小鼠白细胞介素(17(IL)17)说明书

1、小鼠白细胞介素( 17(IL ) 17)说明书小鼠白细胞介素 -17(IL-17) 酶联免疫测定 试剂盒使用说明 本试剂盒仅用于研究目的检测范围 :3PG/mL-120 pg/mL目的: 本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样品中白细胞介素 -17 的含量实验原理本试剂盒采用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素 -17 的水平 用纯化的小鼠白细胞介素 -17 抗体包被微孔板，制备固相抗体。将白 细胞介素 -17(IL-17) 依次加入包被有单克隆抗体的微孔中，然后与辣 根过氧化物酶标记的白细胞介素 -17(IL-17) 抗体结合，形成抗体 -抗原 - 酶标记的抗体复合物。彻底清洗后，加入基

2、质 TMB 进行显色 TMB 在辣根过氧化物酶的催化下变成蓝色， 在酸的作用下变成黄色。 颜色 的深度与样品中的白细胞介素 -17 呈正相关。用酶标仪在 450 纳米波 长下测定吸光度 (吸光度值 )，用标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素 -17 的浓度。试剂盒由 1 2 3 4 5 6 30 倍浓缩洗涤液酶标试剂酶标包被 板样品稀释液显影剂A溶液显影剂B溶液20毫升X1瓶6毫升X1瓶1 2孔8条6毫升X1瓶6毫升X1瓶6毫升X1瓶6毫升X1瓶6毫升X1 瓶 /瓶 789 10112 终止液标准 (240 皮克 /毫升 )标准稀释液说明书密封板 膜密封袋 6 毫升 X1 瓶 0.5 毫升 X1

3、瓶 1.5 毫升 X1 瓶 1 部分 2 件 1 96T 256组成标本采集后应尽快提取， 提取应根据相关文件进行， 提取后应尽快进行实验如果不能立即进行试验，样品可以在-20 C下保存，但应避免重复冻融2。因为NaN3抑制辣根过氧化物酶（HRP）活性，所以不能检测到含有 NaN3 的样品。操作步骤1。标准稀释 :该试剂盒提供原始标准样品的一个标准样品。用户可 以根据下图在小试管中稀释120皮克/毫升 60皮克/毫升30皮克/毫升15毫克/毫升 7.5毫克/毫升150 微升标准稀5 号、 4 号、 3 号、 2 号、 1 号、 150 微升原标准品、 释液、 150微升 5号标准品、 150微

4、升标准稀释液、 150微升 4号标准品、 150 微升标准稀释液、 150 微升标准稀释液、 150 微升标准稀释液、 150微升标准稀释液、150 微升 3 号标准品、150 微升样品添加:分别设置空白孔 （空白对照孔不添加样品和酶标试剂，其他步骤相 同）、标准孔和个待测样品孔将50卩标准物质准确加入酶标包被板，将40卩样品稀 释液加入待测样品孔，然后加入 10 口1待测样品（样品最终稀释5 倍） 添加样品将样品添加到酶标板孔的底部， 尽量不要接触孔壁， 轻轻摇 动并混合均匀。3。孵育:用密封平板膜密封平板后，在 37C孵育30分钟4配液:用20 倍蒸馏水稀释 20 倍浓缩洗涤液，备用5。清

5、洗 :小心取出密封板膜，弃去液体，旋干，用清洗液填满每个 孔，静置 30 秒后弃去，重复5 次，拍干6。酶添加：除空白孔外，向每个孔中添加 501酶标记试剂7孵化:操作同 38.洗涤:操作同 59。显色:在每个孔中加入一个显影剂 A501然后加入一个显影剂B50 口1轻轻摇匀，显影15 分钟。10。终止:在每个孔中加入终止剂 50卩J终止反应（此时蓝色垂直变 成黄色 ）11。测定:在 0， 450 纳米的空白空调波长下，依次测量每个孔的吸 光度（外径值）应在加入溶液后 15 分钟内进行测定操作程序概述 :计算以标准物质的浓度为横坐标，以吸光度值为纵坐标，在坐标纸上画 出标准曲线， 根据样品的吸

6、光度值从标准曲线中找出相应的浓度； 乘 以稀释倍数；或者用标准物质的浓度和 OD 值计算标准准曲线的线性回归方程，将样品的 OD 值代入方程，计算样品的浓 度，乘以稀释倍数，得到样品的实际浓度注1。 试剂盒应在使用前从冷藏环境中取出，并在室温下平衡15-30 分 钟。如果酶标涂层板在打开后没有用完，应将其放入密封袋中储存。2。浓缩洗涤液可能会结晶和沉淀。稀释时可在水浴中加热以帮助溶解，洗涤不会影响结果。3。加样的每一步都应使用加样器，并应经常检查其准确度，以避免 测试误差。最好将一次样品添加的时间控制在 5 分钟内。如果样品数 量较多，建议使用放电枪添加样品。4。请在每次测量的同时制作一条标准曲线，最好是制作多个孔。如 果样品中待测物质的含量过高 （样品的外径值大于标准孔第一个孔的外径值 ），首先用样品稀释剂稀释一 定次数（n次），然后测量。计算时，请将其乘以总稀释数（Xi>5）5.密圭寸 膜只使用一次，以避免交叉污染。 6.请保持基底远离光线。7。严格遵循说明。测试结果必须