实验三黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定

1、实验三 黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。黄连为毛茛科黄连属植物黄连（Coptis chinensis Franch。），三角叶黄连（C。deltoidea C。 Y。Cheng et Hsiao）或云连（C。teetoides C。Y。 Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，

2、可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。 R1 R2 R3 R4 R51R1OR2OR5£-OR3OR4+3 CH3 HCH2CH3 CH3 CH3 CH3 HCH2CH2CH2CH23H CH3 CH3 CH3 H2345小檗碱 (Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110时，其颜色加深变暗色。Mp.14

3、5至160即分解。OCH3H3NHOCH3OH小檗胺H3COHCH3游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。一、实验目的1. 学会从黄连中提取、精制盐酸小檗碱的方法； 2. 学会

4、小檗碱的化学与色谱检识方法。二、实验原理利用小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大，而盐酸盐几乎不溶于水的性质，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用水提出；再使其转化为盐酸盐，结合盐析法降低其在水中的溶解度，制得盐酸小檗碱。三、实验内容（一）盐酸小檗碱的提取1.润湿取黄连粗粉50g置烧杯中，加0.3%硫酸约10ml润湿，放置30min2.装筒（分次装入渗漉筒并排气）3.浸渍用0.3%硫酸浸泡过夜4.渗漉收集910倍量的渗漉液等待空余时间：10g硅胶G + 30ml(0.8 % CMC-Na)研匀，铺板（二）分离1.取渗漉液，加40% NaOH调PH至1112，放置过夜；2.抽滤，将滤液加浓盐酸调PH值2

5、3，加入6% NaCl，搅拌均匀，放置过夜；3.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱粗品。（三）精制1.将上述粗品放入25倍量沸水中，于水浴上加热使溶解，趁热过滤液在65时加浓盐酸调PH值23，放置过夜2.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱精品。（四）检识1. 取自制精制盐酸小檗碱 50mg，加水 5ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液2滴显橙红色，放冷，加丙酮4滴，即发生浑浊，放置后，生成黄色沉淀，即为丙酮小檗碱。2. 取自制精制盐酸小檗碱少许，加入稀硫酸8ml溶解，搅拌均匀，分置两支试管中，一支加漂白粉少量，即显樱红色；另一支加入2滴浓硝酸,也显樱红色。3. 取自制精制盐酸小檗碱少许，加稀硫酸12m1使溶解，分置于三支试管中，分别加入碘化汞钾试剂、碘化铋钾试剂及硅钨酸试剂，观察其产生的现象。4. 盐酸小檗碱的薄层层析吸附剂：硅胶G硬板(未活化)样 品：自制精制盐酸小檗碱乙醇溶液盐酸小檗