小儿皮肤血管瘤中肥大细胞的定量研究和超微结构分析

1、    小儿皮肤血管瘤中肥大细胞的定量研究和超微结构分析        一、材料与方法 我院19941997 年小儿皮肤脉管瘤皮肤活检标本139例，根据Mulliken提出的分类法，其中增生期毛细血管瘤22例（内皮细胞增生，肥大），消退期毛细血管瘤23例（内皮细胞数量减少；血管间富含纤维脂肪组织）；增生期混合型血管瘤20例，消退期混合型血管瘤24例；海绵状血管瘤26例，淋巴管瘤24例。年龄11天9岁，平均年龄1.23岁，标本来自体表皮肤。正常皮肤对照6例，年龄1个月6岁。全部

2、标本经甲醛固定，石蜡包埋，切片厚度46 m。采用Czaba阿新蓝藏红染色法（AB-S法）进行肥大细胞染色。阿新蓝藏红混合液染色时间为半小时。每例随机选择40个高倍视野（×400）进行观察，并计数各型肥大细胞每个高倍视野平均数。统计资料用T检验。29例用常规方法制超薄切片，透射电镜观察肥大细胞形态。其中增生期毛血管瘤9例，消退期毛细血管瘤6例，增生期混合型血管瘤7例，消退期混合型血管瘤4例，海绵状血管瘤2例，淋巴管瘤1例。共计观察肥大细胞192个。二、结果AB-S法染色显示增生期毛细血管瘤和混合型血管瘤的血管内皮细胞间出现大量肥大细胞。消退期毛细血管瘤和混合型血管瘤富含纤维脂肪组织，肥

3、大细胞明显减少，而增生的毛细血管之间肥大细胞仍较丰富。淋巴管瘤和海绵状血管瘤中肥大细胞很少，仅见于脉管周围及营养血管附近。正常皮肤组织的皮肤附件及毛细血管周围可见少数肥大细胞。各种血管瘤中均以蓝色肥大细胞为多，红色肥大细胞最少，紫色肥大细胞居中。结果见表1。增生期毛细血管瘤与消退期毛细血管瘤相比，t=4.12，t>2.67，P<0.01，差异有非常显著性意义，增生期混合型血管瘤与消退期混合型血管瘤相比，t=2.23，t>2.21，P<0.05，差异有显著性意义，消退期毛细管瘤与海绵状血管瘤相比，t=6.27，t>2.67，P<0.01，差异有非常显著性意义。

4、增生期毛细血管瘤和混合型血管瘤，消退期毛细管瘤和混合型血管瘤各任选10例，将组织切片的Czaba阿新蓝藏红混合液染色时间由30 min延至24 h，切片中染红色的肥大细胞转为蓝色或紫蓝色。电镜观察：各种血管瘤中肥大细胞形态相似。肥大细胞的剖面呈梭形、茄形、卵圆及圆形，表面有绒毛状突起。细胞质内充满分泌颗粒，呈圆或卵圆形，表面有单位膜包裹，大多数分泌颗粒中含电子致密的颗粒状物质，少数见网格状晶体结构，还有少量散在的线粒体。少数肥大细胞胞质可查见高尔基复合体。偶尔找到个别碎屑样脱颗粒现象。很难找到核大、细胞器多、分泌颗粒少的幼稚肥大细胞，肥大细胞外常见胶原纤维。表1各种血管瘤、淋巴管瘤中肥大细胞计

5、数(±s)分类例数肥大细胞增生期毛细血管瘤2230.94±0.11消退期毛细血管瘤2320.48±6.36增生期混合型血管瘤2031.10±14.79消退期混合型血管瘤2422.26±10.67海绵状血管瘤268.83±5.56淋巴管瘤243.29±1.51正常皮肤63.10±1.42三、讨论近年来，许多作者对肥大细胞的增减与血管瘤的消长之间的关系持不同观点。本组实验显示单位面积中肥大细胞与血管瘤内皮细胞的数量成正相关关系。消退期毛细血管瘤和混合型血管瘤组织中纤维脂肪细胞之间肥大细胞明显减少，而增生的毛细血管之间肥

6、大细胞仍较丰富。正常皮肤组织内肥大细胞聚集在血管周围，无血管区域很难找到肥大细胞。这些现象提示肥大细胞与血管瘤的生长有关系。肥大细胞分泌颗粒中的肝素和组织胺能刺激血管内皮细胞迁移、增殖。碱性纤维母细胞生长因子（bFGF）可促进血管瘤生长，而肥大细胞是bFGF的一个主要来源。BFGF和血管内皮细胞生长因子（VEGF）对刺激内皮细胞增殖具有协同作用。肝素可促进bFGF和VEGF与内皮细胞表面各自的受体结合。上述实验结果支持肥大细胞能促进血管瘤生长。雌激素受体、孕激素受体、肥大细胞与血管瘤内皮细胞数量之间呈正相关关系。电镜观察显示本组病例血管瘤中出现的肥大细胞绝大多数是成熟的肥大细胞，不同于有的研究认为血管瘤中肥大细胞大部分是不成熟的，功能小的观点。本实验显示用AB-S法染血管瘤中肥大细胞30 min，大部分肥大细胞为蓝色，少部分为紫色、红色。将染色时间延至24 h，则绝大部分染紫色及红色的肥大细胞转变为蓝色，极少数转为紫蓝色。以往有人认为AB-S法染色所显示的红色肥大细胞为含肝素为主的成熟肥大细胞，而蓝色肥大细胞为含生物胺为主的幼稚肥大细胞。(本文编辑：蔡振国)基金项目：江西省自然科学基金项目（94559）作者单位：邹音（330006江西省儿童医院病理科）钟华生（330006