2015版药典培养基适用性验证

1、培养基验证文件验证文件名称验证文件编码计数培养基适用性检查验证方案TS-YZ-2522-01制药有限公司制药有限公司验证立项申请表验证立项题目计数培养基适用性检查的验证立项编号TS-YZ-2522-01验证形式验证立项部门质量部申请日期年 月曰验证对象计数培养基适用性验证目的 及验证容需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用 性检查。本次验证的目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡 萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及酵母菌数测定。主管部门 审核意见同意对计数培养基适用性检查试验方案进行验证。 年 月日对验证方案的编制及实施要求验证方案编制应科学，合理，方法应切实可行，实施必须按照

2、方 案进行。验证总负责人批准经审核批准对计数培养基适用性检查进行验证。签字：年 月曰验证方案的审批起草部门签名日期化验室质量部批准部门签名日期质量部验证总负责人验证方案目录1 、概述2 、验证目的3 、验证围4 、验证项目小组成员及职责5 、验证合格标准6 、试验材料7 、菌液制备8 、适用性检查9、验证记录10、验证结论及综合评价计数培养基适用性检查的验证方案1. 验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基应进行培养基的适用性检查。本次验证的 目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及 酵母菌总数测定。2. 参照标准：中国药典2015年版四部1105非无菌产

3、品微生物限度检查法。3. 验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。4. 验证小组人员及职责：人员组成部门职务/职称职责组长质量部副部长负责验证期间各部门的协调及整个验 证过程的具体实施。成员化验室主任负责验证方案的起草及具体实施，确 保验证过程能按方案规定的程序进 行，负责各种验证资料（检查结果） 的整理，负责验证报告的编写。化验室化验员化验室化验员负责验证方案的审核及批准； 负责出具检 验报告；审查验证报告及发放验证报告； 负责验证文件的管理化验室化验员负责验证报告的编写规；审查验证报 告及发放验证报告。5. 合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌

4、落平均数的比值应 在0.52围，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6. 试验材料：6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。6.2. 仪器设备：621. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器6.22 GHT-00双人净化工作台6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培养箱（2025C ）6.2.5. LRH-250 生化培养箱（3035C ）6.2.6. 电热恒温干燥箱微波炉6.3.验证用培养基名称生产厂家批号6.4.验证用菌株：（第代）验证菌株锂伞甘 培养基培养温度培养时间（小时）7.菌液制备按6.4规定程序

5、培养各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfu/ml的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入 35ml含0.05% （ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将抱子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出抱子悬液至无菌试管，用含 0.05% （ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白 胨缓冲液制成约为50100cfu/ ml的黑曲霉抱子悬液。8. 适用性检查：8.1. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml,每株试验菌平行制备

6、 2 个平皿，分别注入 2 个无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂 培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置 3035C培养24小时，计数；取白色念珠菌 的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼 脂培养基， 并作阴性对照，混匀，凝固，置 2025C培养72小时，计数；取黑曲霉菌 的菌液（50100cfu/ml ） 1ml，注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基， 每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养168小时，计数。8.2. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，

7、分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备 2 个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置 3035E培养24小时，计数；取白色念珠菌 的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对 照培养基，每株试验菌平行制备 2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025E培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌平皿 中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备 2个平皿，并作阴性 对照，混匀，凝固，置2025E培养168小时，计数。9. 验证记录10. 验证结论及综合评价日期：评价

8、人：附表1:计数培养基适用性检查验证记录试验时间年月日完成时间年_月_ 日验证菌株平皿号验证培养基组（cfu / ml）阴性对照(cfu / ml)对照培养基组（cfu / ml）阴性对照(cfu / ml)菌落平均数的比值（应在0.52围）大肠埃布困12（培养3天计数）平均值金黄色葡萄球菌12（培养3天计数）平均值枯草芽抱杆菌12（培养3天计数）平均值白色念珠菌12（培养5天开始计数）平均值黑曲霉菌1（培养5天开始计数）2平均值结论复核人 试验人复核人 试验人验证报告的审批起草部门签名日期化验室质量部批准部门签名日期质量部验证总负责人验证报告1. 验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基

9、应进行培养基的适用性检查。本次验证的 目的是确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基是否适合需氧菌、霉菌及 酵母菌总数测定。2. 参照标准：中国药典2015年版四部1105非无菌产品微生物限度检查法。3. 验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基的适用性检查。4. 验证小组人员及职责：人员组成部门职务/职称职责组长质量部副部长负责验证期间各部门的协调及整个验 证过程的具体实施。成员化验室主任负责验证方案的起草及具体实施，确 保验证过程能按方案规定的程序进 行，负责各种验证资料（检查结果） 的整理，负责验证报告的编写。化验室化验员化验室化验员负责验证方案的审核及批准； 负责出具

10、检 验报告；审查验证报告及发放验证报告； 负责验证文件的管理化验室化验员负责验证报告的编写规；审查验证报 告及发放验证报告。5. 合格标准：被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应 在0.52围，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6. 试验材料：6.1. 被验证产品：胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基。6.2. 仪器设备：621. YXQ-LS-100G型立式压力蒸汽灭菌器6.22 GHT-00双人净化工作台6.2.3. BSC-110011A2-X 生物安全柜6.2.4. MJ-250I型霉菌培养箱（2025C ）6.2.5. LRH-250 生化培养箱（

11、3035C ）6.2.6. 电热恒温干燥箱微波炉6.3.验证用培养基名称生产厂家批号6.4.验证用菌株：（第代）验证菌株锂伞甘 培养基培养温度培养时间（小时）7.菌液制备按6.4规定程序培养各试验菌株。取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液制成约为50100cfu/ml的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入 35ml含0.05% （ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，将抱子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出抱子悬液至无菌试管，用含 0.05% （ml/ml ）聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白 胨缓冲

12、液制成约为50100cfu/ ml的黑曲霉抱子悬液。8. 适用性检查：8.1. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml,每株试验菌平行制备 2 个平皿，分别注入 2 个无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂 培养基，并作阴性对照，混匀，凝固，置 3035C培养24小时，计数；取白色念珠菌 的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入2个无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼 脂培养基， 并作阴性对照，混匀，凝固，置 2025C培养72小时，计数；取黑曲霉菌 的菌液（50100cfu/ml ） 1ml，注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，

13、每株试验菌平行制备2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025C培养168小时，计数。8.2. 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽抱杆菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪大豆胨琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备 2 个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置 3035E培养24小时，计数；取白色念珠菌 的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对 照培养基，每株试验菌平行制备 2个平皿，并作阴性对照，混匀，凝固，置2025E培养72小时，计数；取黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml ）各1ml，分别注入无菌

14、平皿 中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂对照培养基，每株试验菌平行制备 2个平皿，并作阴性 对照，混匀，凝固，置2025E培养168小时，计数。9. 验证记录10. 验证结论及综合评价附表1:计数培养基适用性检查验证记录试验时间 _年_月_ 日完成时间年_月_ 日验证菌株平皿号验证培养基组（cfu / ml）阴性对照(cfu / ml)对照培养基组（cfu / ml）阴性对照(cfu / ml)菌落平均数的比值（应在0.52围）大肠埃布困12（培养3天计数）平均值金黄色葡萄球菌12（培养3天计数）平均值枯草芽抱杆菌12（培养3天计数）平均值白色念珠菌12（培养5天开始计数）平均值黑曲霉菌1（培养5天开始计数）2平均值结论复核人 试验人复核人 试验人制药有限公司验证证书验证文件名称计数培养基适用性检查的验证验证文件编号TS-YZ-2522-