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文档简介

1、情境七：蛋白质和酶任务八：酶活力及其测定知识点:酶活力测定方法举例 课程：化学及生物物料的识用酶活力测定示例-淀粉酶活力测定酶活力测定方法举例 淀粉是葡萄糖分子聚合而成的，它是细胞中碳水化合物最普遍的储藏形式。淀粉除食用外，工业上用于制糊精、麦芽糖、葡萄糖、酒精等，也用于调制印花浆、纺织品的上浆、纸张的上胶、药物片剂的压制等。淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称，自然界中，几乎所有植物、动物和微生物都含有淀粉酶。因此，淀粉酶是研究最多、生产最早、应用最广和产量最大的一种酶。（1）测定原理淀粉酶-淀粉酶可随机地作用于淀粉中的-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘

2、度降低，因此又称为液化酶。-淀粉酶可从淀粉的非还原性末端进行水解，每次水解下一分子麦芽糖，又被称为糖化酶。 淀粉酶催化产生还原糖酶活力测定方法举例淀粉酶催化产生还原糖能使3,5-二硝基水杨酸还原，生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸，其反应如下：碱 性C O O HO HN O2O2NN H2C O O HO HO2N加 热还 原 糖糖 酸+两种淀粉酶特性不同: -淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下迅速钝化。 -淀粉酶不耐热，在7015min钝化。 根据它们的这种特性，在测定活力时钝化其中之一，就可测出另一种淀粉酶的活力。棕红色棕红色二、酶活力测定 在底物淀粉浓度已知而且过量的条件下，反应后加入碘液与未被催化水解的淀粉结合成蓝色复合物。碘-淀粉比色法操作简便迅速 实用 其蓝色深浅与未经酶促反应的空白管比较，从而计算出淀粉的剩余量，再计算出淀粉酶的活力。二、酶活力测定（2）测定方法测定淀粉酶活力的方法有四类，一是测定底物淀粉的消耗量，有黏度法、浊度法和碘-淀粉比色法等；二是生糖

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