头屑评估标准

1、1. 去屑产品功效评价22. 去屑产品功效评价方法22.1. 实验室评估22.1.1. 按头屑的严重程度评分22.1.2. 按马拉色菌菌量分级32.2. 受试者自评62.3. 仪器检测法6头屑评定方法1. 去屑产品功效评价 与脂溢性皮炎相比，头皮屑炎症反应较轻，除少数严重患者寻求药物治疗外，绝大多数患者将各类头屑洗发用品作为治疗首选。头皮屑的发生与马拉色菌的感染密切相关的观点已得到广泛认可，关于去头屑产品功效，主要采用随机双盲自身对照研究，通过研究者评估、受试者自评及马拉色菌定量培养方法，比较试验前后两侧头皮的临床评分及马拉色菌量的变化来评价去头屑香波的功效，同时进行安全性评估。关于头皮屑严重

2、度评分方法目前没有具体的统一的评价标准，大多采用肉眼观察。2. 去屑产品功效评价方法2.1. 实验室评估2.1.1. 按头屑的严重程度评分 头屑的严重程度评分（头皮粘附鳞屑评分，adherent scalp flaking score）。国外的研究中最常采用的是“黏着性头屑十级评分法”，即0级表示无头屑（无），1-2级为小片粉状灰白粗糙鳞屑（少量），3-4级为小至中等大小屑片（轻度），5-6级为与头皮疏松相连的大而薄的屑片（中度），7-8 级为大的黏着性屑片（明显），9-10级为与头皮紧密附着的白至黄色的较厚鳞屑（严重）。参照依据：A randomized, double-blind, pla

3、cebo-controlled trial of ketoconazole 2% shampoo versus selenium sulfide 2.5% shampoo in the treatment of moderate to severe dandruff引文出处：试验中多将头皮分多个区域进行综合评分，或对皮屑最严重的区域评分，并以评分在某界定值以上作为受试者纳入的标准。临床上将头皮屑程度分为4级：0=无鳞屑；1=轻度鳞屑；2=中度鳞屑；3=重度鳞屑；4=极重度鳞屑。例：某去屑产品效果评价实验纳入受试者评分标准：实验前两天不洗头发，固定两名专业医生检查，左右二侧均选取头皮屑最严重部位

4、，按每1平方厘米大小头皮区域中皮屑片数评分，0=无头皮屑；l=轻度，每平方厘米头皮上皮屑数少于5片；2=中度，每平方便米头皮上皮屑数5-10片；3=重度，每平方厘米头皮上皮屑数10-20片。4=极重度，每平方厘米头皮上皮屑数多20片以上。每侧对称分别选取3处观察区，将每处头皮屑的评分值相加，取均值用于统计分析。受试者纳入标准：头皮屑评分在中度以及中度以上。2.1.2. 按马拉色菌菌量分级作为评价去屑产品功效的试验指标，除头皮屑的严重度评分外，已将马拉色菌的检测作为功效评估的重要指标，马拉色菌菌量分级已被用于评价去头屑香波的有效性。在对去屑香波抗马拉色菌活性的评估中，无论使用镜检法还是培养法，大

5、多数试验仍局限在定性研究上。作为一项重要的实验室评估指标，马拉色菌的定量检测在今后去头屑化妆品功效研究中显得极有意义 。（1）镜检法（引文1：马拉色菌显微镜检查的方法学比较；引文2：美兰染色法在马拉色菌检测中的应用） 载液：10%氢氧化钾水溶液；派克墨水染液：派克墨水50ml+氢氧化钾10g, 加水至100ml；美兰染液：美兰0.3g，加水至100ml；龙胆紫染液。美兰染色法和派克墨水染色法在头皮屑疾病中马拉色菌的检出率没有显著性差异，但派克墨水染色更具有对马拉色菌染色的特异性，头皮屑是单一由马拉色菌感染的疾病，可采用美兰或派克墨水染色法之一。美兰染色后在上述三种标本可见圆形或卵圆形的深蓝色孢

6、子或菌丝背景可见浅蓝色皮屑未见脂滴气泡等孢子或菌丝与背景区分较明显 派克墨水染色后在上述三种标本中可见圆形或卵圆形的浅蓝色孢子或菌丝背景呈浅红色皮屑不着色可见脂滴气泡等。两种染液对马拉色菌均上色迅速可在滴加染液后立即观察。两种染色法染色效果见图1-2：不同载液马拉色菌检出率比较：龙胆紫法检出率>派克墨水法>10%氢氧化钾法。龙胆紫法须冲洗染液、烘干玻片并且油镜观察, 步骤较繁琐，不如派克墨水法简便快捷。在菌量较少的标本中必须用龙胆紫法染色才能有较高的检出率。三种载液染色后马拉色菌检出结果比较入表1所示：取材方法：透明胶布粘贴法：用1.5cm长和1 cm宽的透明胶布贴于头皮处，1mi

7、n后快速撕下。将此带有皮屑的胶布贴附于加有1滴载液的玻片上(尽量贴平，不要有气泡)，立即镜检。锉刀刮取法：用锉刀轻锉头皮处，取皮屑放在玻片上，加1滴载液，盖片(或透明胶布)后镜检。镜检见皮屑内有数量不等的圆形孢子和(或)短小、稍弯曲、粗壮的菌丝。对所取标本分别滴加1-2滴10%氢氧化钾载液、美兰染液或派克墨水染液染色后在显微镜下观察记录检出阳性率及染色效果。取材方法比较：在取材方法上, 透明胶带粘贴法和钝刀刮取法进行比较, 检出率差异无统计学意义。但胶带粘贴法不损伤皮肤，安全性较高, 可以多处反复取材，用于头屑检测。两种取材方法镜检结果如下：1）检测孢子数量 国外研究多采用单位面积头皮上定植孢

8、子数量的变化作为功效评价指标。马拉色菌是双相嗜脂性条件致病菌，分布在皮脂腺分泌旺盛区域，可通过镜检来检测该菌。采用胶带法对马拉色菌显微镜下高倍视野孢子密度以及菌的分布密度进行分级评价。该方法材料简单，取材方便，并能较准确地反映头皮上菌的分布密度，对无头皮屑者也适用。在镜检法中，采用胶带法对马拉色菌显微镜下高倍视野孢子密度作为抗马拉色菌的评价指标。 直接计数法：方法步骤：用市售透明胶带（宽1 cm）在有头皮屑者头皮屑最严重部位取材。将黏过头皮的胶带剪成约5cm长，均匀平铺在加有派克墨水+10g/L KOH染液或美兰染液的载玻片上，染色约20-30s后在显微镜下观察并记录马拉色菌密集程度及染色效果

9、。美兰染液将孢子或菌丝染为深蓝色，派克墨水染液将孢子或菌丝染为浅蓝色。美兰染色后可见圆形或卵圆形的深蓝色孢子或菌丝，背景可见浅蓝色皮屑，未见脂滴、气泡等，孢子或菌丝与背景区分较明显。派克墨水染色后标本中可见圆形或卵圆形的浅蓝色孢子或菌丝，背景呈浅红色，皮屑不着色，可见脂滴、气泡等。两种染液对马拉色菌均上色迅速，可在滴加染液后立即观察。采用标准：在高倍镜下选取5个视野，平均每高倍视野0分<5个孢子，阴性；1分=较少，（10±3）个“+”；2分=中等，（20±5）个“+”；3分-4分=大量或密布（40±10）个“+”。 参考标准：引文3：The importan

10、ce of microscopic examination in the management of desquamative diseases of the scalp 计算机图像分析检测：一项比较去屑香波功效的试验研究采用具一定压力的自动黏着性圆盘，将其放在头皮屑最严重的区域约5秒钟，取下后染色20分钟，经计算机图像分析系统计算每平方毫米皮屑区定植的孢子数量，通过使用不同香波前后单位面积头皮孢子数量的变化作为抗马拉色菌功效判读的指标。（2）培养法（阳性率法+菌落数法）在培养法中，因马拉色菌在体外生长有较严格的脂质要求，培养较普通酵母样菌困难，国内所作研究中多采用特殊培养基，将马拉色菌培养阳

11、性率作为去屑香波功效的察指标。 实际上，97%健康者头皮中可携带马拉色菌，所以培养阳性率等定性指标并不敏感，也难客观反映去屑香波抗马拉色菌的功效。有学者已提出应用定量法评价抗真菌药物的有效性。主要通过取样培养后定量马拉色菌菌落数的方法来评价去屑的有效性。 例：去屑产品受试者标本取样以及培养：每一受试者头皮分左右两侧，左右对称在距离头皮正中线2em及前额发际线分别为5cm、12cm及19cm连线交接处各取三处直径2厘米大小正方形区域（面积4cm2），以灭菌后的一次性微孔透气胶带取材或无菌棉拭子取材。以无菌棉拭子蘸取适量生理盐水，每区域反复擦洗头皮三次，每侧共九次，擦洗下的头皮屑棉拭置lml生理盐

12、水消毒离心管中，经震荡均匀后接种至含5芝麻油的氯霉素沙堡氏葡萄糖琼脂培养皿（直径9cm）上，37恒温箱培养7-10天，所有生长出的菌落隔天观察菌落形态，并挑取培养基上生长的单菌落行染色镜检确定是否为马拉色菌。实验室观染色时将各菌种挑取少量于载玻片上分别滴加美兰染液派克墨水染液染色并在显微镜下观察记录上色时间及染色效果（阳性率法）。统一第八天计算每平方厘米头皮马拉色菌菌落数（菌落数法）。2.2. 受试者自评在研究者进行临床评估的同时, 头屑者使用香波后的自身感受日渐受到重视。越来越多的研究采用受试者自我评价来综合评估去屑香波的功效。受试者的自我评价有不同的评分方法，如一项对 1%联苯苄唑香波治疗

13、头皮屑的疗效观察中，研究者及受试者各自对各种临床疗效进行评估，其评分标准为0分=加重，1分=无改善，2分=中度改善，3分=完全改善；研究者及受试者均认为2分或 3分以上才判定为有效。自评方法需要受试者认真细致，密切配合，如结果可靠，可在较大程度上减少研究者评估的主观性和片面性，并可对香波的安全性以及受试者对香波美容效果的满意和接受的程度作出评价，使临床评估更加全面客观，故自评方法已在国外的评估试验中广泛采用。2.3. 仪器检测法（1） 紫外线增强可视法（ultravioletlight-enhanced visualization，ULEV）（国内暂无使用此方法进行头屑检测） 引文4：Quantification of dandru