肝内胆管结石和肝内胆管癌关系的分子学机制研究进展

1、    作者：卢明书赵志强张启文【摘要】  肝内胆管癌早期难以发现,根治性切除机会少,预后不佳。肝内胆管结石是肝内胆管癌的高危状态。肝内胆管结石导致肝内胆管癌产生是多步骤过程。cyclin D1、p53、p16等多种基因在肝内胆管癌发生、发展过程中起重要作用。通过研究肝内胆管结石和肝内胆管癌间的关系，有望发现治疗肝内胆管癌的新药物和新方法。 【关键词】  肝内胆管结石·胆管肿瘤·分子学机制   肝内胆管癌发病率和病死率有逐年增高的趋势,目前缺乏早期诊断的方法，对其发病机制了解

2、较少。一般认为，胆管癌的发生与其他肿瘤一样,也是一个渐变的过程,都要经历暴露于高危因素,细胞增殖调控异常,逃避凋亡与免疫监视,最后发展成癌的过程。研究表明，cyclin D1、p53、p16等多种基因在肝内胆管癌发生、发展过程中起重要作用，患有肝内胆管结石的胆管上皮细胞经过增生、萎缩等多步骤变化，最终导致胆管癌发生-。    1p16    p16/cyclin D1/Rb 路径是重要的细胞分裂周期调控器。p16通过结合、灭活细胞周期调节蛋白依赖激酶4和细胞周期调节蛋白依赖激酶6发挥抑癌作用。文献报道在患有肝内胆管结石的胆管内乳头状新生物中，p16蛋白表

3、达降低， p16启动子的超甲基化使p16蛋白进一步减少。胆管内乳头状新生物被认为是胆管癌的癌前病变，因此认为p16在由肝内胆管结石向肝内胆管癌转变的早期阶段即失活。p16启动子的超甲基化在包括肝内胆管癌在内的多种肿瘤中均可发现4。甲基化特异性PCR技术可以简单、容易、敏感检测超甲基化-，因此，检测p16超甲基化可以作为肝内胆管结石发展为肝内胆管癌早期诊断的有用指标。    2环氧化酶2    研究表明环氧化酶2（cyclooxygenase 2，COX2）在肝内胆管癌等多种人类肿瘤中过度表达，在肿瘤发生过程中起重要作用。Endo等对COX2在肝内胆管结石

4、患者胆管中的表达应用免疫组化方法进行研究，表明COX2过度表达比例在较大增生胆管（1 000 mm）中高于较小增生胆管（5001 000 mm）。这与胆管癌多发生于较大胆管相符合。COX2是非类固醇类抗炎药物主要靶分子。行胆总管空肠吻合术的大鼠，COX2特异性抑制剂可以减少反流性胆管炎和肝内胆管癌的发生。需要进一步临床试验来评估COX2特异性抑制剂预防肝内胆管结石患者因胆管感染引发胆管癌的作用。    3前列腺素E2    炎症部位的前列腺素E2 （PGE2）因COX活性上调而升高。PGE2通过抗细胞凋亡效应、增加血管形成和抑制细胞与细胞互相粘附活性而影

5、响癌症发生和发展。Shoda等报道，与正常胆管标本相比，无论是否受到累及，肝内胆管结石患者胆管标本PGE2表达明显升高；与正常胆管标本比较，肝内胆管结石受累胆管的PGE受体亚型EP2、EP3、EP4表达明显升高。分析胆管腺癌细胞功能，发现EP4选择性激动剂和PGE2都会导致剂量依赖性DNA合成、集落形成数量增加。相反，EP4选择性抑制剂可以抑制PGE2诱导的细胞增殖。这些研究表明，PGE2可能通过EP4受体在肝内胆管结石相关性胆管癌的发生中起重要作用，而EP4特异性抑制剂可以消除或者减轻与肝内胆管结石相关的慢性增生性胆管炎的癌前病变。    4c-met 

6、60; c-met基因在人类多种肿瘤的发生中起重要作用。c-met原癌基因编码肝细胞生长因子的膜酪氨酸激酶受体。Terada等12报道32例肝内胆管结石患者增生的胆管细胞中，c-met蛋白过度表达26例；其中15例c-met蛋白在新生胆管上皮中过度表达，并与肝内胆管癌肿瘤分化程度相关。Kokuryo等13应用反转录脱氧核糖核酸列阵筛选检查发现，c-met在肝内胆管结石肝叶多过度表达。这些研究表明c-met在肝内胆管癌早期阶段胆道上皮中起重要作用。    5尾型同源盒转录因子2    尾型同源盒转录因子2（caudal-related homebox tr

7、anscription 2，CDX2）作为肿瘤抑制基因在人类癌症发生中起重要作用。CDX2是一同源基因，调控肠上皮细胞增殖和分化4。Ishikawa 等认为肝内胆管结石患者胆管内乳头状新生物CDX2依赖性肠上皮化生是癌前病变，CDX2异常表达与黏蛋白2 （mucin 2，MUC2） 在肝内胆管癌和肝内胆管结石相关性胆管内乳头状新生物中的过度表达相关。MUC是体内多种上皮细胞分泌的一组高度糖基化的糖蛋白的总称。在肿瘤组织中MUC常有异常表达，已经作为部分肿瘤的生物学标志物用于临床诊断、治疗和预后判断。MUC1和MUC2表达常与炎症或癌前病变有关。研究显示MUC2在黏液型胆管癌中高表达，并且高表达

8、与较好预后相关，表明通过CDX2依赖性肠上皮化生，CDX2和MUC2的协调调控在肝内胆管癌中起重要作用。    6螺旋菌属    幽门螺杆菌（helicobacter pylori，HP）通过诱导癌基因激活和抑癌基因失活导致细胞癌变的作用已为绝大多数学者认同。运用PCR方法在胰头癌和胆管癌的患者胆管内检测到HP，从此HP与胆管恶性疾病的关系引起了人们的注意。胆汁抵抗性螺旋菌属可从胆汁、胆管组织、肝组织中分离出来。研究表明胆汁抵抗性螺旋菌属在胆囊疾病发病机制中起重要作用，与HP阴性病例相比，肝内胆管结石患者HP阳性病例胆管增殖细胞核抗原标记指数升高；螺旋菌

9、属可以加速胆管细胞动力学发展而导致胆管癌发生。    7结语    肝内胆管结石和肝内胆管癌发生的分子学机制研究对肝内胆管癌的预防、诊断和治疗具有重要意义，通过研究两者间的关系，有望发现治疗肝内胆管癌的新药物和新方法。【参考文献】  1 Nakanuma Y, Harada K, Ishikawa A, et al. Anatomic and molecular pathology of intrahepatic cholangiocarcinomaJ. J Hepatobiliary Pancreat Surg, 2003,10（4

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