果糖二磷酸钠

1、果糖二磷酸钠Guotang ErlinsuannaFructose Sodium DiphosphateC6HiiNa30i2P2 406.06C6H11Na3012P2 ? 8H2O 550.17本品为果糖-1,6-二磷酸三钠盐或果糖-1,6-二磷酸三钠盐八水合物。按无水物计算，含C6H11Na3012P2不得少于 95.0% o【性状】本品为白色或类白色的结晶性粉末；微有特臭，味微咸；果糖二磷酸钠（CeHnNa3012P2）极具引湿性。本品在水中易溶，在乙醛、乙醇或丙酮中几乎不溶。【鉴别】 （1）取本品适量，加水制成每 1ml中含50mg的溶液，作为供试品溶液。另取果 糖二磷酸钠对照品适量

2、，加水制成每1ml中含50mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版二部附录V B）试验，吸取上述两种溶液各10注 分别点于同一微晶纤维素薄层板（板厚约0.5mm）上，以正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-10%氨溶?夜（35:20:22.5:15:7.5 ）为展开剂， 展开后晾干，喷以盐酸间苯二胺乙醇溶液（取盐酸间苯二胺0.36g,加76%乙醇溶液10ml使溶解），在105 c加热30分钟使显色，供试品溶液所显主斑点的颜色与位置应与对照品溶液的主斑 点相同；继续再喷以丙酮 -12.5%铝酸钱溶液-盐酸-高氯酸（86:8:3:3）混合溶液，供试品溶液所 显斑点的颜色与位置应与对照品溶

3、液的主斑点相同。（2）取本品约50mg,置堪期中，加无水碳酸钠2g,混合后，炽灼至灰化，放冷，加水10ml 使溶解，加硝酸使成酸性，滤过，滤液加铝酸钱试液，加热，即发生黄色沉淀；加过量氨试液， 沉淀溶解。（3）本品的红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致（中国药典 2010年版二部附录IV C）。（4）本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（中国药典2010年版二部附录出）。【检查】 酸度 取本品1.0g （以CeHnNa3012P2计算），加水10ml溶解后，依法测定（中 国药典2010年版二部附录V1 H）, pH值应为5.56.5。溶液的澄清度与颜色取本品1.5g （以CbHnNa3012P2计算），

4、加水10ml溶解后，溶液应澄清无色。如显色，与黄色、橙黄色或黄绿色2号标准比色液（中国药典 2010年版二部附录IX A第一法）比较，不得更深。游离磷酸盐 取本品20mg （以C6H11Na3012P2计算），精密称定，置25ml量瓶中，加水15ml 使溶解；另精密量取标准磷酸盐溶液精密称取经105c干燥2小时的磷酸二氢钾0.1433g,置1000ml量瓶中，加硫酸溶液（3- 10） 10ml与水适量使溶解，并加水稀释至刻度，摇匀，临用 时再加水稀释10倍，即每1ml相当于10Mg的PO48ml,置另一 25ml量瓶中，各精密加铝酸钱 硫酸试液2.5ml与1-氨基-2-泰酚-4-磺酸溶液（取无

5、水亚硫酸钠5g,亚硫酸氢钠94.3g与1-氨基-2-蔡酚-4-磺酸0.7g,充分混合，临用前取此混合物1.5g,加水10ml使溶解，必要时滤过）1ml,加水至刻度，摇匀，在 20c放置3050分钟，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版二部附录IV A）,在740nm的波长处测定吸光度，按无水物计算，含游离磷酸盐（以PO4计）不得大于0.4%。氯化物 取本品0.10g （以C6H11Na3012P2计算），依法检查（中国药典 2010年版二部附录 VMA）,与标准氯化钠溶液 3.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.03%）。硫酸盐 取本品0.50g （以C6H11Na3012P2计算）

6、，依法检查（中国药典 2010年版二部附录 WB）,与标准硫酸钾溶液 2.5ml制成的对照液比较，不得更浓（0.05%）。有关物质 取本品，加水制成每 1ml中含0.1g （以CeHnNa3012P2计算）的溶液，作为供试 品溶液；精密称取 6-磷酸果糖对照品适量，加水制成每 1ml中含0.5mg的溶液，作为杂质对照 品溶液（1）;精密称取果糖对照品适量，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为杂质对照品溶液（2）;精密称取6-磷酸葡萄糖对照品适量，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为杂质对照品溶液（3）;另取6-磷酸果糖对照品、果糖对照品、6-磷酸葡萄糖及本品适量，加水制成每1ml中

7、各含6-磷酸果糖0.25mg、果糖0.25mg、6-磷酸葡萄糖0.25mg与本品2mg的混合对照溶 液。照薄层色谱法（中国药典 2010年版二部附录V B）试验，吸取上述 5种溶液各5 口分别点 于同一微晶纤维素薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水-丙酮-10%氨溶?夜（35:20:22.5:15:7.5）为展开剂，展开，晾干，喷以间苯二酚乙醇盐酸溶液（取间苯二酚 0.5g,力口 80%乙醇溶液100ml使溶 解，加盐酸5ml,摇匀），在105c加热5分钟使显色，立即检视。混合对照溶液应显示四个清晰 分离的斑点。供试品溶液如显杂质斑点，不得多于 3个，并分别应与杂质对照品溶液（1）、（2） 或（3）

8、主斑点的位置相同，其斑点颜色与相应的对照品溶液主斑点比较，不得更深（0.5%）。水分 取本品，照水分测定法（中国药典2010年版二部附录皿M第一法）测定，含水分不得过 10.0% （CeHnNa3012P2 ）或应为 24.0%27.0% （CeHnNa3012P2 ? 8H2O）。铁盐 取本品1.0g （以C6H11Na3012P2计算），加水35ml溶解后，力口稀盐酸溶液3ml,过硫酸钱30mg与30%硫氟酸俊溶液 3ml,加水稀释至 50ml,摇匀，加正丁醇 10ml,振摇，放置， 醇层如显色，与标准铁溶液1.0ml制成的对照液比较，不得更深（0.001%）。重金属 取本品1.0g （以

9、C6HnNa3012P2计算），加醋酸盐缓冲液（pH3.5） 2ml与水适量使 溶解成25ml,依法检查（中国药典 2010年版二部附录皿H第一法），含重金属不得过百万分之 十。神盐 取本品2.0g （以C6H11Na3012P2计算），加盐酸5ml与水23ml溶解后，依法检查（中 国药典2010年版二部附录皿J第一法），应符合规定（0.0001%）。蛋白质 取本品1.0g （以C6H11Na3012P2计算），加水10ml溶解后，逐滴加入 30%磺基水杨 酸溶液2ml,不得产生浑浊。异常毒性 取本品，力口注射用水制成每1ml中含16mg （以QHnNa3012P2计算）的溶液，依法检查（中国

10、药典2010年版二部附录XI C）,按静脉注射法缓慢注射，应符合规定（供注射用）。降压物质 取本品，加灭菌注射用水制成每1ml中含50mg （CbHnNa3012P2计算）的溶液，依法检查（中国药典2010年版二部附录XI G）,剂量按猫体重每1Kg注射1ml,应符合规定。（供 注射用）热原 取本品，加注射用水制成每1ml中含100mg （以CeHiiNa3012P2计算）的溶液，依法检查（中国药典2010年版二部附录XI D）,剂量按家兔体重每1kg缓缓注射6ml,应符合规定（供 注射用）。过敏反应 取本品，加灭菌注射用水制成每1ml中含100mg （以C6HliNa3012P2计算）的溶液

11、，依法检查（中国药典2010年版二部附录XI K）,应符合规定。（供注射用）无菌 取本品7.0g,加灭菌水50ml使溶解，用薄膜过滤法处理后， 依法检查（中国药典2010 年版二部附录XI H）,应符合规定（供注射用）。可见异物 称取本品5份，每份5g （以C6H11Na3012P2计算），分别置洁净透明的适宜玻璃 容器内，加水溶解并稀释至 50ml,依法检查（中国药典2010年版二部附录IX H）5份供试品中， 均不得检出明显可见异物。如检出微细可见异物，应不得过10个。如仅有1份不符合规定，另取10份同法复试，均应符合规定（供注射用）。【含量测定】取本品适量，采用适宜的酶法测定（附件1或2

12、）。【类别】心血管系统疾病辅助用药；水电解质平衡类药。【贮藏】密封，在阴凉处保存。【制剂】（1）果糖二磷酸钠口服溶液（2）果糖二磷酸钠片（3）果糖二磷酸钠注射液（4）果糖二磷酸钠胶囊（5）注射用果糖二磷酸钠附件1.混悬液酶试剂法（1）试剂 盐酸三乙醇胺缓冲液（0.4mol/L , pH7.6）:取盐酸三乙醇胺 18.6g,加水200ml溶 解，加乙二胺四乙酸二钠3.7g,溶解后，用2mol/L氢氧化钠溶液（约18ml）调节pH值至7.6,加水稀释至250ml。或取三乙醇胺17.5g,加水约200ml,加盐酸4ml,混匀，加乙二胺四乙酸二钠 3.7g,溶解后，用2mol/L氢氧化钠溶液或 2mo

13、l/L盐酸溶液调节 pH值至7.6,加水稀释至250ml。 滤过后4 c保存，一周内使用。还原型辅酶I （NADH ）溶液：取NADH二钠盐7mg,溶于2ml盐酸三乙醇胺缓冲液 （pH7.6） 中。4c保存。3-磷酸甘油脱氢酶-磷酸丙糖异构酶混悬液 （GDH/TIM ）:取3-磷酸甘油脱氢酶混悬液 （GDH ） 与磷酸丙糖异构酶混悬液 （TIM ）适量，用3.2mol/L硫酸钱溶液（pH6）稀释成每1ml约含GDH310U 和TIM1550U 的溶液。4c保存。醛缩酶混悬液（ALD）:取醛缩酶混悬液（ALD）适量，用3.2mol/L硫酸钱溶液（pH6）稀 释成每1ml中约含ALD90U的溶液。

14、（2）供试品溶液的制备 取本品适量，精密称定，加水溶解并制成每1ml约含0.2mg （按无水物计算）的溶液。（3）测定法精密量取盐酸三乙醇胺缓冲液（pH7.6） 3.0ml,供试品溶液0.1ml,还原型辅酶I溶液0.05ml,甘油磷酸脱氢酶/磷酸丙糖异构酶混合混悬液0.02ml,置1cm吸收池中，摇匀，放置15分钟；另取盐酸三乙醇胺缓冲液（pH7.6） 3.15ml,甘油磷酸脱氢酶/磷酸丙糖异构酶混合混悬液0.02ml,置另一吸收池中，摇匀，作为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2005年版二部附录IV A）,在340nm波长处测定供试品溶液的吸光度A1，再在每池中加醛缩酶混悬液0.02m

15、l,摇匀，于20c25c放置约5分钟，在340nm波长处测定供试品池的吸光度，直至吸 光度基本不变读取吸光度A?。求出吸光度差值 AA （ AA=0.9937AA2）,按下式计算，即得。c八 AA 3.19M406.06M稀释倍数 彳”果糖二磷酸钠含量%):3- 1006.29 1 03 20.1 W式中 0.9937 为 3.17/3.19;3.19为样品池中溶液的最终体积（ml）;6.29父103为还原型辅酶I （NADH）的摩尔吸收系数；2为果糖二磷酸钠反应系数；406.06为果糖二磷酸钠（C6H11Na3012P2）的分子量；0.1为供试品溶液加入体积（ml）;W为供试品的取样量（mg

16、）（以CeHnNa3012P2计算）。附件2固体复合酶试剂法(1)试剂 空白酶溶液：取固体复合酶(酶活力测定方法见注1,活力应符合规定)60mg,用盐酸三乙醇胺缓冲液(取三乙醇胺17.5g,加水约200ml,加盐酸4ml,混匀，加乙二胺四乙酸二钠3.7g,溶解后，用2mol/L氢氧化钠溶液或 2mol/L盐酸溶液调节 pH值至7.6,加水稀释 至250ml。滤过后4c保存，一周内使用。)溶解并稀释至20ml。垂熔漏斗过滤，4c保存，两天 内使用。测定酶溶液：取空白酶溶液10ml,加还原型辅酶I ( NADH ) 3.0mg,溶解后4c保存，两天内使用。(2)供试品溶液的制备取本品适量，精密称定

17、，加水溶解并制成每1ml约含0.4mg (按无水物计算)的溶液。(3)测定法精密量取盐酸三乙醇胺缓冲液2ml,测定酶溶液 1ml,置石英吸收池中；另精密量取上述缓冲液 2ml,空白酶溶液1ml置另一吸收池，作为空白，摇匀，静置15分钟，照紫外-可见分光光度法(中国药典2010年版二部附录IV A),在340nm波长处测定吸光度 A1。各池再分别精密加入供试品溶液0.1ml,摇匀，于20c25c放置10分钟，在340nm的波长处测定，直至吸光度基本不变，读取吸光度A2。求出吸光度差值 AA (AA= A1 1.0333A2K按下式计算，即得。果糖二磷酸钠含量(%) = 3.0 406.06稀释倍

18、数1006.29 103 20.1 W式中 3.0为加入供试品溶液前样品池中溶液的体积( ml);6.29 * 103为还原型辅酶I (NADH)的摩尔吸收系数；2为果糖二磷酸钠反应系数；406.06为果糖二磷酸钠(C6H11Na3012P2)的分子量；0.1为供试品溶液加入体积(ml);W为供试品的取样量(mg)(以C6H11Na3012P2计算)。注1：固体复合酶的活力测定固体复合酶 系指供果糖二磷酸钠含量测定专用的复合酶试剂，含醛缩酶(ALD , Aldolase)、磷酸丙糖异构酶 (TIM , Triose-phosphate isomerase)和磷酸甘油脱氢酶 (GDH , Glycerinphosphate dehydrogenase)。复合酶活力系指每1mg酶每1分钟催化果糖二磷酸钠的pg数。每1mg固体复合酶活力应不得低于40/试剂的制备(1)盐酸三乙醇胺缓冲液(0.4mol/L , pH7.6):见含量测定项下。(2)复合酶溶液：取固体复合酶0.1g,用盐酸三乙醇胺缓冲液(p