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1、比较分析肝宁颗粒和大黄利胆抗炎作用【摘要】目的通过动物实验研究肝宁颗粒和大黄利胆抗炎的作用,进一步探讨肝宁颗粒的组方合理性。方法采用胆管引流法分别收集并计量给药后0.5,1,1.5,2,2.5h的胆汁的方法观察肝宁颗粒和大黄对肝脏分泌胆汁的影响;采用测定小鼠胆囊重量的方法观察肝宁颗粒和大黄对胆囊的影响;采用小鼠耳肿胀、小鼠腹腔毛细血管通透性、小鼠琼脂肉芽肿、羧甲基纤维素钠致小鼠腹腔白细胞游走、大鼠蛋清性关节炎等炎症模型观察肝宁颗粒和大黄的抗炎作用。结果肝宁颗粒和大黄均能明显增强胆汁分泌量;促进胆囊收缩,降低胆囊重量;抑制二甲苯、蛋清所致急性炎症,降低腹腔炎症小鼠的毛细血管通透性,抑制腹腔白细胞
2、游走,抑制肉芽组织增生。但肝宁颗粒的利胆抗炎作用均比大黄强。结论肝宁颗粒组方合理,利胆抗炎作用明显。【关键词】肝宁颗粒大黄利胆作用抗炎作用比较Abstract:ObjectiveTostudythecholagogicandanti-inflammatoryeffectofGanninggranuleandtodiscusstherationalityofGanninggranuleinformulation.MethodsBiliaryductcannulabileat0.5,1,1.5,2,2.5hafterintraduodenaladministrationinratswascolle
3、ctedandcountedtoobservetheeffectofGanninggranuleandRhubarbonbiliarysecretion;theweightofcholecystinmicewascountedtoobservetheeffectofGanninggranuleandRhubarbonthecholecystofmice.Anti-inflammatoryeffectofGanninggranuleandRhubarbwasobservedonthemodelsofdimethylbenzene-inducedauricularswellinginmice,ce
4、liaccapillarypermeabilityinmice,agaragar-inducedgranulomainmice,chemotaxisofWBCinducedbyCMC-Nainmiceandhindpawedemainducedbyfresheggwhiteinrats.ResultsGanninggranuleandRhubarbcouldsignificantlyincreasethebiliarysecretion,decreasetheweightofcholecystinmice,inhibittheacuteinflammationinducedbyalbumand
5、xylene,decreasetheceliaccapillarypermeability,inhibitchemotaxisofleucocyteinducedbyCMC-Naandinhibittheproliferationofgranuloma.Moreover,thecholagogicandanti-inflammatoryeffectofGanninggranulewasbetterthanthatofRhubarb.ConclusionTheformulationofGanninggranuleisreasonable;Ganninggranulehasconsiderable
6、cholereticandanti-inflammatoryeffect.Keywords:Ganninggranule;Rhubarb;Cholagogiceffect;Anti-inflammatoryeffect;Comparativestudy肝宁颗粒是由经典利胆验方中常用药物大黄,结合活血化淤理论,辅以川芎制成的复方制剂。其组方简单、合理,临床应用多年,对胆囊炎等疾患具有显著疗效。为了进一步阐明其药效机制,我们利用动物实验观察了该方药利胆消炎的药理作用,并与单味中药大黄作了对比。1器材1.1动物昆明种小鼠,雄性,体重1822g。Wistar大鼠,250300g,雄性。均购自河南省实验
7、动物中心。1.2实验用药与试剂肝宁颗粒,由河南大学药学院中药药理实验室提供;大黄浸膏,由河南大学药学院中药药理实验室提供;地塞米松,浙江仙琚制药股份有限公司,批号:050127。伊文思兰,Fluka公司,批号050905;二甲苯,上海试剂三厂,批号051013;醋酸,广州新成化工厂,批号050728。1.3仪器AG135型电子天平,梅特勒托利多;UV-265FW型紫外分光光度计,日本岛津;LDZ4型台式自动平衡离心机,北京医用离心机厂。1.4统计分析结果均以(s)表示,组间差异性比较采用单因素方差分析,SPSS11.5自动处理,P0.05为有显著性差异,P0.01为有非常显著性差异。2方法2.
8、1对大鼠胆汁分泌的影响1雄性Wistar大鼠30只,体重250290g。随机分为3组,每组10只。分别为:空白对照组;肝宁组(3g/kg);大黄组(2g/kg)。药物用蒸馏水配制,给药量均为10ml/kg,ig1次/d,连续给药7d。末次给药前12h禁食不禁水,实验以20%乌拉坦(0.5ml/100g)腹腔麻醉后,打开腹腔。找到胃幽门部,翻转十二指肠。对着亮处在十二指肠降部肠系膜中可清晰看到有韧性、里面流着黄色液体的胆管。用眼科镊将覆盖在表面的被膜连续剥离2cm,以暴露出胆总管。在其下穿2根丝线,结扎乳头部,用5号静脉输液针头向肝脏方向做胆管穿刺,然后拔掉针头(该操作避免了传统用眼科剪作“V”
9、形切口所易导致的胆管断裂现象,提高了实验成功率),从开口处向肝脏方向插入外径1mm左右的塑料管(外科硬脊膜外麻醉导管在电炉上方加热拉细而成),结扎固定,收集胆汁(实验过程中创面用生理盐水纱布覆盖,并保持湿润)。待胆汁流量稳定后,按表1中分组及剂量从十二指肠进行末次给药(1ml/100g)。给药后每隔30min收集胆汁1次,共5次。记录每30min胆汁流量,并计算5次胆汁的总流量。2.2抗炎作用研究2.2.1对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响2取体重1822g雄性小鼠40只,随机均分成4组,按表2中分组及剂量连续口服给药(0.2ml/10g)7d,最后一次给药30min后,各鼠左耳两面涂二甲苯50l致肿
10、,右耳不涂为正常耳。4h后脱颈椎处死小鼠,用7mm打孔器取左耳和右耳同一部位的圆片,于电子天平上称重。左耳重量减去右耳重量为肿胀度。肿胀抑制百分率(%)=(空白对照组平均肿胀度用药组平均肿胀度)/空白对照组平均肿胀度100%。求算肿胀度及给药组的炎症抑制率。2.2.2对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响1,3取体重1822g雄性小鼠40只,随机均分成4组,按表3中分组及剂量连续口服给药(0.2ml/10g)7d,最后一次给药后1h,各鼠尾静脉注射0.5%伊文思兰0.1ml/10g,并立即腹腔注射0.7%醋酸溶液0.1ml/10g。30min后脱颈处死小鼠。剪开腹腔用6ml生理盐水分数次冲洗腹腔,用吸管吸出冲洗液,合并后加生理盐水,稀释至10ml,混匀,3000r/min离心15min,取上清液用UV-265FW型紫外分光光度计于590nm处测吸收度。2.2.3对蛋清致大鼠足肿胀的影响4取体重220250g雄性大鼠40只,随机
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