紫外分光光度法测定刺五加口服液中总黄酮含量

1、紫外分光光度法测定刺五加口服液中总黄酮含量    关键词:刺五加口服液;总黄酮;紫外分光光度法 刺五加口服液是以刺五加浸膏、蔗糖、苯甲酸钠经加工而制成口服液体剂型。产品具有增强机体免疫力、缓解体力疲劳的功效。其中所含的功效性成分为刺五加总黄酮,经现代药理学研究表明刺五加总黄酮具有增加红细胞膜流动性,从而降低血液粘度,改善血液流变学指标1;刺五加总黄酮还能提高TGF-131蛋白表达,减少脑缺血区细胞凋亡的发生2。 1 仪器、试药与试剂 TU-1901型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);刺五加口服液(哈尔滨仁皇药业股份有限公司,批号:20090

2、801,20090802,20090803);芦丁对照品(中国生物制品检定所,批号:100080-200707,含量92.5%);试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 试验条件的选择 2.1.1 标准溶液的制备精密称取芦丁对照品5.40mg,加甲醇溶解并定容至100ml,即得50g/ml。 2.1.2 测定波长的选择取芦丁对照品溶液2ml置10ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,于200400nm范围内进行紫外扫描,在360nm处有最大吸收。 2.1.3 样品测定波长的选择取2.2.2项下的样品溶液于200400nm范围内进行扫描,在360nm处有最大吸收。 2.2 测定法 2.2.1

3、标准曲线的制备 量取芦丁标准溶液:0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中,加甲醇至刻度,摇匀,于360nm处测定吸收度,以浓度(g/ml)为x,吸收度值为y,计算回归方程为y = 0.0265x - 0.0021,(r=0.9998,n=5),显示在5.08g/ml25.40g/ml的范围内,芦丁的浓度和吸光度呈良好的线性关系。结果如下表1、表2。 2.2.2 样品测定 称取10ml的试样,加乙醇定容至25ml,摇匀后,超声提取20min,放置,吸取上清液1.0ml,于蒸发皿中,加1g聚酰胺粉吸附,于水浴上挥去乙醇,然后转入层析柱。先用20ml苯洗,苯液弃去,然后用甲

4、醇洗脱黄酮,定容至25ml。此液于波长360nm测定吸收度值。按下述公式计算测定结果。见表3。 2.2.3 加样回收率试验 准确称取已知含量的刺五加口服液5ml(含量为148.30mg/100ml),加入芦丁标准品适量,按样品溶液配制方法平行做6次,按样品测定方法测定吸光度,并求得总黄酮含量。计算加样回收率,平均回收率为99.43%,RSD为0.7%(n=6),结果见表4。 2.2.4重现性试验 精密量取5份同一批号(批号:20090801)样品10ml,制成供试液并按含量测定项下操作,结果见表5。 2.2.5稳定性试验 取上述供试品溶液每间隔一定时间测定其吸光度,8小时内测定结果见表6。 3 结果与讨论 本实验通过紫外分光光度法测定刺五加口服液中总黄酮的含量,实验结果表明此方法简单,稳定性与重现性好,可有效控制产品质量。 参考文献 1温筱煦,程丽静等.刺五加总黄酮对小鼠红细胞膜流动性的影响.中国基层医药,2006, 13(8) 2石学魁,王雅