孤束核在针刺“足三里”调节胃运动中的作用机制

1、孤束核在针刺“足三里”调节胃运动中的作用机制         11-05-14 15:21:00     编辑：studa20            作者：王述菊,孙国杰,杜艳军,胡和平,吴绪平,孔立红【摘要】  目的 探讨迷走神经中枢孤束核在针刺“足三里”对胃运动障碍大鼠胃内压影响中的作用。方法 采用神经电生理学方法,用微电极细胞外记录大鼠孤束核

2、单个神经元的活动,在正常生理状态下及经血管注射抑制胃运动的药物阿托品或促进胃运动的药物胃复安后,观察针刺“足三里”对孤束核神经元放电及胃内压的影响。结果 在正常生理状态下,针刺“足三里”有效激活了孤束核神经元放电,并明显促进胃运动。静脉注射阿托品后,孤束核神经元背景放电减少,但针刺对放电的影响与药物前相比变化不大, 静脉注射阿托品后针刺“足三里”仍有效激活了孤束核神经元放电,且静脉注射阿托品后针刺“足三里”能明显促进胃运动。在静脉注射胃复安后,孤束核神经元背景放电增加,但针刺对放电的影响与药物前相比,变化也不大, 静脉注射胃复安后针刺“足三里”仍有效激活了孤束核神经元放电,而且静脉注射胃复安后

3、针刺“足三里”更明显促进胃运动。结论 针刺“足三里”对胃功能的调节作用以促进胃运动为主,其调节作用与孤束核神经元的激活密切相关,且针刺“足三里”引起孤束核相关神经元放电增加幅度不受周围胆碱能受体阻滞剂阿托品及多巴胺受体拮抗剂胃复安的影响。 【关键词】  孤束核；足三里；针刺；胃运动；大鼠    Abstract：Objective To research the function of the vagus nerve center nucleus of solitary tract (NTS) in the influence of gastric pr

4、essure by acupuncture at “Zusanli” in rats with motility disturbances of the stomach. Methods Adopting electrophysiological methods, the extracellular discharge signals of neuronic action in NTS were recorded with glass microelectrode. The influence of the discharges of NTS neurons and gastric press

5、ure responding to the acupuncture at “Zusanli” point were observed in normal status and the condition of Atropine or Metoclopramide intravenous injection. Results In the normal status, acupuncture at “Zusanli” activated the discharges of NTS neurons and promote the gastric pressure remarkably. After

6、 Atropine intravenous injection, the background discharges of NTS neurons decreased. There was no statistical difference in the discharges responding to the effect of acupuncture before and after Atropine administration. And the gastric motion reinforced obviously by acupuncture at “Zusanli” after A

7、tropine administration. But after intravenous injection of Metoclopramide, the background discharges of NTS neurons increased. There was also no statistical difference in the discharges responding to the effect of acupuncture before and after Metoclopramide administration. Moreover, the function of

8、promoting gastric motion by acupuncture at “Zusanli” got more obviously after Metoclopramide administration. Conclusion The function of adjusting gastric motion by acupuncture at “Zusanli” point has close relation to the activation of NTS neurons, and the increasing amplitude of the discharges of NT

9、S neurons wasnt influenced by cholinergic receptor blocker Atropine and dopamine-receptor antagonist Metoclopramide.    Key words：nucleus of solitary tract；Zusanli；acupuncture；gastric motion；rat“足三里”是足阳明胃经五输穴中的合穴,是四总穴之首。临床和实验研究均表明,“足三里”对胃功能和疾患有显著的调整和治疗作用1-2,但以往的研究多集中于周围神经系统的作用,而对中枢的作用

10、研究甚少。因此,本研究旨在观察针刺“足三里”穴对孤束核神经元放电的影响,探讨脑的低级中枢延髓孤束核(nucleus of solitary tract,NTS)在“足三里”穴调节胃运动中的作用机制。1  材料与方法1.1  动物健康成年Sprague-Dawley雄性大鼠32只,体重300350 g之间,中国中医科学院实验动物中心提供,为清洁级动物。测量胃内压实验前禁食12 h,饲以5%葡萄糖盐水。手术及实验过程中动物体温用计算机温度时间控制仪维持在(37±1)。1.2  仪器及药物脑立体定位仪(日本)、微电极操纵器、微电极推进器(PF5-1,日本光电)

11、、微电极放大器(MEZ-8301,日本光电)、载波放大器(AP-601G,日本光电)、生物放大器(AB-621G,日本光电)、双线记忆示波器(Vc-10,日本光电)、刺激器(SEN-7203,日本光电)、隔离器(SSl02J,日本光电)、双芯玻璃毛坯(长度100 mm,外径1.5 mm,内径1.2 mm,南京)、玻璃微电极拉制仪(Model P-97,美国)、压力换能器(yp200,北京)、PowerLab计算机数据采集系统(爱德公司,澳大利亚)、华佗牌针灸针具(苏州)、计算机温度时间控制仪(STARC ST-360,日本)、台式牙钻车(307-6,上海)、37 液体石蜡、0.5 mol/L滂

12、胺天兰醋酸钠溶液、0.2%肝素、0.01%阿托品、0.1%胃复安、0.3%中性红水溶液。1.3  孤束核细胞外记录手术在室温条件下,大鼠称重后用10%乌拉坦腹腔注射麻醉(urethane,1.01.2 g/kg)。大鼠头部用耳棒固定,头顶部剃毛,沿正中矢状线切开皮肤,分离皮下组织,刮除骨膜,暴露前后囟,将前后囟调至同一水平。根据大鼠脑立体定位图谱(Paxinos和Watson,1998),在孤束核(A-11.3-14.3 mm；L 02.3 mm；H 47 mm)所在颅骨部位用台式牙钻车钻孔,手下有落空感即停止。显微镜下分层剥离硬脑膜和软脑膜,暴露的脑组织用温的石蜡油覆盖。在记录孤束

13、核实验中,大鼠俯卧,将大鼠头部用耳棒固定于脑立体定位仪上,下齿钩挂在鼠头夹中,口鼻部用鼠头夹压紧。1.4  血压记录手术动物仰卧,于颈部中线偏左侧一字切口切开皮肤,分离皮下组织和肌肉,暴露左侧颈静脉、颈总动脉。用动脉夹在颈总动脉中段夹住血管阻断血流,注意松紧适度以免夹伤血管。将颈静脉、颈总动脉的远心端用手术线结扎,眼科剪将血管剪开一斜口(大约为直径的1/2),将静脉插管和动脉插管分别向心性插入颈静脉、颈动脉内约810 mm,注意不能太深以避免动脉插管对颈动脉窦的机械刺激。动脉插管内预先充满0.2%的肝素,排除悬浮气泡。动脉插管通过三通装置与注射器和压力传感器相联,注射器内留置2 mL

14、 0.2%的肝素,动脉血管堵塞时少量推注。静脉插管直接与注射器相连,以备静脉用药。1.5  胃内压记录手术动物仰卧,上腹部剃除毛,于剑突下腹正中矢状线偏左侧5 mm一字切口切开腹腔,以温和的生理盐水纱布推开肝脏暴露胃幽门部及十二指肠上段。将避孕套套在塑料导管一端,导管前端与避孕套之间留有一定空隙,在距离避孕套前端1 mm处用外科线结扎将两者固定,制成直径为20 mm的胃内留置气囊。胃囊内及插管内充满双蒸水,排除气泡。在十二指肠距胃窦部1.52 mm处,避开肠壁上可见的血管,在肠系膜的对侧做一个23 mm左右的一字型切口,将气囊放入胃窦部,切口处荷包缝合固定。插管另一端通过三通装置与注射器和压力传感器相连。1.6  孤束核神经元细胞外记录在记录孤束核的实验中,根据大鼠脑立体定位图谱,通过