乳腺癌细胞NGF信号通路抑制性多肽适配体筛选-生理学专业毕业论文

1、.邹 丽 娟硕 士 学 位 论 文 答 辩 委 员 会 成 员 名 单姓姓名名 职 称称 单 位位 备 注注 吴吴自荣荣 教 授授 华 东 师 范 大 学学 主 席席 钱钱 星星 教 授授 华 东 师 范 大 学学 博 导导 黄黄 静静 副 教 授授 华 东 师 范 大 学学学杜杜冰冰讲师师华 东 师 范 大 学学答 辩 秘 书.;华 东 师 范 大 学硕 士 学位 论 文中 文 摘 要摘要目 的研究乳腺癌 M cF 一7 细胞中神经生长因子(ne rve growthfac tor，N J )信号通 路 ， 筛 选 抑 制 乳 腺 癌 细 胞 增 殖 的 多 肤 适 配 体 ，从 而 探 索

2、 治 疗 乳 腺 癌 的 潜 在 靶 点 。 方 法运用免疫荧光与蛋白质印迹 (we stem blo tting ) 检测 N GF 及其高亲和力受体 T rk A (酪 氨 酸 激 酶 受 体 A ) 在 M C F 一7 细 胞 中 的 表 达 ; 运 用 细 胞 计 数 方 法 (cell co unt ing kit一8 ， C C K 一8) 检 测 不 同浓 度 的 N G F 阻 断 剂 R o 08 一2 7 50 和 酪 氨 酸 酶 阻 断剂 K2 52 a 对 细 胞 增 殖 和 存 活 的 影 响 ;运 用 w estem blotting 检 测 不 同 浓 度 Ro

3、 08 一2 7 50处 理 后 的 细 胞 表 达 活 性 促 分 裂 素 原 活 化 蛋 白激 酶 (acti ve 一m itog en 一activated p rotein kin ases ，active 一M A p K )与 p 53 蛋 白变 化 情 况 ; 运 用 流 式 细 胞 仪 检 测 不 同浓 度 Ro 08 一2 75 0 处 理 后 的 细 胞 凋 亡 情 况 以及 细 胞 周 期 分 布 的变 化 ; 运 用 多 肤 适 配 体 技 术 将5 种 特 异 性 结 合 Ra s 蛋 白不 同位 点 的 多 肤 适 配 体 转 染 M C F 一7 细 胞 ， 并

4、 运 用 C C K 一8 法 检 测 M C F 一7 细 胞 转 染 后 的增 殖 情 况 ，运 用 we stem blotting 检 测 表 达 active 一M A p K 蛋 白与 p 53 蛋 白 的 变 化 ， 以及 运 用 流 式 细 胞 仪 检 测 细 胞 凋 亡 情 况 。结 果 实验结果显示 M cF 一7 细胞同时表达 N GF 及其受体 T奴 蛋白; N GF 阻断剂 R 。08 一2 750 能 够 明显 地 抑 制 细 胞 增 殖 与 存 活 ，并 具 有 剂 量 效 应 ; 经 不 同浓 度 Ro 08 一2 75 0 处 理 细 胞 后 p 一E 双 1

5、/2 表 达 量 上 调 ，p 53 表 达 下 调 ， 细 胞 出现 凋 亡 峰 ，并 出现 S 期 细 胞 含 量 上 升 ，G Z 期 细 胞 含 量 下 降 ; 转 染 的 5 种 多 肤 适 配 体 中 ，p P E R3 9R 能 明 显 抑 制 细 胞 的 增 殖 和 存 活 ， p 53 的 表 达 上 调 ， 并 出 现 显 著 的 凋 亡 峰 ， 然 而p P E R3 9R 对 正 常 背 根 神 经 节 细 胞 D R G (do rsal roo t g an sli on ) 细 胞 没 有 任 何 抑 制 作用 。结 论 乳腺癌 M cF 一7 细胞中存在 N G

6、F 信号通路，当使用特异性的N GF 阻断剂Ro 08 一27 50 处 理 ， M C F 一7 细 胞 的 增 殖 和 存 活 受 到 明 显 抑 制 ， 出 现 S 期 停 滞 与 细 胞 凋 亡 ; 通 过 对 结 合 R as 的 的 多 肤 适 配 体 的 筛 选 ，p P E R3 9R 可 以 明 显 抑 制 M c F 一7 细 胞 的 增 殖 与 存 活 且 引 起 细 胞 的 凋 亡 ，这 个 结 果 可 能 与 引起 p 53 上 调 有 关 。并 且 PP E R 3 9 R 对 存 在 正 常 N G F 信 号 通 路 的 D R G 细 胞 没 有 任 何 抑

7、制 效 应 。提 示 p P E R 3 9R 具 有 突 变 R as 的 抑 制 特 异 性 ， 具 有 进 一 步 深 入 研 究 的 较 大 价 值 。关 键 词 : 乳腺癌细胞 信号通路 神经生长因子 细胞增殖 Ra s 多肤适配体技术犷华 东 师 范大 学硕 士 学位 论 文 英 文 摘 要Ab s tr a C to b jeetive : T o inv estig ate the n erve growt h faetor sign alin g P athw ay in h um an b reast c a n c e r M C F 一7 c e lls，to se l

8、e c t t h e b re a st e a n c e r c e ll P ro lif era ti o n i面 b it or y P e P t id e a P ta m e rs a n d to 助 d t h e P o te n t ia l t h e ra P e u ti c ta rg e t f or b re a d st e a n e e r .M e th o d s : In u n U n o f lu o r e se e n e e a n d w e ste m b lo t tin g m e t h o d to d e te e t

9、 N G F a n d itsreeeP tor T rkA P rotein in M C F 一7 eells:T h e u se o f cell eount in g kit一8(C C K 一8) to d eteett h e e f fe e t o f d if fe re n i c o n e e n tr a tio n s o f N G F a nt a g o u l st R o 0 8 一2 7 5 0 a n d K 2 5 2 a o n c e ll P ro lif era ti o n a n d su rv iv a l ; W e ste m

10、b lo t tin g to d e te c t t h e c h a n g e s o f a c ti v e 一M A P K a n d P 5 3 P r o te i n i n M C F 一7 c e lls b e in g t re a te d w i t h d if fe re n i e o n e e n tr a ti o n s o f R O0 8 一2 7 5 0 ; the u se o f flo w eyto m etry to d eteet the aP o to sis a s w ell as eh an g e s in eelle

11、 y c le d is tri b u t io n o f t h e e e lls w h e n b e in g t re a te d 初 t h d if fe re n t e o n e e n tr a tio n s o f R o 0 8 一2 7 5 0 f o r 2 4 h ; t h e t ra n sf ee tio n te e h n o lo g y w a s u se d to st u d y t h e a c tio n o f 5 sP e c if ie R a s b in d in g P ePt id e aPt am ers o

12、 n M C F 一7 ee lls，an d to d etect the P ro liferatio n ，surv iv al o f M C F 一7 e e lls 2 4 h a ft e r t ra n sf ee tio n ， a s w e ll a s a c tiv e 一M A P K a n d P 5 3 P ro te i n se x P re s sio n a n d a P o t o s is o f M C F 一7 e e lls .R e s u lts : 玩 皿 朋 o f lu o r e s c e n e e re su lts s

13、h o w e d M C F 一7 c e lls e X P re s s N G F a n d itsreceP to r T rk A p rotein ; eell eo Unt in g kit(C C K 一8) sh ow ed that R o 0 8一2 7 5 0 ean i血 b itc e ll P r o lif er at io n a n d su rv iv a l w i t h t he d o sa g e ，W e st撒 b lo t sh o w e d t h a t th e e X P r e s sio n o f a c tiv e 一

14、M A P K in e r e a s e w h ile t h e e X P re s sio n o f P 5 3 d e e re a s e d w i t h t h e d o s a g e ; F lo w eyto m etry re sults su g g e st that R o 0 8 一2 7 5 0 tre ate d c ells aP P e are d aP o P to tie P e ak ，th eeonten t of s 一 ase eells in creased ，an d GZ P h ase eells d ecreased ;F

15、 lu orescen cem ie ro s c o P y sh o w e d th a t t ra n sf ee tio n e f fi e ie n e y w a s a b o v e 7 0 % in M C F 一7 e e lls ，C e lleo Unt in g kit(C C K 一8) sh o w ed that eell P ro liferatio n an d suxv iv al after b ein g tran sfeeted诚 t h P P E R 3 9 R d e c re a s e d s ig n if ie a n tly ;

16、 P e P tid e a P ta m e r P P E R 3 9 R c a n in d u e e t h eeXP ressio n o f P 5 3 an d 51加 fieant cell aP o P to sis ; P P E R3 9 R h av e n o effe et o n n orm alD R G e e lls .C o n e lu s io n : N e r v e g ro w t h f a c to r sig n a iin g P a th w a y e x ists in h u m a n b r e a st e a n e

17、 e r e e lls M C F 一7 . N G F 一sP e e if ie a nt a g o n i st R o 0 8 一2 7 5 0 e a n in h ib it t h e g r o w t h a n d su rv iv a l o f b r e a s t e a n e e r e e ll in v i tro ，a n d in d u e e a p o P to s is 从七ic h m ig h t b e a s s o e ia te d w i t h r e d u e e d ex P ressio n o f P 5 3 an

18、d in ereased ex P ression o f P 一E R K I/2 P ro tein . AP tam er P P E R3 9 Rcan 51加 fieant ly i刊巨b it the P ro liferatio n an d surv iv al o f M C F 一7 eells. A P tam erI I华东 师范大 学硕 士 学位 论 文 英 文 摘 要P P E R 3 9 R e a n in d u e e a P o P to sis o f M C F 一7 e e lls . T h i s re su lt m a y b e e a u

19、 se d b y th ein e re a s e o f th e P 5 3 . A n d P P E R 3 9 R h a d n o in h ib ito r y e f fe e t o n n o r m a 1 N G F s ig n a lin g P a th w a y o f D R G e e lls . It 15 su g g e ste d th a t P P E R 3 9 R h a s m u ta ti o n 一sP e e if ie in hi b itio n o f R a s a n d h a s a la rg e r v a

20、 lu e i n f ur th e r st u d y .K e y w o r d : B reast ean eer cell，5 1助 alin g P ath W 盯 ，N erve o ro wth F aetor，e ellP ro lif era tio n ，R a s，P e P t id e A P ta m e r .1 1 1华 东 师 范大 学硕 士 学位 论 文目 录目录前言 .“.“”.”.1第 一 章N G F 及 其 受 体 在 M C F- 7 细 胞 中 的表 达 .“.“.41材 料 和 方 法 .51.1 实 验 材 料 .，.，.52结 果 .

21、，.，.，.，. 132 .1 M C F 一7 细 胞 的 生 长 曲线 . 132 .2 N G F 与 肠k A 在 乳 腺 癌 细 胞 M C F 一7 中 的表 达 . 142.3 M C F 一7 细 胞 中 肠 k A 蛋 白 的表 达 . 153讨 论 . 巧3 .1 M C F 一7 细 胞 表 达 N GF 与 肠k A 的 意 义 . 巧第 二 章阻 断 N G F 对 M C F 一7 细 胞 的 影 响 .“”.“.“.“.”.”.”“”.171材 料 与 方 法 . 171.1 实 验 材 料 . 171.2 实 验 方 法 . 182实 验 结 果 .202 .1

22、 阻 断 N G F 对 M C F 一7 细 胞 增 殖 的 影 响 .202 .2 阻 断 N G F 对 M C F 一7 细 胞 周 期 的 影 响 .222 .3 阻 断 N G F 对 M C F 一7 细 胞 p 一E RK I/2 与 P5 3 蛋 白水 平 表 达 的 影 响 . 233讨 论 . 243 .1 阻 断 N GF 对 M C F 一7 细 胞 增 殖 的 影 响 .243 .2 阻 断 N G F 对 M C F 一7 细 胞 周 期 分 布 影 响 以及 诱 导 M C F 一7 细 胞 的 凋 亡 . 253 .3 阻 断 N G F 对 M C F 一7

23、 细 胞 表 达 M 叭P K 与 P5 3 蛋 白表 达 的 影 响 . 25第 三 章筛 选 抑 制 乳 腺 癌 细 胞 增 殖 的 多 肤 适 配 体 .”“.”.”.”“.271材 料 与 方 法 .281.1 实 验 材 料 .281.2 实 验 方 法 .，.292实 验 结 果 .咒2 .1 转 染 多 肤 适 配 体 对 M C F 一7 细 胞 生 长 的 影 响 .咒2 .2 转 染 多 肤 适 配 体 对 M C F 一7 细 胞 表 达 acti ve .M 叭P K 与 p 53 蛋 白 水 平 (相 对 tub ulin 含 量 ) 的 影 响 .，.34 2.3

24、转 染 多 肤 适 配 体 对 M C F 一7 细 胞 凋 亡 的 影 响 . 352 .4 转 染 多 肤 适 配 体 对 D R G 细 胞 增 殖 的 影 响 . 362 .5 转 染 多 肤 适 配 体 对 D R G 细 胞 凋 亡 的 影 响 . 383讨 论 . 39综述 .”.411神 经 生 长 因 子 (N GF ) 概 述 .，.，.，.，.，二，.，.，.411.1 N G F 的 发 现 . 411.2 N G F 的 理 化 性 质 .，. 41华 东 师 范大 学硕 士 学位 论 文目 录2N G F 受 体 (N G F Rs ) .··&

25、#183;··············422 .1高 亲 和 力 N G F 受 体 .····················，····422 .2低 亲 和 力 N G F 受 体 .··

26、3;························423N GF 和 N GF R 的 功 能 .·····················

27、3;············433 .1在 神 经 系 统 中 的 作 用 .·····························433 .2在 非 神 经 系 统 中 的表 达 .4

28、33 .3在 乳 腺 癌 组 织 以及 乳 腺 癌 细 胞 各 株 中 的表 达 .434乳 腺 癌 治 疗 现 状 .、.，.··.········445N G F 促 进 乳 腺 癌 的 作 用 机 制 .44参 考 文 献 ”“.”.”.“.”“”.”.”.”.46致谢 ”“”.”.”二”.“.”.“.”.“”.“.”二“.”.”.“.”.50华 东 师 范 大 学硕 士 学位 论 文 月幼 舀月lJ舀乳 腺 癌 是 临 床 最 常 见 的 癌 症 疾 患 之 一 ， 与 其 他 癌 症

29、相 比 ， 乳 腺 癌 主 要 的 患 病 群 体 是 女 性 ， 发 病 率 和 死 亡 率 居 妇 女 各 类 恶 性 肿 瘤 之 首 ， 是 全 球 第 一 位 威 胁 女 性 健 康 、增 加 经 济 负 担 的 疾 患 ( 周 雪 瑞 等 ，20 04) 。近 几 年 ， 由于 生 活 压 力 加 大 ，工 作 节 奏 加 快 ， 我 国 由乳 腺 癌 低 发 区 转 为 高 发 区 ， 乳 腺 癌 已经 成 为 中 国 女 性 第 一 大 杀 手 ， 并 呈 逐 年 上 升 趋 势 。 统 计 数 据 表 明 ， 19 91 年 到 2 0 0 0 年 十 年 间 ， 我 国 城

30、市 妇 女 乳 腺 癌 死 亡 率 上 升 了近 39 % 。 目前 ， 乳 腺 癌 的 患 病 率 正 以 每 年 3 .5% 左 右 的 增 长 率 急 剧 上 升 。 因此 ，重 视 对 乳 腺 癌 的 各 种 研 究 具 有 非 常 重 要 的 意 义 。针 对 早 期 (它、它 期 ) 乳 腺 癌 的 治 疗 方 法 有 外 科 手 术 切 除 、放 疗 、 内 分 泌 治 疗 以 及 使 用 抗 肿 瘤 药 物 进 行 治 疗 (如 紫 杉 醇 、 维 甲 酸 类 等 ) ，但 对 晚 期 乳 腺 癌 的 治 疗 效 果 不 佳 ( 熊 亮 等 ，2 0 06 )。 由于 乳 腺

31、癌 是 一 种 多 基 因 参 与 的 分 子 疾 病 ，基 因 治 疗 乳 腺 癌 应 能 取 得 较 好 的 疗 效 。 乳 腺 癌 的 基 因 治 疗 是 继 手 术 、 放 疗 、 化 疗 和 内分 泌 治 疗 之 后 发 展 的 一 种 新 的 治 疗 手 段 。 近 年 来 ， 由于 对 肿 瘤 分 子 病 理 学 的 认 识 、 重 组 D N A 技 术 的 快 速 发 展 ， 针 对 肿 瘤 的 基 因 治 疗 应 用 于 临 床 已有 可 行 性 。 目前 对 乳 腺 癌 的 基 因 治 疗 主 要 集 中 在 免 疫 基 因 治 疗 、 肿 瘤 抑 癌 基 因 治 疗 、

32、 凋 亡 基 因 治 疗 、 化 学 基 因 治 疗 、 基 因 敲 除 基 因 治 疗 和 抗 血 管 生 成 基 因 治 疗 (王 深 明 等 ，2 0 05 )。其 中 免 疫 基 因 治 疗 是 从 基 因 水 平 通 过 调 动 宿 主 的 免 疫 系 统 来 识 别 并 破 坏 癌 细 胞 。9 0 多 年 前 ， 人 们 已 经 认 识 到 肿 瘤 细 胞 可 以 呈 现 一 定 程 度 的 免 疫 原 性 。 肿 瘤 免 疫 治 疗 的 策 略 是 诱 发 或 加 强 宿 主 体 内 针 对 肿 瘤 细 胞 表 面 的 肿 瘤 相 关 抗 原 (t切m orassociated

33、 ant igen s T A A s ) 的 特 异 性 免 疫 反 应 。 乳 腺 癌 组 织 表 达 多 种 l人A s， 包 括 H E R- 2/ne u (erbB 一2 )、M A G E 一1和 M U C 一1等 ，机 体 针 对 这 些 T A A s产 生 一 定 的 特 异 性 体 液 和 细 胞 免 疫 反 应 。 对 于 肿 瘤 免 疫 反 应 机 制 的 深 人 了 解 有 利 于 采 取 相 应 对 策以 纠 正 其 缺 陷 ( 王 深 明 等 ， 2 0 05 ) 。目前 赫 赛 汀 被 证 实 为 一 种 非 常 有 效 的 抗 乳 腺 癌 药 物 ， 它

34、是 针 对 酪 氨 酸 激 酶 膜 受 体 E rb一B Z ( 表 皮 生 长 因 子 受 体 E G F 受 体 家 族 成 员 ) 的 多 肤 药 物 ，然 而 只 有 2 0 % 的 乳 腺 癌 患 者 过 表 达 E rb一B Z ，这 一 现 象 限 制 了 它 在 治 疗 中 的 广 泛 使 用 (E ric A dria enssenset a l.，2 0 0 8 ) 。因 此 ， 无 疑 地 ， 我 们 需 要 找 到 更 为 广 泛 的 分 子 标 记 以 及 靶 位 点 。华 东 师 范 大 学硕 士 学位 论 文前 言近 几 年 ， 科 学 家 发 现 乳 腺 癌 细

35、 胞 的 生 长 可 以被 其 他 生 长 因 子 调 节 ， 这 些 生 长 因 子 也 能 刺 激 或 抑 制 乳 腺 癌 细 胞 的 增 殖 、 迁 移 与 分 化 ， 从 而 增 快 肿 瘤 的 生 长 和 转 移 。例 如 ，类 胰 岛 素 生 长 因 子 、转 化 生 长 因 子 一a 以 及 成 纤 维 细 胞 生 长 因 子 都 能 刺 激 乳 腺 癌 细 胞 的 增 殖 ，然 而 乳 腺 源 的 生 长 因 子 抑 制 剂 与 转 化 生 长 因 子 一p 能 抑 制 乳 腺 癌 细 胞 的 增 殖 (E thier， 19 95 ; L e B O u rh is et a

36、l.，2 0 0 0) 。近 年 来 ，有 人 发 现 神 经 生 长 因 子 (N G F )是 乳 腺 癌 细 胞 生 存 与 增 殖 有 效 的“催 化 剂 ”(D eseam p s et al.，19 9 5 ，Z o o la )。神 经 生 长 因 子 (ne rve growt h fac tor ，N G F) 是 神 经 系 统 最 重 要 的 生 物 活 性 分 子 之 一 ， 促 进 发 育 中 的 感 觉 神 经 元 及 交 感 神 经 元 的 存 活 及 分 化 ， 营 养 成 熟 的 神 经 元 ， 维 持 其 正 常 的 生 物 学 功 能 ， 参 与 损 伤

37、神 经 再 生 和 功 能 修 复 ， 并 且 参 与 维 系 神 经 、 免 疫 和 内分 泌 系 统 之 间 的 平 衡 (孙 剑 瑞 等 ，2 00 6 )。N G F 在 神 经 组 织 的 生 长 发 育 中 的 作 用 已 较 为 明 确 ，N G F 生 理 功 能 的 发 挥 须 由 其 高 亲 合 力 受 体 Tr kA (衡 rosine kina se ) 介 导 。T rk A 是 N G F 的 功 能 性 受 体 ，为 原 癌 基 因 trk 编 码 的 酪 氨 酸 蛋 白激 酶 家 族 成 员 (卿 素 珠 等 ，2 0 0 5 )。肠 k A 是 由 酪 氨 酸

38、 激 酶 原 癌 基 因trk 表 达 的 一 种 膜 蛋 白组 成 。 当N G F 与 T rk A 结 合 以后 ， 引 起 T rk A 蛋 白特 定 位 点 酪 氨 酸 残 基 磷 酸 化 ， 这 是N G F 发 挥 生 物 效 应 的 始 动 阶 段 (郝 晶 等 ， 19 99 )。活 化 后 的 rrkA 将 接 受 到 的 信 号 向细 胞 内传 送 则 需 通 过 ras原 癌 基 因 编 码 蛋 白P ZI (K oh set al.，199 1) ， 它 是 一 种 小 分 子 的 G 蛋 白 ， 位 于 N G F R( 酪 氨 酸 激 酶 ) 下 游 ， 并 处

39、于生 长 因 子 及 其 受 体 介 导 的 信 号 传 递 系 统 的 中 心 位 置 ， 并 引 起 一 系 列 的 生 物 反 应 。 N G F 除 了 具 有 一 系 列 神 经 营 养 因 子 的 功 能 ， 越 来 越 多 的 文 献 补 充 了 它 的 非 神经 营 养 因 子 的 功 能 ， 它 能 够 影 响 一 些 非 神 经 细 胞 包 括 癌 细 胞 的 生 长 ， 分 裂 ， 分 化与 存 活 。有 研 究 指 出 ，正 常 乳 腺 细 胞 不 表 达 神 经 生 长 因 子 但 表 达 N G F 的 两 种 受 体 ， 但 乳 腺 癌 细 胞 不 仅 表 达 N

40、 G F 的 两 种 受 体 ， 且 出 现 N G F 自分 泌 现 象 (L ee A et aL，1997 ; sim Pson P et aL，1982) 。很 多 实 验 指 出N G F 是 乳 腺 癌 细 胞 的 有 丝 分 裂 素 ， 它 还 能 够 通过 一 条 直 接 的 信 号 通 路 刺 激 细 胞 的 存 活 (sim on D eseam puse et al.，200 2)。D esc别叮p s( 199 8) 指 出N G F 通 过 在 G O 期 供 给 细 胞 以及 缩 短 G l期 ，对 乳 腺 癌 有 直 接 的 促 有 丝分 裂 的 效 果 ，N G

41、 F 对 乳 腺 癌 还 有 抗 凋 亡 的 作 用 。另 外 ，最 新 文 献 报 道 ，当 嫁 接 了 人 类 乳 腺 癌 细 胞 的 免 疫 缺 陷 小 鼠 用 N G F 抗 体 处 理 或 针 对 N G F 的 小 分 子 R N A 干 扰 处 理 都 可 以 抑 制 肿 瘤 的 生 长 与 迁 移 ，这 些 都 预 示 了N G F 是 乳 腺 癌 治 疗 的 潜 在 靶 位 点 (E ri。A dri aenssenS et al.，20 08 ) 。然 而 对 于 N G F 究 竟华 东 师 范 大 学硕 士 学位 论 文 前 言是 如 何 参 与 乳 腺 癌 细 胞 的

42、 生 长 ，N G F 与 肠k A 结 合 之 后 的 下 游 通 路 到 底 有 哪 些 特 异 性 等 ，这 些 方 面 的 研 究 对 探 讨 乳 腺 癌 细 胞 的 发 生 发 展 机 理 ， 抗 乳 腺 癌 药 物 的 研 究 及 新 的 药 靶 的 发 现 具 有 重 要 的 现 实 意 义 。华 东 师 范 大 学 硕 士 学位 论 文第 一 章第 一 章N G F 及 其 受 体 在 M C F 一7 细 胞 中 的 表 达神 经 营 养 因 子 是 指 一 类 能 支 持 神 经 元 生 存 和 诱 导 神 经 突 起 生 长 的 化 学 物 质 ， 神 经 细 胞 在 其

43、 发 育 过 程 中 ，细 胞 的 存 活 、迁 移 、生 长 、分 化 、与 其 他 细 胞 建 立 功 能 性 联 系 、甚 至 损 伤 后 神 经 元 的 存 活 及 再 生 、老 年 退 行 性 病 变 等 均 受 这 类 物 质 影 响 ，神 经 营 养 因 子 的 失 常 或 不 足 ，可 能 是 导 致 某 些 神 经 疾 患 或 神 经 再 生 障 碍 的 原 因 ( L ev i一M o nia cii R ， 19 8 7 ) 。至 今 发 现 的 神 经 营 养 素 (N T S ) 是 一 个 大 家 族 ， 包 括 神 经 生 长 因 子 (N GF ) 以及 其 他

44、 成 员 如 脑 源 性 神 经 营 养 因 子 (B D N F ) 与 神 经 营 养 因 子 N T 一3 、N T 一4 及 N T 一6 (B arb aeid M ，19 9 5 ) 。 神 经 营 养 素 与 T rk A 、 T rk B 以及 T rk C 受 体 结 合 而 发 挥 作 用 (F riedln an ，W .J et al.，19 9 9 ) 。N G F 是 发 现 最 早 、最 典 型 、研 究 最 多 的 一 种 神 经 营 养 因 子 ，它 是 一 种 由3 种 不 同 类 型 的 蛋 白质 组 成 的 复 合 物 ，其 分 子 量 为 14 0 0 0 0 左 右 。八 十 年 代 之 前 ，人 们 对 N G F 与 外 周 神 经 系 统 的 关 系 已 了 解 较 多 ，在 神 经 细 胞 系 统 中 ，N G F 与 其 他 神 经 营 养 素 能 刺 激 细