and fea sib le1Key word s H e rba Pogo stemon is; Exoca rpium citri rub rum; Vo la tile o il; 2cyc lodextrin; Inc lu sion comp lex广藿 香 Pogostem on cablin ( B laco ) B en the 为 唇形科刺蕊草属植物干燥的地上部分 。味辛 ,性微温 ,归脾 、胃 、肺经 ,其功能为芳香化浊 、开胃止呕 、发表解暑1 , 2 。广藿香的挥发油 ,又称

9、百秋李油 ,是广藿收稿日期 : 2009 201 219基金项目 :“十一五 ”国家科技支撑计划“重大疑难病中医防治研究 ”项目 ( 2006BA104A00 )作者简介 :穆启运 ( 1943 2) ,男 , 硕 士 , 副教 授 , 主要 研究方 向 : 天然 药物 化学及 新药开 发 ; Te l: 020 281887233 231103 , E2m a il: m uq iyun ya2hoo1cn。3 通讯作者 :阮新民 ,教授 ,博士生导师 ; Te l: 020 287351238 , E2m a il: rxmm d yahoo1com。Jou rna l of Ch ine

10、 se M ed ic ina l M a te ria ls第 32卷第 9期 2009年 9月·1455·香的主要药用成分 。橘红为芸香科植物橘 C itrus re2ticu la te B lanco 及 其 栽培 变种 的 干 燥 的 果 皮1 。其 中化橘红 Exoca rpium citri Grand is干 燥的 果 皮为 道 地的橘红药材 。其味辛 、甘 、苦 ,性温 ,归肺 、脾经 ,有 散寒 、燥湿 、利气 、消痰的功效3 。广藿香 、橘红都富含挥发油 ,是护心颗粒组方中 起调脾护心 、补益心气 、化痰祛瘀的重要成分 。护心 方是根据邓铁涛先生治疗冠

11、心病的心脾相关理论拟 定的4 ,临床用于冠心病血运重建 (冠脉搭桥术或 冠脉支架术 ) 后的中医干预治疗 , 取得了良好的效果5 , 6 。护心颗粒是护心方经现代制剂技术精制而 成 。在颗粒剂的制备和存放过程中 ,为了减少挥发 油成分的损失 ,保持药效 ,本文采用正交试验法 ,优 选 2环糊精包合广藿香 、橘红挥发油的最佳工艺条 件 ,以提高制剂的工艺水平 。1 仪器与材料和包合物 ,至无挥发油气味 , 40 减压干燥 ,即得 。表 12环糊精包合挥发油正交试验因素水平表因素(A )(B )( C)研磨时间/m in水平挥发油 2环糊精/ (mL g)2环糊精 水/ ( ( gg)1231 6

12、1 81 101 31 41 5204060214包合物的收率 、油转化率及空白回收率的测定按 2005 年版中国药典一部附录挥发油的测定法进行 。取干燥的包合物 5 g,精密称定 ,置于圆底 烧瓶中 ,放沸石数粒 ,加蒸馏水 150 mL ,连接挥发油测定器 ,加热至沸 ,并保持微沸 6 h,停止加热 ,放置30 m in,读数 ,得挥发油体积 。同时测定挥发油空白 回收率 :用 1100 mL 挥发油 、2环糊精 5 g替代包合物 ,在相同条件下测定挥发油的体积 。计算包合物 的收率及油转化率和空白回收率 。包合物的收率 ( % ) =包合物得量 / (投入的 2环糊精量 +投入挥发油量

13、) ×100 % ; 油转化率 ( % )=包合物中回收的挥发油量 / (投入的挥发 油量 × 空白回收率 ) ×100 % ;空白回收率 ( % ) =回收的挥发油量 /投入的挥发油量 ×100 % ; 本试验挥发油的 空白回收率为 85100 % 。综合评分 =包合物的收率×012 +油转化率 ×018。正交试验结果见表 2 , 方 差分析结果见表 3。1 11仪器挥 发 油 测 定 器 (广 州 市 医 药 公 司 ) ;B S224 S型电子天平 (北京赛多利斯仪器系统有限公司 ) ; zk282A 型 真空 干燥 箱 (上

14、海 市 实 验 仪 器 厂 ) ; BJ 2D SC热分析系统 ( PE公司 ) ; GC 217A 气相色谱仪(岛津 ) 。1 12药 材广 藿 香 (产 地 广 东 ) 、橘 红 (产 地 浙江 ) ,由安徽省亳州市药材总公司药材公司供应 ,均符合 2005 年版中国药典一部各药材项下的规定 。1 13试剂 2环糊精 中国医药 (集团 ) 上海化学 试剂公司生产 ;其他试剂均为分析纯 。2方法与结果L ( 34 )正交试验方案及结果表 29因素评价指标2 11广藿香 、橘红挥发油的制备列 号按配方比例取包合物 的收率/ %D油转化 率 / %综合 评分ABC( )空白广藿香 、橘红粉末 ,

15、精密称定 ,混合 ,加 6 倍量水 ,浸泡 1 h,连接挥发油测定器 ,按 2005年版中国药典一 部附录挥发油测定法提取 6 h。挥发油用无水硫酸钠干燥 ,备用 。所得产品为淡黄色液体 ,相对密度为019407。2 12 正交试验设计 根据预试验及文献报道7 , 8 , 影响研磨法制备 2环糊精包合挥发油工艺的因 素 主要有挥发油与 2环糊精的用量比 、2环糊精与加 水量之比 、研磨时间等 。本文以 2环糊精包合物的91110971178613188175871718515094165911308411982135771656417187106801006518884171771657015

16、9841108113269103871408115469108861708013873131123456789 RSSj1112223332341452381742401391195612712312312325812024312421211415132368106123231312234128242103237127314510118123312231238195237182234174118101754收率和油转化率作为综合评价指标 ,进行 L9 ( 3 )正交试验 。因素 、水平见表 1。2 13 包合物的制备 按表 2 安排的实验条件 ,精 密量取 1100 mL 挥发油 ,用等量无水

17、乙醇稀释 ;再精密称取适量的 2环糊精置研钵中 , 加 入 适量 水 , 边 研磨边用滴管将挥发油的乙醇稀释液滴入 2环 糊 精与水的混合物中 ,快速研磨至规定时间 ,置冰箱中 冷藏 24 h,抽滤 ,依次用适量水及无水乙醇洗涤研钵215最佳包合工艺条件表 2中的极差 R 值和表3的方差分析表明 ,影响因素主次为 B > C > A。研磨法制备 2环糊精包合物 ,加水量 (B ) 是最主要的Jou rna l of Ch ine se M ed ic ina l M a te ria ls第 32卷第 9期 2009年 9月·1456·影响因素 ( P <

18、 0101 ) 。这是因为 2环糊精与挥发油及水的混悬液浓度越稀 ,2环糊精与挥发油分子的 接触机会越小 ,包合物形成的越少 。另外 ,人工研磨 时加水量大 ,混悬液体浓度小 ,研磨效果也差 。A 和 C 为次要因素 , 对包合过程影响不明显 。A2 和 A3相差不大 ,在大量制备时 , 可以选用 A2 。最佳的包 合工艺条件为 A3 B1 C2 。即挥发油与 2环糊精的比为110,2环糊精与水之比为 13,研磨时间为 40 m in。失水和油蒸发过程较长 , 峰值为 246195 ;2环糊精有 2 个吸热峰 , 峰温分别为 113162 和 311188,前者为失去吸附水分的吸热峰 ,后者为

19、脱水吸热 峰 ;挥发油的 2环糊精包合物有 1 个吸热峰 ,峰温为330120 ;2环糊精与挥发油的混合物有 2 个吸热峰 ,失去吸附水和挥发油的吸热峰连在一起 ,峰温为157109 ,脱水吸热峰在 313176 。D TA 曲线表 明包合物已经形成 ,见图 1。表 3方差分析表离差 平方和方差来源自由度均方F值 显著性AB C误差合计612736810610118017538512622228311418410351090138812648412913139< 0101注 : F0105 ( 2 , 2 ) = 19100 , F0101 ( 2 , 2 ) = 991002 16 包

20、合工艺稳定试验 在优化后的包合工艺条 件下重复试验 3 次 ,测定包合物的收率 ,考察提取工 艺的稳定性 。结果 (见表 4 ) 表明 , 3 次试验包合物的收率无明显差异 ,所筛选的工艺条件稳定性较好 。图 1 不同样品的示差热分析曲线 ( D TA )11挥发油 ; 212环糊精 ; 31包合物 ; 412环糊精与挥发油的混 合物表 4包合工艺的稳定性试验 ( n = 3 )219 包合物中挥发油的验证 2环糊精包合挥发油后 ,挥发油成分有无变化 ,用气相色谱法检查 。取 未包合的和从包合物中回收的挥发油 ,测定它们的 气相色谱图 (图 2 ) ,从图 2 可见 ,包合前后挥发油成分的气相

21、色谱基本相同 ,包合对挥发油成分无明显 影响 。挥发油2环糊 用量精量包合物 得量/ g包合物 的收率/ %试验 号平均值/ %R SD/ %/ g/ g12019407 1018146019407 1018139111109610191229316692183931050160 3 019407 1018137 1018908 92166 2 17 包合工艺的放大试验 取挥发油 120 mL ,加入 80 mL 无水乙醇稀释 ,摇匀 ,备用 。取 2环糊精 1 kg,加水 3 kg,搅匀后置于 JM 50 型胶体磨中 ,边研磨边加入挥发油乙醇液 ,加完后再研磨 10 m in,放料 , 得挥

22、发油 2环糊精包合液 。用 2 kg水研磨清洗胶 体磨 ,洗液并入包合液中 。挥发油 2环糊精包合液在 155 156 喷雾干 燥 ,每隔 1 h 收粉 1 次 ,粉碎 ,过 80 目筛 ,备用 。收粉率 : 85 % ,水分 5 % 。2 18包合物形成的验证包合物形成与否 ,可采 取多种方法进行验证 ,如显微镜法 、相溶解度法 、薄 层色谱法 、紫外可见分光光度法 、红外分光光度法 、 热分析法等 ,本实验采用示差热分析 (D TA ) 。制备4 份样品 : 挥发油 、2环糊精 、挥发油的 2环糊精包 合物 、挥发油与 2环糊精的混合 物 , 测定 它 们的 示 差热分析曲线 ,比较包合前

23、后热吸收峰的变化 ,可以 看到 4份样品的吸热峰的位置和强度各不相同 : 挥 发油只有 1 个吸热峰 ,为宽峰 ( 131 265 ) ,表明图 2 包合前后挥发油成分的气相色谱A1包合前的挥发油 ; B1包合物回收的挥发油3讨论2环糊精包合挥发油 ,产物的综合评价指标涉 及到包合物的收率 ( % )和油转化率 ( % ) ;两者的定 义文中已经给出 。文献中有时将油转化率称作包合 率 , 其 实 包 合 率 的 含 义 还 可 以 表 达 如 下 : 包 合 率 ( % ) =回收的挥发油量 / (投入的 2环糊精量 ×空Jou rna l of Ch ine se M ed ic

24、 ina l M a te ria ls第 32卷第 9期 2009年 9月·1457·白回收率 ) ×100 % ,即已包含的挥发油占投入的 2环糊精量的质量分数 。另外还有含油率 ( % ) =回 收的 挥 发 油 量 / (包 合 物 得 量 ×空 白 回 收 率 ) ×100 % ,即挥发油在包合物中的质量分数 。这里给出 定义的包合率与含油率在数值上相差不大 ,但它们与包合物的收率和油转化率数值相差悬殊 ,不宜同 时计入综 合评 价 指标 。由于得 到的 包合 物可 能 不 纯 ,其中有未包合挥发油的 2环糊精 ,因而包合物的 收率在

25、综合评价指标中占 20% ,油转化率占 80%。本实验采用研磨法包合 ,便于工业生产 。在放大试验中 ,因为胶体磨的研磨强度大 ,可以适当缩短 研磨时间和增大加水量 。挥发 油的 2环 糊 精包 合 液的稀稠还要根据喷雾干燥的要求调节 。放大试验 结果表明 ,正交试验的结果基本适用于生产 。采用 2环糊精包合技术 ,能减少挥发油的逸散 ,使挥发油粉末化 ,便于制成各种剂型 。参考文献 1 国家药典委员会 1中华人民共和国药典 S 1一部 1北京 :化学工业出版社 , 2005: 33, 162 , 2721 2 刘亮峰 ,黄晓丹 ,蔡大可 ,等 1广藿香油及藿香油的研究 概况 J 1中国中医药

26、信息杂志 , 2009, 16 ( 2) : 10021021 3 刘如良 ,马秀红 1 橘红与化橘红的药材应用鉴别 J 1光明中医 , 2008 , 23 ( 8 ) : 1096210971 4 尹克春 ,吴焕林 1邓铁涛教授调脾护心法治疗心力衰竭 经验 J 1新中医 , 2002 , 34 ( 5 ) : 112121 5 阮新民 ,江巍 ,林宇 ,等 1调脾护心法改善冠状动脉搭桥 术患者临床疗效及生存质量的研究 J 1中国中西医结合杂志 , 2006 , 26 ( 1 ) : 28 2321 6 阮新民 ,林宇 ,江巍 ,等 1调脾护心法改善冠状动脉桥术 患者生存质量的研究 J 1中医

27、杂志 , 2006, 47 ( 8 ) : 586 25901 7 宫淑艳 ,石春生 ,张炳吉 ,等 1包合技术在中药制剂中的 应用 J 1中华临床医学卫生杂志 , 2005, 3 ( 11) : 36 2381 8 易延逵 ,陈志良 1环糊精包合中药复方中挥发性成分研究 J 1南方医科大学学报 , 2006 , 26 ( 9 ) : 1337213401致谢 :示差热分析由中山大学测试中心测试 :气相色谱由中国科学院广州分院测试中心色谱室测试 ; 包合工艺的放大试验在天江药 业有限公司进行 ,特表谢忱 。广西刺楸茎皮中主皂苷成分提取工艺研究杨月 1 ,杨新平 2 ,刘笑甫 1 ,蒋小军 1(

28、桂林医学院 11天然药物教研室 ; 21有机药物化学教研室 ,广西 桂林 541004 )摘要 利用正交试验设计 ,用乙醇回流法提取广西刺楸茎皮中的总皂苷 ,并采用大孔吸附树脂和正丁醇分别 对其进行分离 ,通过纯度分析和得率计算 ,探索其主皂苷成分的最佳提取工艺 。实验结果表明采用大孔吸附树脂 法分离主皂苷成分得率为 1132 % ,而采用正丁醇法分离其得率为 1105% ; 且大孔吸附树脂法的产品外观颜色优于 正丁醇法 。采用大孔吸附树脂法提取分离该植物的主皂苷成分 ,成本低 ,操作简便易行且具有非常强的实用性 。关键词 大孔吸附树脂 ;正丁醇 ;正交试验 ;主皂苷成分中图分类号 : R28

29、412文献标识码 : A文章编号 : 1001 24454 ( 2009 ) 0921457203S tud ie s on Ex tra c t ion Proce ss of the M a in Sa pon in C on st ituen ts from the S temBa rk of Ka lopa n a x sep tem lobu s in Guan gx iYAN G Yue1 , YAN G X in2p ing2 , L IU X iao2fu1 , J IAN G X iao2jun1( 11D ep a rtm en t of N a tu ra l M ed ic ina l; 21D ep a rtm en t of M ed ic ina l Chem istry, Gu ilin M ed ica l Co llege, Gu ilin 541004, Ch ina)A b stra c t U sing o rthogona l exp e rim en t de sign, the to ta l sapon