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1、山楂和山楂叶对大鼠血清中SOD和GSH 作者:张淑华,褚金花,王晖,黄佩力,宣登峰,吴萍,于秋红【摘要】 目的 为研究山楂和山楂叶的抗氧化作用。方法 本实验选用Wistar雄性大鼠作为研究对象。使用高脂饲料喂养的同时,用不同剂量的山楂和山楂叶提取物灌胃。5周后测定大鼠血清中的超氧化物歧化酶(SOD)以及血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;同时对山楂和山楂叶的抗氧化指标进行比较。结果 山楂和山楂叶
2、提取物能增强GSH-Px 的活性,提高SOD的活力;山楂叶GSH-Px的活力高于山楂。结论 本文提示山楂和山楂叶具有抗氧化的作用。【关键词】 山楂和山楂叶;SOD;GSH-PxEffects of haw and hawthorn leaf extracts on serum SOD and GSH-Px in rats【Abstract】 Objective Male Wistar rats were used as experimental subject to investigate the antioxidation effect of haw and hawthorn leaf ex
3、tracts.Methods The rats were feeding on a high-fat diet for 5 weeks, while different doses of the two kinds of extracts were administered respectively by gavage once a day. Then serum SOD and GSH-Px activity were determined.Results It showed that both haw and hawthorn leaf extracts can increase the
4、activity of SOD and GSH-Px,the activity of hawthorn leaf was higher than that of haw.Conclusion It indicates that haw and hawthorn leaf both have an action of antioxidation.【Key words】 haw;hawthorn leaf;SOD;GSH-Px山楂为蔷薇科植物,具有保健与药用的历史,近年来对山楂和山楂叶的化学、药理与临床等研究表明,具有降血压、降血脂的作用,尤其在心血管系统方面有有效的治疗保健和抗衰老作用,因此更加
5、受到人们的青睐。本文用山楂和山楂叶的提取物进行了抗氧化作用的实验研究,为山楂和山楂叶的进一步开发、利用'' >山楂和山楂叶对大鼠血清中SOD和GSH-Px的影响 提供可靠的科学依据。1 材料与方法1.1 山楂和山楂叶的提取 山楂和山楂叶均采自北京房山地区。山楂用清水和去离子水浸洗干净,用消毒纱布擦干水分、去核、称重,加20倍去离子水煮1h。用四层纱布过滤,取一定量冷冻干燥,称重,计算含量。稀释成0.06g/ml、0.18g/ml、0.30g/ml的提取液备用1。山楂叶用清水和去离子水浸洗干净,自然晾干、去茎根、取叶部分称重,加20倍去离子水浸煮1h后过滤,取一定量冷冻干燥
6、,称重,计算含量。稀释成0.03g/ml、0.09g/ml、0.15g/ml的提取液备用。1.2 动物处理与分组 实验动物选用SPF级雄性Wistar大鼠,体重(200±50)g,由首都医科大学实验动物中心提供),在清洁、通风、恒温、恒湿、无污染的SPF环境下生长。适应性饲养大鼠1周后,按体重随机分为8组,每组10只。空白对照组:饲以基础饲料。 高脂对照组:饲以高脂饲料(79%基础饲料+1%胆固醇+10%蛋黄酚+10%猪油)2。山楂低剂量组:饲以高脂饲料,每天按0.8ml/100g bw灌胃0.06g/ml的山楂提取液。山楂中剂量组:饲以高脂饲料,每天按0.8ml/100g bw灌胃
7、0.18g/ml的山楂提取液。山楂高剂量组:饲以高脂饲料,每天按0.8ml/100g bw灌胃0.30g/ml的山楂提取液。山楂叶低剂量组:饲以高脂饲料,每天按0.8ml/100g bw灌胃0.03g/ml的山楂叶提取液。山楂叶中剂量组:饲以高脂饲料,每天按0.8ml/100g bw灌胃0.09g/ml的山楂叶提取液。山楂叶高剂量组:饲以高脂饲料,每天按0.8ml/100g bw灌胃0.15g/ml的山楂叶提取液。连续给药35天,自由进食饮水,5周后禁食一天宰杀,断头取血,分离血清。1.3 试剂、仪器 SOD、GSH-Px试剂盒购自南京建成生物工程研究所;旋转蒸发仪,冷冻干燥仪,紫外可见分光光
8、度计(日本岛津公司UV-2450),恒温水浴箱。1.4 实验方法 血清SOD活力测定:黄嘌呤氧化酶法3,血清GSH-Px的活力的测定:DTNB法2。1.5 统计学方法 采用SPSS for Windows 10.0统计软件进行统计学处理,计量数据进行单因素方差分析。2 结果2.1 山楂叶对大鼠血清SOD和GSH-Px的影响 见表1。注:与高脂对照组相比*P<0.05;与空白组相比P<0.05由表可见,山楂叶剂量组和空白剂量组与高脂对照组间SOD差异无显著性(P>0.05);高脂对照组GSH-Px值明显低于空白对照组,并且差异有显著性(P0.05),山楂叶的各组GSH-Px与高
9、脂对照组相比均有所增加,并有显著性差异(P0.05),山楂叶高剂量组与空白对照组差异无显著性(P0.05),中、低剂量组GSH-Px低于空白对照组,差异有显著性(P0.05)。2.2 山楂对大鼠血清SOD、GSH-Px的影响 见表2。注:与空白组相比P0.05,与高脂对照组相比*P0.05 表结果表明:经单因素方差分析F=3.228,P0.05,各组间有显著性差异。进一步进行两两比较,高脂对照组SOD值低于空白对照组且差异有显著性(P0.05),山楂各剂量组与空白对照组SOD值差异无显著性(P0.05),山楂高、中剂量组能够增加SOD活性,与高脂对照组相比差异有显著性(P0.05),山楂低剂量
10、组与高脂对照组差异无显著性(P0.05)。经单因素方差分析F=375.33,P0.01,各组间差异有显著性。进一步进行两两比较,高脂对照组值GSH-Px低于空白对照组且差异有显著性(P0.05),补充山楂后能增加GSH-Px活性,山楂各剂量组GSH-Px高于高脂对照组,差异有显著性(P0.05);但山楂各剂量组GSH-Px还是低于空白对照组且差异有显著性(P0.05),山楂高剂量组与山楂低剂量组差异有显著性(P0.05)。2.3 山楂与山楂叶对大鼠血清中SOD、GSH-Px的影响的比较2.3.1 山楂与山楂叶对大鼠血清中SOD的影响的比较 见图1。经单因素方差分析F=0.782,P=0.568
11、,各组间无显著差异。2.3.2 山楂与山楂叶对大鼠血清中GSH-Px的影响的比较 见图2。经单因素方差分析F=44.433,P0.01,各组间有显著差异,进一步进行两两比较,山楂叶各组GSH-Px值均高于山楂组,并差异有非常显著性(P0.01)。3 讨论近年来对山楂和山楂叶的作用越来越引起人们的关注:*相同剂量山楂和山楂叶组比较,P0.05注,山楂不仅是一种天然食物,也是草药。山楂和山楂叶的主要化学成分为黄酮类,是公认的最具抗氧化潜力的一类化合物,许多疾病的发生发展与活性氧的产生有关。有望成为低毒高效的抗氧化剂来补充体内抗氧化物的不足,以防治某些活性氧作用所致疾病3,4。体内氧自由基的产生和清
12、除在正常情况下应当是平衡的。如果由于某种原因,使得体内产生的氧自由基过多,或者体内防护、清除和修复能力下降,体内就会出现氧自由基代谢的失衡,就会导致自由基损伤引起疾病的发生。说明体内已无力维持自由基平衡,需要补充外源氧自由基清除剂,帮助维持山楂和山楂叶对大鼠血清中SOD和GSH-Px的影响(3) 欢迎您访问范.文,之.家体内氧自由基的平衡。机体中的抗氧化酶,主要有超氧化物歧化酶(SOD),各种过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和其他血红素蛋白过氧化物酶。这些酶在防治氧代谢物的损伤中具有重要的作用,它们不但协同的防治活性氧的损伤效应,而且相互间还起着保护作用。本研究进一步观察了山楂
13、与山楂叶对大鼠血清中SOD、GSH-Px含量的变化,结果显示山楂叶剂量组和空白剂量组与高脂对照组间SOD活性差异无显著性(P0.05),虽然在统计学上没差异有显著性,但也能看到不同剂量山楂叶SOD活性有增加的趋势。而山楂高、中剂量组与高脂剂量组相比有显著差异。山楂叶的各组GSH-P x活性与高脂对照组相比均有所增加,并差异有显著性(P0.05),山楂各剂量组GSH-Px活性均高于高脂对照组,差异有显著性(P0.05),说明具有抗氧化作用和降血脂作用。与文献报道相同5,6。山楂和山楂叶的抗氧化作用不仅是由于含有维生素C、有机酸、黄酮等还原性物质的
14、直接作用,更重要的是通过增强抗氧化物酶系统的活性而起作用的。通过山楂与山楂叶对大鼠血清中SOD、GSH-Px的影响的比较,我们观察到山楂在增加SOD活力方面作用与山楂叶无显著性差异,但山楂叶增加GSH-Px活力优于山楂。1 高莹,肖莹.山楂及山楂黄酮提取物调节大鼠血脂的效果研究.中国食品卫生杂志,2002,14(3):14-16.2 庞战军,周玫,陈瑗.自由基医学研究方法.北京:人民卫生出版社,2000,118-120,147-151.3 陈四平,臧亚茹.山楂叶的研究进展.承德医学院学报,2003,20(2):164-165.4 林秋实.山楂及山楂黄酮预防大鼠脂质代谢紊乱的分子机制研究.营养学报,2000,22(2)131-135.5 曾昭晖.山楂叶茶水提物抗氧自由基作用的研究.首都医科大学学报,1996,17(2):99-102.山楂和山楂叶对大鼠血清中SOD和GSH-Px的影响(4) 欢
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