荧光分析法简述ppt课件

1、荧光分析法简述荧光分析法简述化学四班 苏世烟 03081124在我的的在分析课本中提到分子光谱法有吸光光度法荧光法拉曼光谱法某些物质经紫外线照射后，能立刻放出能量较低亦即波长较长的光。 当照射停顿后，如化合物的发射在10-9秒钟内停顿，那么称荧光 超越此限制即称为磷光。 荧光的波长与被照射物质有关。以紫外线作激发光源，所发射的荧光常在可见光区。 丈量荧光强度以确定物质含量的方法叫做荧光分析法，所运用的仪器叫荧光计 一.原理 设IF为荧光强度； I0入射紫外线强度； It为透过溶液后紫外线强度； Ia为溶液吸收紫外线； C为溶液中被测物质的浓度； l为溶液层的厚度。 被溶液吸收的紫外线强度为：I

2、a=I0-It据朗伯-比尔定律 代入上式得：经数学推导，当浓度很小时：cltII100lctII100lctII100lctII100clclclaIIIII3 . 20000110110clIclIIclacl003 . 23 . 23 . 2113 . 21荧光强度IF与物质吸收紫外线的强度成正比 clIKIIaF03 .2当紫外线的强度一定，溶液的厚度一定，对同一物质而言 2.3 KI0l为常数，以A表示,故:IF=AC这阐明浓度与荧光强度成正比，这就是荧光定量分析的实际根底。所以只需测出样品溶液的荧光强度和规范溶液的荧光强度，就可按正比关系计算样品溶液的浓度。 CX为样品溶液浓度 CS

3、为规范溶液浓度IFX为样品溶液荧光强度； IFS为规范溶液荧光强度 SFFXCIICSX二荧光计 荧光分析中有两种光线：紫外线和荧光,故: 在比色计中光源、比色杯和光电源三者陈列成一条直线 在荧光计中三者需排成三角形，通常呈直角三角形，如以下图所示 两种安装的不同(1) 比色计中光源是普通的钨丝灯 荧光计中的光源那么必需是产生紫外线的汞灯，常用的是高压汞灯， 它发射的是线状光谱； 能透过汞灯玻璃套管的主要射线波长是365钠米 两种安装的不同(2)比色计中只需一种光源，只需求一个滤光板荧光计中有两种辐射、三个滤光板: 滤光板1用于过滤紫外线，除去其中可见光 滤光板2用于过滤荧光，以去除其他颜色的

4、杂光； 滤光板3可滤去荧光中夹杂的紫外线 三，荧光分析的操作1.规范曲线法 先配制一第列浓度由大到小的规范管C1，C2、C3、C1为浓度最大的规范管 作为起始浓度，置荧光计透光率为100，调理光栅使检流计指零 然后再测一系列浓度较低的规范管的透光率，以浓度对透光率作规范曲线。 规范曲线的另一作法是以空白溶液为起始浓度，置荧光计透光率于10或20处，调理光栅使检流计指零，然后再测一系列浓度较高的规范管的透光率，作出规范曲线。2.比较法 先配一规范溶液，其浓度应略大于样品溶液;浓度越接近，误差越小以此规范溶液为准，调理透光率在2060之间的某一数值上 然后测定样品溶液及空白溶液的透光率。 由下式求

5、得:C规范透光率为60C样品的透光率为X空白溶液的透光率为Y 标准样品CYYXC60四.荧光分析的本卷须知1.荧光的减退 荧光物质经紫外线长时间照射及空气的氧化作用，会使荧光逐渐减退.2.试剂的浓度 有些试剂能吸收紫外线，有颜色的试剂还有吸收荧光的作用，因此分析时所加试剂的量不可太多。3.pH的影响 大多数荧光反响都受溶液酸碱度的影响，故荧光分析需在适宜的酸碱度溶液中进展。最适当的酸碱度必需由实验来确定。所用酸的种类也影响荧光的强度，例如，奎宁在硫酸溶液中的荧光较在盐酸中的要强些。4.溶剂 许多有机物及金属的有机络合物，在乙醇溶液中的荧光比在水溶液中强。乙醇、甘油、丙酮、氯仿及苯都是常用的溶剂

6、。荧光分析所用的有机试剂，在有机溶剂中大多有荧光，应设法防止；普通防止的方法是稀释，或参与一部分水。5.盐类的影响 能与试剂发生反响的其他金属盐类都应事先除去。碱金属与铵盐虽不参与反响，但量太大亦有妨碍；强氧化剂、复原剂及络合剂均不应存在于溶液中。6.荧光强度到达最高点所需求的时间不同 有的反响参与试剂后荧光强度立刻到达最顶峰有的反响需求经过1530分钟才干到达最顶峰7.有机溶剂中常有产生荧光的杂质，可用蒸馏法提纯。橡皮塞、软木塞及滤纸中也常有能溶于溶剂的一些带荧光的物质。 六.总结荧光分析法 灵敏度高， 仪器设备相对简单，休积小， 操作较简便 反响时间也较快 20世纪90年代曾有两位瑞士化学

7、家提出一个叫-TAS的概念 -TAS 就是把整个实验室的功能，包括采样、稀释、加试剂、反响、分别、检测等集成到尽能够小的操作平台上。 -TAS 的进样量只需纳晋级(10-6L)甚至皮晋级(10-12L)。当然这就要求检测反响有高的灵敏度。 而荧光法是目前公认的最灵敏的检测方法之一,它正顺应分析设备微型化、集成化、与便携化的开展趋势。但是它也有一些先天的缺乏限制了它的运用，那就是只需少数化合物能发射荧光。这就要靠这座的各位精英们以后多多努力了 革命尚未胜利，同志仍需努力啊！ 参考文献: 中国医学科学院卫生研讨所 编 彭崇慧 冯建章 张锡瑜 李克安 赵凤林 中国化学会 中国科学院院箕运用化学研讨所

8、主办 x(u$rZoWkThQeMbJ7G4D1z-w*t!qYmVjSgOdLaI6F3B0y)v%s#pXlUiQfNcK8H5E2A+x*u$rZnWkThPeMaJ7G4C1z-w&t!pYmVjRgOdL9I6F3B0y(v%s#oXlUiQfNbK8H5D2A+x*u$qZnWkShPeMaJ7F4C1z)w&t!pYmUjRgOcL9I6E3B+y(v%r#oXlTiQeNbK8G5D2A-x*u$qZnVkShPdMaJ7F4C0z)w&s!pYmUjRfOcL9H6E3B+y(u%r#oWlTiQeNbJ8G5D1A-x*t$qYnVkSgPdMaI7

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