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文档简介
1、 SCAD以NADH为辅酶催化苯乙酮酸转化为(R-扁桃酸的反应属于双底物酶促反应,遵循有序反应机理。反应机理是:辅酶分子A(NADH先进入酶的辅 酶结合部位,形成EA后底物苯乙酮酸B再进入底物结合部位,形成三元活性配合物EAB,完成氧化还原反应变成EPQ配合物,再按顺序释出产物P(R-扁 桃酸和还原形式的辅酶Q(NAD+。按King-Altman处理方式,在不考虑其它成分的抑制作用,得到了一个简化的酶促动力学方程。 v=VmaxS/Km+S利用Lineweaver-Burk双倒数法,研究了磁性纳米Fe3O4/CTS粒子固定化SCAD和纳米Fe3O4/KCTS粒子固定化SCAD的酶促动力学常数
2、Km和Vmax。 以戊二醛为交联剂,将壳聚糖球交联引入醛基,然后将交联的壳聚糖球浸泡在酵母细胞悬浮液中,制备了固定化酵母细胞壳聚糖球。以苯乙酮酸为 底物,催化合成了(R-扁桃酸。最优固定化条件是戊二醛的质量分数w(GA为1,酵母细胞与交联壳聚糖球的质量比(m(Y:m(CB为0.5:1,交联时间 为6h,固定化时间为18h,底物浓度为10 mmol·L-1,在此条件下反应最大转化率和产物光学纯度分别高达67.86和98.05e.e.。固定化酵母壳聚糖 球具有良好的重复使用性和贮存稳定性。 利用磁性纳米Fe3O4/CTS微球作载体固定化酵母细胞,酵母细胞主要以吸附的形式固定在磁性壳聚糖上
3、面,形成磁性固定化酵母细胞。在温度为 30,时间为2h,磁性壳聚糖与菌泥质量配比为2:1时,酵母细胞吸附率可达17.2。磁性固定化酵母细胞催化苯乙酮酸合成(R-扁桃酸的最佳温度为 30,时间为11h,底物苯乙酮酸的最佳浓度为10 mmol·L-1,转化培养基的最适pH为6.0,此时转化率可达29.3,(R-扁桃酸的e.e.为86.69。磁 性固定化细胞催化反应的活性优于游离细胞,且有一定的储存稳定性。 引证文献(8条 1.金惠.邢云.孙小梅.李步海 均苯四甲酸酐修饰壳聚糖微球对Pb2+和Cd2+的吸附期刊论文-应用化学 2009(5 2.程涛 流动注射壳聚糖在线微柱预富集原子吸收光谱
4、法测定痕量金属离子的研究学位论文硕士 2006 3.强涛涛.王学川.任龙芳 壳聚糖化学改性的研究进展期刊论文-皮革化工 2005(5 4.丁萍.关鲁雄.欧阳冬生.王鑫艳.于秋亮 铁交联壳聚糖-酮戊二酸和铁交联羟胺壳聚糖-酮戊二酸的合成及其 药物制剂的缓释特征期刊论文-化学世界 2005(9 5.关鲁雄.丁萍.欧阳冬生.王鑫艳 壳聚糖衍生物金属配合物的制备及其药物制剂的缓释特征期刊论文-化学与生 物工程 2005(4 6.马宁.汪琴.孙胜玲.王爱勤 甲壳素和壳聚糖化学改性研究进展期刊论文-化学进展 2004(4 7.杨声.苏中兴.孙新枝.刘岿.冯小强 壳聚糖的改性及在化学修饰电极中的应用期刊论文-天水师范学院学报 2003(5 8.谭学才.黄在银.周桂.范蛟晖.蔡荣英 壳聚糖对Cd2+的吸附性能期刊论文-化学研究与应用 2003(1 本文链接: 授权使用:东北林业大
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