腐烂茎线虫不同群体同工酶表型与生物学特性研究

1、腐烂茎线虫不同群体同工酶表型与生物学特性研究    英文题名 Research on Isozyme Phenotypes and Biological Characteristic of Ditylenchus Destructor  关键词 腐烂茎线虫; 甘薯; 同工酶; 生物学特性; 杂交; ITS-PCR-RFLP; 耐寒力; 英文关键词 Ditylenchus destructor; sweet potato; isozymes; biological characteristic; hybrid; ITS-PCR-RFLP; col

2、d tolerance; 中文摘要 甘薯茎线虫病是我国甘薯生产上重要病害之一,该病病原腐烂茎线虫(Ditylenchus destructor)为我国检疫性病害。腐烂茎线虫最早在马铃薯上发现,该线虫除了危害甘薯外,还危害花生、茄子、薄荷、甜菜和草莓等作物。本实验以来自国内的10个腐烂茎线虫群体为研究材料,做了以下几方面的研究： 对国内不同地理来源的10个腐烂茎线虫群体进行同工酶表型研究。结果表明：1)在对DeJL和DeLJ 2个群体的同工酶梯度分析中发现,碾样200、400、600条线虫的10l提取液中,只有碾样400条线虫提取液对DeJL和DeLJ表型研究均有较好的染色效果；2)10个群体苹

3、果酸脱氢酶(MDH)酶谱分为2个酶型,酶型的相对迁移率(Rf值)约为0.21、0.26；酶型的Rf值约为0.21、0.26、0.31,而酯酶染色不成形；3)结合MDH表型和核糖体ITS区核酸序列分析,将腐烂茎线虫划分为3个不同遗传类型。 对国内不同地理来源的10个腐烂茎线虫群体在两个中抗甘薯茎线虫病品种(苏薯9号、宁薯9-9)上测定腐烂茎线虫群体致病力、繁殖力、雌雄比(性比)、甘薯薯块鲜重损失量。结果表明：1)在P=0.05水平上,各. 英文摘要 Ditylenchus destructor is one of the important diseases in sweet potato pr

4、oduction of our country. Ditylenchus destructor is the pathogeny, and it is not allowed  摘要 7-9 ABSTRACT 9-10 前言 11-12 上篇 文献综述 12-31     第一章 腐烂茎线虫的发生、分布及危害 13-18         1 分类地位 13         2 形态描述 13-14  

5、60;      3 生物学特性 14-15         4 地理分布 15         5 寄主范围与致病性 15-16         6 危害症状及经济重要性 16         7 致病机理与综合防治 16-18    

6、第二章 植物线虫的分类鉴定方法与分类现状 18-27         1 形态学分类鉴定 18-19             1.1 光学显微镜技术 18             1.2 电子显微镜技术 18-19         2 鉴别

7、寄主反应 19         3 生物化学和分子生物学鉴定 19-24             3.1 同工酶鉴定 20             3.2 分子生物学鉴定 20-24         4 特异引物的应用 24-25 

8、0;       5 植物线虫分类的现状评述 25-27     第三章 我国国内腐烂茎线虫研究现状 27-31         1 腐烂茎线虫所表现的特殊变异性 27-28         2 关于腐烂茎线虫两类基因型的相关报道 28-29         3 对线虫分子系统学研究中ITS区的认识

9、 29         4 研究目的与意义 29-31 下篇研究内容 31-60     第一章 腐烂茎线虫不同群体同工酶表型研究 32-37         1 材料与方法 33-34             1.1 腐烂茎线虫群体纯化培养 33       

10、;      1.2 同工酶分析及Rf值的计算方法 33-34         2 结果与分析 34-35             2.1 腐烂茎线虫同工酶梯度分析 34             2.2 腐烂茎线虫不同群体同工酶分析 34-35  &

11、#160;      3 结论与讨论 35-37     第二章 腐烂茎线虫不同群体生物学特性研究 37-44         1 材料与方法 38-39             1.1 腐烂茎线虫群体纯化培养 38           &

12、#160; 1.2 致病性测定与不同致病群体的划分 38-39             1.3 线虫繁殖力、性比和甘薯鲜重损失量的计算 39             1.4 结果统计与数据处理 39         2 结果与分析 39-43      

13、60;      2.1 腐烂茎线虫不同群体致病力、繁殖力、雌雄比(性比)生物学指标及甘薯鲜重损失量的测定 39-40             2.2 腐烂茎线虫生物学指标值相关性分析 40-41             2.3 宁薯9-9的抗性效果 41-42      

14、60;      2.4 腐烂茎线虫不同致病群体的划分 42-43         3 结论与讨论 43-44             3.1 腐烂茎线虫群体致病性比较与致病力分化 43             3.2 腐烂茎线虫遗传背景与致病性的关系 43-

15、44     第三章 腐烂茎线虫生物学杂交研究 44-54         1 材料与方法 45-47             1.1 线虫种群 45             1.2 幼虫及雄虫的准备 45-46      

16、60;      1.3 生物学杂交实验 46             1.4 线虫DNA的提取 46-47             1.5 ITS区域的PCR扩增 47             1.6 杂交后代RFLP

17、酶切 47             1.7 结果统计与数据处理 47         2 结果与分析 47-52             2.1 腐烂茎线虫基因型间杂交结果 47-50           &#

18、160; 2.2 甘薯腐烂茎线虫基因型内杂交结果 50-51             2.3 杂交后代的ITS-PCR-RFLP分析 51             2.4 杂交后代ITS区限制性酶切 51-52         3 结论与讨论 52-54     第四章 腐烂茎线

19、虫耐寒力测定 54-60         1 材料与方法 55-56             1.1 腐烂茎线虫群体纯化培养 55             1.2 冷冻处理方法 55-56           

20、  1.3 冷冻线虫的活力观察与计数 56             1.4 数据处理 56         2 结果与分析 56-57             2.1 腐烂茎线虫在-20和-70的存活率 56-57        

21、 3 结论与讨论 57-60 全文结论 60-62 参考文献 62-70             2.4 杂交后代ITS区限制性酶切 51-52         3 结论与讨论 52-54     第四章 腐烂茎线虫耐寒力测定 54-60         1 材料与方法 55-56    

22、         1.1 腐烂茎线虫群体纯化培养 55             1.2 冷冻处理方法 55-56             1.3 冷冻线虫的活力观察与计数 56           &

23、#160; 1.4 数据处理 56         2 结果与分析 56-57             2.1 腐烂茎线虫在-20和-70的存活率 56-57         3 结论与讨论 57-60 全文结论 60-62 参考文献 62-70         

24、60;   2.4 杂交后代ITS区限制性酶切 51-52         3 结论与讨论 52-54     第四章 腐烂茎线虫耐寒力测定 54-60         1 材料与方法 55-56             1.1 腐烂茎线虫群体纯化培养 55    &#

25、160;        1.2 冷冻处理方法 55-56             1.3 冷冻线虫的活力观察与计数 56             1.4 数据处理 56         2 结果与分析 56-57   &

26、#160;         2.1 腐烂茎线虫在-20和-70的存活率 56-57         3 结论与讨论 57-60 全文结论 60-62 参考文献 62-70             2.4 杂交后代ITS区限制性酶切 51-52         3 结论与

27、讨论 52-54     第四章 腐烂茎线虫耐寒力测定 54-60         1 材料与方法 55-56             1.1 腐烂茎线虫群体纯化培养 55             1.2 冷冻处理方法 55-56             1.3 冷冻线虫的活力观察与计数 56             1.4 数据处理 56         2 结果与分析 56-57