整理好的酿酒分析实验指导书

1、酿酒分析实验指导实验注意事项实验课是提高教学质量的重要环节，通过实验巩固理论知识，培养独立工作能力，为了保证实验顺利进行，实验前应注意以下几点：1 每次实验前必须详细预习实验讲义，明确实验目的、原理方法及实验步骤，并在记录本上拟出简单的实验原理、使用方法及操作时的注意事项。2 实验时应严格按照实验步骤及试剂用量进行操作，不能任意变更。不熟悉的仪器设备，应先请教老师后再使用。切勿随意乱动。3 实验时如有问题发生，应首先用自己学过的知识，独立思考加以解决，努力培养独立分析问题、解决问题的能力。如自己不能解决，可与指导老师共同讨论研究，提出解决问题的方法。4 实验进行时，必须把随时观察到的现象和实验

2、数据如实地记录在记录本上，不得记在其他纸上，要养成良好的作原始记录的习惯。5 实验中所有的玻璃仪器及其他器皿，应洗涤干净。桌面、地面要保持清洁。实验完毕后，所有仪器设备应恢复原状。6 必须遵守实验室的规则：1） 室内不得高声谈笑，必须保持安静的实验环境。2） 爱护仪器，不浪费药品、节省水电。遵守实验室的安全措施。3） 公用仪器及试剂瓶，不要移动原有位置。注意瓶塞切勿盖错，以免污染试剂。用毕后立即放回原处。对于有害药品应按实验室规定取用。4） 滤纸、火柴棒、碎玻璃等投入废品缸，切勿丢入水池，以保证下水道畅通。5） 所用仪器如有损坏，应自行登记并向指导老师报告。6） 保持实验室的整齐清洁，个人所带

3、与实验无关的东西，如书包等物要放在指定地方，不得乱放在实验桌上。7） 最后一组实验人员，离开实验室时，应检查水电、门、窗等是否关闭，以保证实验室的安全。 河北科技师范学院 二零零七年三月0 / 18实验一、葡萄酒酒度的测定1、原理以蒸馏法去除样品中不挥发性物质，用酒精计测得酒精体积百分数。查表加以温度校正，求得20时乙醇的体积百分数(%，V/V)，即酒精度。2、仪器 酒精计(分度值为0.1度)全玻璃蒸馏器：1000ml100ml容量瓶100ml量筒3、试样的制备 用一洁净、干燥的100ml容量瓶准确量取100ml样品于蒸馏瓶中。用50ml水分三次冲洗容量瓶，洗液并入蒸馏瓶中，再加几颗玻璃珠。

4、连接冷凝器，以取样用的原容量瓶作接收器(外加冰浴)。开启冷却水，缓慢加热蒸馏。 收集馏出液接近刻度，取下容量瓶，盖塞。于20 水浴中保温30min，补加水至刻度，混匀，备用。4、分析步骤 将制得的试样倒入洁净、干燥的100ml量简中，静置数分钟，待其中气泡消失； 轻轻放入洗净、干燥的酒精计，使其不得接触量筒壁，同时插入温度计，平衡5min； 水平观测，读取与弯月面相切处的刻度示值，同时记录温度。 根据测得的酒精计示值和温度，查表，换算成20 时酒精度。 所得结果表示至一位小数。实验二、葡萄酒总浸出物的测定一、原理 用密度瓶发测定样品或蒸出酒精后的样品密度，根据密度值查表，求出总浸出物的含量。二

5、、仪器与试剂瓷蒸发皿：200ml 附温度计密度瓶高精度恒温水浴：20.0±0.1 100ml容量瓶三、测定步骤1）试样的制备用100ml容量瓶量取100ml 20样品，倒入100ml的瓷蒸发皿中；于80 水浴上蒸发至约原来体积的1 / 181/3，冷却；将残液小心移入原100ml容量瓶中，用水多次荡洗蒸发皿，洗液并入容量瓶中，于20定容至刻度。2）密度瓶质量的测定将密度瓶（包括附温度计和侧孔罩）彻底洗净（用蒸馏水漂洗）；干燥（依次用乙醇、乙醚洗涤并吹干）。然后带温度计和侧孔罩称重。重复干燥和称重，直至恒重，得出密度瓶的质量(m)。3）蒸馏水质量的测定取下密度瓶上的温度计，将新煮沸30

6、min后冷却至15左右的蒸馏水注满密度瓶，插上温度计，瓶中不得有气泡。将密度瓶浸入(20.0±0.1)的恒温水浴中，待内容物温度达20并保持10min后。用滤纸吸去侧管溢出的液体，使侧管中的液面与侧管管口齐平，立即盖好侧孔帽；取出密度瓶，迅速擦干瓶壁上的水，立即称重。在同样条件下做平行试验，求出平均值，作为密度瓶加蒸馏水的质量(m1)。4）试样质量的测定用制备好的试样将密度瓶冲洗23次，然后注满密度瓶按3的操作方法操作，得出试样加密度瓶的质量(m2)。四、计算 脱醇样品20的密度1 ，以1 ×1.0018的值，查表求出总浸出物的含量JZ (g/L)实验三、 直接滴定法测定总

7、糖或还原糖一、 实验原理：将斐林试剂A、B液混合后，生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，沉淀很快与酒石酸钾钠起反应，生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。这种络合物被葡萄糖还原，生成红色的氧化亚铜沉淀。当达到终点时，稍微过量的还原糖立即把次甲基蓝指示剂还原，此时溶液由蓝色变为无色，显示出氧化亚铜的红色指示定终点。用含糖样品溶液滴定已标定的斐林试剂A、B液，就可以计算出样品中还原糖或总糖的含量。二、仪器及试剂：1、仪器：调温电炉， 分析天平， 烘箱，干燥器， 水浴锅， 滴定管等2、试剂：1）盐酸酸溶液（11）：取100ml的盐酸，缓慢倒入100ml的水中，摇匀。2）氢氧化钠溶液（200g/L）：称取100g氢氧

8、化钠，加水溶解并稀释定容至500ml，摇匀，贮于塑料瓶重。3）斐林氏A：34.7gCuSO4加水至500ml定容。斐林氏B：173g酒石酸钾钠加50g氢氧化钠加水至500ml定容4）1%次甲基蓝指示剂：称量1.0g次甲基蓝，溶解于水中并稀释至100ml。2 / 185）2.5g/L标准葡萄糖溶液：精确称取经105以下温度干燥至恒重的葡萄糖2.5g（准确至0.0001g），溶解于水中，稀释定容至1000ml。三、操作方法：1、试样的制备1) 测总糖用试样准确吸取一定量的样品（V1）于100ml容量瓶中，使之含总糖为0.20.4g；加5ml盐酸（11）溶液，加水至20ml，摇匀；于68±

9、1水浴上水解15min，取出，冷却；用200g/L氢氧化钠溶液中和至中性，调温至20，加水定容至刻度（V2）2）测还原糖用试样：准确吸取一定量的样品（V1）于100ml容量瓶中，使之含还原糖为0.20.4g，加水定容至刻度（V2）、测定1）斐林试液的标定：准确吸取斐林试液A、B各5.00ml，加水50ml，置250ml三角瓶中，在电炉上加入至沸，在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定，当溶液的蓝色消失呈红色时，加2滴次甲基蓝指示剂，继续滴加葡萄糖至蓝色消失为终点。记录葡萄糖标准溶液消耗的体积。另取斐林试液A、B各5.00ml置250ml三角瓶中，加水50ml和比上述实验少1ml的葡萄糖标准溶

10、液加热至沸并保持2min，加2滴次甲基蓝指示剂，继续滴加葡萄糖至蓝色消失为终点。记录葡萄糖标准溶液消耗的总体积。2）预测：精确吸取斐林氏A、B液各5ml，加水50ml，置于250ml三角瓶中，在沸腾的状态下用制备好的试样滴定，当溶液的蓝色消失将呈红色时，加入次甲基蓝指示剂2滴，继续滴定蓝色消退，记录用量。3）测定：斐林试液A、B各5.00ml置250ml三角瓶中，加水50ml和比上述实验少1ml的试样溶液加热至沸并保持2min，加2滴次甲基蓝指示剂，继续滴加试样至蓝色消失为终点。记录溶液消耗的总体积。四、计算：F=C*V式中：F-斐林氏A、B液各5ml相当于葡萄糖的质量，g；C-葡萄糖标准溶液

11、的浓度，g/L；V-消耗的葡萄糖标准溶液的总体积，ml；FX3=-*10003 / 18(V1/V2)*V3式中: X3-总糖或还原糖的含量，g/L;F-斐林氏AB溶液各5ml相当还原糖的重量（以葡萄糖计），g；V1-吸取的样品体积，ml；V2-样品稀释定容后的体积，ml；V3-测定时消耗样品稀释液的体积，ml；实验四、葡萄酒滴定酸的测定一、 实验原理葡萄酒中的有机酸在用标准碱液滴定时，被中和生成盐类。用酚酞做指示剂，当滴定至终点时，根据耗用标准碱液量，可计算出样品中总酸含量。通常以该葡萄酒中含量最多的酸来表示酸度。二、仪器及试剂：1、仪器：容量瓶 滴定管 移液管 三角瓶 分析天平2、试剂：1

12、%酚酞：称取1.0g的酚酞，溶于乙醇，用乙醇稀释至100ml。0.05MNaOH标准溶液；邻苯二甲酸氢钾三、实验方法：1、标准溶液的配制与标定1）在粗天平上称取约100gNaOH，加水100ml使之全部溶解，冷却后置于聚乙烯塑料瓶中，密封，放置数日澄清后，取上清液2.8ml，加新煮沸过并已冷却的蒸馏水至1000ml，摇匀。2） 将分析纯苯二甲酸氢钾于120干燥箱中干燥1小时至恒重，冷却称取0.10.2g于250ml锥形瓶中，加入50ml蒸馏水溶解，加入3滴酚酞指示剂，用以上配好的碱液滴定至微红色，计算氢氧化钠当量浓度。同时做空白试验。氢氧化钠标准溶液浓度按下式计算：m C(NaOH)= - (

13、V1-V2)×0.2042式中：C(NaOH)-标准氢氧化钠溶液的浓度,mol/L；4 / 18m-邻苯二甲酸氢钾的质量，g；V1-滴定终点消耗氢氧化钠溶液体积,ml； V2-空白试验消耗氢氧化钠溶液体积,ml；0.2042-与1.00ml氢氧化钠标准溶液C(NaOH)=1.000mol/L相当的以克表示的邻苯二甲酸氢钾的质量。2、测定方法 取调温至20的样品25ml（V2），加入50ml蒸馏水将样品移入250ml锥形瓶中，同时加入2d酚酞指示剂，摇匀后，用标准碱液滴定至浅红色，并保持30s内不变色，记录消耗的氢氧化钠标准溶液的体积（V1）。空白试验：用同样的方法，只是不加入酒样，做

14、空白试验。记录消耗标准碱液的体积（V0）。四、 计算： C*(V1-V0)×Si X= - ×1000 V2式中：X-样品中滴定酸的含量（以酒石酸计），g/L；C-标准氢氧化钠溶液的浓度,mol/L；V0-空白试验消耗标准碱液体积,ml；V1-滴定终点消耗标准碱液体积,ml； V2-滴定时吸取样液体积ml； Si-与1.00ml氢氧化钠标准溶液C(NaOH)=1.000mol/L相当的以克表示的试样主体酸的质量。S酒石酸0.075；S苹果酸0.067；S柠檬酸0.064；S草酸0.045实验五、葡萄酒挥发酸的测定一、实验原理 以蒸馏的方式将样品中挥发酸蒸出，然后用碱标准溶液

15、滴定，以消耗的碱标准溶液的量来计算挥发酸的含量。二、仪器及试剂1、试剂 氢氧化钠标准溶液c(NaoH)0.05mol/L（配制及标定方法同试验四） 酚酞指示液(10g/L)：称取1.0g酚酞，溶于乙醇，用乙醇稀释至100ml。 酒石酸溶液(200g/L)：称取20g酒石酸溶解至100ml。5 / 182、仪器 蒸馏装置：单沸式蒸馏装置三、分析步骤1、安装水蒸气蒸馏装置按仪器要求安装好蒸馏装置；在蒸气发生瓶(A)内装入中性蒸馏水，其液面应低于内芯(B)进汽门3cm，高于B中样品液面；取20样品l0.00ml（V）于蒸馏装置样品瓶中，加入10ml酒石酸溶液；把B插人A内，按上氮气球(D)，连接冷凝

16、器(E)；将100ml处有标记的250ml三角瓶置于冷凝器下面接收馏出液。2、蒸馏待全部安装妥当后，进行蒸馏。先打开蒸气发生瓶的排汽管(C)；把水加热至沸，2min后夹紧C，使蒸气进入B中进行蒸馏；待馏出液达100ml时，放松C，停止蒸馏，取下三角瓶，用以样品的测定。3、滴定将馏出液加热至沸，除去CO2,但沸腾时间不能超过30s，立即冷却，加入2滴酚酞指标剂，用氢氧化钠标准溶液滴定至粉红色，并保持30s内不变色为终点。4、记录记录消耗的氢氧化钠标准溶液的体积（V1）。四、计算 样品中的挥发酸按下式计算：C×V1×60.0X=-V式中：X-样品中挥发酸的含量，g/L； C-氢

17、氧化钠标准溶液的物质量浓度，mol/L； V1-氢氧化钠标准溶液的体积，ml；60.0-与1.00ml氢氧化钠标准溶液C(NaOH)1.00mol/L相当的以克表示的乙酸的含量，g； V-取样体积，ml； 实验六、苹果酸层析分析 一、原理 将葡萄酒以小原点的形式点样于滤纸上，经展开、显色后，根据比移值与标准比较定性。 酒石酸移动速度最慢，离葡萄酒点样点最近，酒石酸Rf在0.260.30； 乳酸和琥珀酸速度最快，被推动到滤纸的最顶端，琥珀酸Rf在0.690.76； 苹果酸移动的速度处于两者之间，苹果酸Rf在0.520.56。6 / 18二、仪器与试剂1、仪器滤纸：美国沃特曼1号或新华1号，杭州新

18、华造纸厂点样器：毛细管或微量注射器电吹风50ml小烧杯层析缸2、试剂 50乙酸 溴酚蓝的正丁醇溶液：在1L的正丁醇中加入1g溴酚蓝溶解。 展开剂：取50ml溴酚蓝丁醇溶液与25ml50乙酸混合。 标样：苹果酸标样，乳酸标样，酒石酸标样三、操作方法1、将配制好的展开剂装入层析缸内，封严。2、在滤纸下端45cm处轻轻做一条基线，然后将酒样和标样点于滤纸上，电吹风吹干后再点，应少量多次，且每滴样品在滤纸上直径不超过5mm。3、将滤纸卷成筒状，并用两个小夹夹住。4、将滤纸轻轻放入层析缸内，使滤纸不触及层析缸的内壁，点样点也不能浸入展层剂中，然后将层析缸盖严。5、当展层剂移到距滤纸顶部12cm时，将滤纸

19、取出，并用夹子固定住进行干燥。四、注意事项1）裁纸时，按着纤维排列的方向不留毛边。2）点样量不能过多，否则会造成拖尾；点样点直径应小于3mm为佳，未知发酵液试样依据酸性强弱点样，酸弱时，点5滴，酸强时，点3滴。3）控制标样品与试样用量保持一致，根据标样和试样层析斑点大小估测样品中酸的多小。4）注意爬层时间，避免溶剂前沿过头。5）点样的毛细管应专样专用，避免混淆。实验七 二氧化硫的测定一、原理二氧化硫可以与碘发生氧化还原反应，用碘标准溶液作滴定剂，淀粉作指示剂，根据碘标准液消耗的量计算试样中二氧化硫的含量。试样用硫酸酸化可使水合态的二氧化硫变为游离态，以测定游离二氧化硫的含量。试样用碱处理，使结

20、合态的二氧化硫变为游离二氧化硫，经过酸化，以测定总二氧化硫的含量。8 / 18二、试剂与溶液 1)硫酸溶液(13)：取1体积浓硫酸缓慢注入3体积水中。 2)淀粉指示液(10gL)：称取1g淀粉，加5ml水使成糊状，在搅拌下将糊状物加到90ml沸腾的水中，煮沸12min，冷却，稀释至100ml。 3)氢氧化钠溶液(100g/L)：取100g氢氧化钠溶解稀释至1L。 4)碘标准溶液c(1/2I2)0.02mol/L。称取13g碘(相对分子质量126.9)及35g碘化钾，用水溶解稀释至1000ml，摇匀，贮于棕色瓶中，此溶液的浓度约为0.1mol/L。标定：采用标准硫代硫酸钠溶液标定碘标准溶液，标定

21、的反应方程式如下：I22S2O32-=2I-+S4O62-准确量取30.00ml配制好的碘溶液置于250ml碘量瓶中，加150ml水，用硫代硫酸钠标准溶液滴定，近终点时加3ml淀粉指示剂，继续滴定至溶液蓝色消失。记录消耗硫代硫酸钠标准溶液的量(V)。以水替碘液作空白试验：取250ml水，加0.05ml配制好的碘溶液（C0.1mol/L）及3ml淀粉指示液，用硫代硫酸钠标准溶液滴定至溶液蓝色消失，记录消耗硫化硫酸钠标准溶液的量(V2)。碘标准溶液的浓度按下式计算： (VV2)×C1C =-V1-0.05式中：C碘标准溶液物质量浓度，mol/L；C1硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度，mol

22、/L；m重铬酸钾质量，g；V硫代硫酸钠溶液的用量，ml；V2空白实验消耗硫代硫酸钠溶液的量，ml；V1碘溶液的用量，ml；0.05空白试验中加入碘溶液的量，ml；硫代硫酸钠溶液的标定：称取0.15g于120烘干至恒重的基准重铬酸钾，置于碘量瓶中，加入25ml蒸馏水，加2g碘化钾及20ml硫酸溶液（20），摇匀，于暗处放置10min。加150ml水，用配置好的硫代硫酸钠溶液滴定。近终点时加3ml淀粉指示剂继续滴定至溶液由蓝色变为亮绿色。同时做空白试验。8 / 18计算：硫代硫酸钠标准溶液浓度：mC (Na2S2O3)=-(V1V2)×0.04903式中：C (Na2S2O3)硫代硫酸钠

23、标准溶液物质的量浓度，mol/L；m重铬酸钾质量，g；V1硫代硫酸钠溶液的用量，ml；V2空白实验消耗硫代硫酸钠溶液的量，ml；0.04903与1.00ml硫代硫酸钠标准溶液C(Na2S2O3)=1.000mol/L相当以克表示的重铬酸钾的质量。三、分析步骤1、游离二氧化硫 吸取50.00ml样品于250ml碘量瓶中，加入少量碎冰块，使温度降至510，再加入l ml淀粉指示液，l0ml硫酸溶液，立即用碘标准溶液滴定至淡蓝色，保持30s不变即为终点，记录消耗的碘标准溶液的体积(v)。以水代替样品，做空白试验，消耗的碘标准溶液的体积记为(V0)。计算： C×(VV0) ×32X

24、1=-*100050式中：X1样品中游离二氧化硫的含量，mg/L；C碘标准溶液物质量浓度，mol/L；V消耗的碘标准溶液的体积，ml；V0空白实验消耗碘标准溶液的体积，ml；32与1.00ml碘标准溶液C=1.000mol/L相当以毫克表示的二氧化硫的质量；50取样体积，ml；2、总二氧化硫 取25mL氢氧化钠溶液于250ml碘量瓶中，再准确吸取25.00ml样品，并以吸管尖插入氢氧化钠溶液的方式，加入到碘量瓶中，摇匀，盖塞，静置15min，使结合态的二氧化硫完全转化为游离二氧化硫，再加人少量碎冰块，1ml淀粉指示液，10ml硫酸溶液，摇匀，立即用碘标准溶液滴定至淡监色，30s内不变即为终点，

25、记下消耗的碘标准溶液的体积10 / 18(V)。 以水代替样品做空白试验，消耗的碘标准溶液的体积记为(V0)。四、计算C×(VV0) ×32X2=-*100025式中：X2样品中总二氧化硫的含量，mg/L；C碘标准溶液物质量浓度，mol/L；V消耗的碘标准溶液的体积，ml；V0空白实验消耗碘标准溶液的体积，ml；32与1.00ml碘标准溶液C=1.000mol/L相当以毫克表示的二氧化硫的质量。25取样体积，ml；实验八、铁含量的测定一、实验原理磺基水杨酸在碱性条件下与三价铁生成黄色络合物，以比色法测定。二、实验试剂1、1：1.5氢氧化铵溶液：取100ml的氨水，注入150

26、ml水中，摇匀。2、10%磺基水杨酸溶液：称取100g的磺基水杨酸，用水溶解稀释至1L。3、 铁标准储备液（0.1g/L）：称取0.864g硫酸铁铵溶于水，加1ml硫酸，移入1000ml容量瓶中，稀释至刻度。4、铁标准使用液（10mg/L）：吸取10.00ml铁标准储备液于100ml容量瓶中，用0.5硝酸溶液稀释至刻度。三、实验步骤：1、试样的制备准确吸取25.00ml样品（V）于蒸发皿中，在水浴上蒸干，置于电炉上小火炭化，然后移入（550±25）高温电炉中灼烧，灰化至残渣呈灰白色，取出，加入10ml（11）的盐酸溶解，在水浴上蒸发至2ml，再加入5ml水，加热煮沸后，移入50ml的

27、容量瓶中，用水洗涤蒸发皿，洗液并入容量瓶中，用水稀释至刻度（V1），摇匀，同时做空白试验。2、取比色管7支，按下表顺序加入各种试剂编 号0123456标准铁溶液（ml）00.51.01.52.02.5样品10ml10 / 18水（ml）109.59.08.58.07.50磺基水杨酸（ml）55555551：3氢氧化铵（ml）5555555摇匀，放置10分钟，以1-5号管为标准系列，或在480纳米下测光密度，绘制标准曲线。四、计算 (m1m0) ×V1X=-V×V2式中：X样品中铁的含量，mg/L；m1测定用样品从标准曲线上查的铁的质量，g；m0试剂空白液中铁质量，g；V取样

28、体积，ml；V1样品消化液的总体积，ml；V1测定用试样的体积，ml；实验九、葡萄酒中总酚的测定一、原理 葡萄酒中的所有酚类物质被福林肖卡试剂氧化。该试剂由磷钨酸和磷钼酸的混合物组成，氧化酚后，会变成蓝色的氧化钨和蓝色氧化钼的混合物。 产生的蓝色在765nm有最大吸收峰，生成物的颜色深浅与酚的含量成正比，可比色测定其含量。二、仪器与试剂1、仪器 分光光度计、 恒温水浴、 圆底烧瓶、 100ml容量瓶、 冷凝管2、试剂1）福林肖卡试剂：市售的试剂可以使用，也可按照下面的方法配制：把100g钨酸钠和25g钼酸钠溶解在700ml蒸馏水中，加入50ml85的磷酸，100ml浓盐酸，加入几粒玻璃珠，连接

29、好冷凝器，用文火加热回流10小时。回流后用50ml水冲洗冷凝管上的附着物，然后取下。加入150g硫酸锂，几滴溴，加热煮沸15min，冷却，加入蒸馏水使其达11 / 181000ml。最后的颜色应是黄色，不带丝毫的蓝色、绿色，发绿即不得使用。2）碳酸钠饱和溶液称取20g无水碳酸钠溶于100ml蒸馏水中，在7080溶解，放置过夜，次日加入少许水合碳酸钠到饱和溶液中做晶种，使结晶析出，24h后过滤后备用。3）酚母液称取0.500g五倍子酸，用水溶解定容到100ml。三、测定步骤1）标准曲线的绘制用移液管精确吸取0.0、1.0、2.0、3.0、5.0、10.0ml酚母液于100ml的容量瓶中，用蒸馏水

30、定容至刻度。各瓶的酚浓度分别为0、50、100、150、250、500mg/L。再分别取6支100ml容量瓶，分别吸取上述溶液各1ml，各加水60ml，混合，各加入福林肖卡试剂5ml，充分混匀。在30s至8min内各加入15ml碳酸钠溶液，混合后用水定容。将以上各液在20下放置2小时，然后在分光光度计上765nm下测定吸光度。以酚浓度做横坐标，吸光度做纵坐标，绘制标准曲线2）样品的测定白葡萄酒：吸取1ml样品于100ml的容量瓶中，其他步骤按照（1） 操作。然后在分光光度计上765nm处测定吸光度。红葡萄酒：吸取10ml样品稀释至100ml，再吸取1ml稀释的样品按上法进行测定。四、结果计算

31、样品吸光度数据在标准曲线上查出相应的酚浓度，即为样品中总酚的实际含量。 红葡萄酒需乘上稀释倍数。实验十、葡萄酒中单宁的测定一、原理 单宁类化合物，在碱性溶液中，能将磷钼酸和磷钨酸盐类还原成蓝色化合物，蓝色的深浅程度与单宁含酚基的数目成正比。二、仪器与水试剂1、试剂1）福林丹尼斯试剂： 在750ml蒸馏水中加入100g钨酸钠，20g磷钼酸，50ml浓磷酸。加热回流2小时，冷却，加入蒸馏水稀释至1000ml。12 / 182）碳酸钠饱和溶液： 称取20g无水碳酸钠溶于100ml蒸馏水中，在7080溶解，放置过夜，次日加入少许水合碳酸钠到饱和溶液中做晶种，使结晶析出，24h后过滤后备用。3）单宁酸标准溶液： 称取0.500g单宁酸，用水溶解，定容至100ml。2、仪器 分光光度计 恒温水浴 圆底烧瓶 100ml容量瓶 冷凝管三 、操作步骤1）标准曲线的绘制分别吸取0、0.5、1.0、1.5、2.5、5.0、7.5、10.0ml的单宁酸标准溶液于50ml的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。分别吸取1ml上述溶液于100ml的容量瓶中，加入70ml的蒸馏水，加入5ml福林丹尼斯试剂，10ml的饱和碳酸钠溶液，加水至刻度摇匀。30min后以空白做参比，在760nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，100ml溶液中单宁酸