麻风耐药研究进展ppt课件

1、麻风耐药研讨进展中国医学科学院皮肤病研讨所沈建平麻风耐药的种类 原发性耐药：患者感染了耐药菌后发病 继发性耐药：患者治疗后出现对药物耐受。 单疗、剂量、疗程或药代动力学等缘由导致耐药。麻风菌产生耐药的机制 新发麻风患者体内的麻风菌群是由大量药物敏感菌株的优势菌群和少量由于基因自然突变产生的能绕过药物作用部位的药物耐受菌株的弱势菌群组成。 患者无论是行单疗，或者虽然有多种药物治疗，但是治疗不规那么，均可导致类似于只需单一药物到达有效血浓度的情况，该药物将杀灭对该药物敏感的菌群，而少量因自然突变产生的对该药物耐药的菌株成活，并逐渐大量繁衍成为优势菌群，最终出现对该药耐药表现。麻风菌产生耐药的机制

2、虽然有麻风结合化疗，专家担忧利福平每月用药监服，而氨苯砜、氯法齐明那么为每日自服，病人依从性较差可致后二者药物剂量缺乏，那么类似于利福平单疗。 此外氨苯砜与利福平联用时假设病人对氨苯砜已耐药那么能够亦等同于利福平单疗，最终导致利福平耐药。 麻风菌产生耐药的机制 菲律宾在耐药监测中发现6例未治疗的新发病人存在folp1突变氨苯砜耐药株，5例居住于同一乡村研讨暂未发表，提示结合化疗前存在的氨苯砜耐药菌株能够流行传代到如今。 这就解释了为何结合化疗后依然有氨苯砜耐药菌株麻风菌产生耐药的机制细菌耐药的产生可以存在多种机制，包括： 1、酶性灭活或抑制，二氢叶酸合成酶， RNA聚合酶， DNA旋转酶 2、

3、修饰抗生素 3、减少抗生素与细胞外表靶点的结合， 4、封锁细胞外表通道从而降低细胞对抗生素的摄取，自动泵出抗生素分子 5、抗生素靶点的过度生成 麻风菌产生耐药的机制 氨苯砜为p-氨基苯甲酸的竞争性抑制物，可竞争性结合并抑制folP基因编码的二氢叶酸合成酶，该酶是细菌叶酸生物合成途径的关键酶，因此是氨苯砜的抗菌作用靶点。目前发现的氨苯砜耐药基因的突变皆发生在folp1片段的砜类耐药决议区域，且90%多发生在编码子53及55区域。 鼠足垫药敏实验提示氨苯砜过敏可按用量分为轻、中、重三种，而耐药基因突变检测法与MFP法比较后发现，存在folP基因突变根本为中重度的氨苯砜耐药 麻风菌产生耐药的机制 利

4、福平为与RNA聚合酶结合，结合抑制DNA依赖的mRNA转录过程，从而发扬其杀菌作用，而rpoB即编码RNAP的亚基的片段。目前发现的与利福平耐药相关的rpoB突变位点主要有密码子425位、531位、407位、408、410位、416位、420位、427位、428位、513位、516位、517位、526位、532位、533位、547位等，其中部分位点的突变仍需求大量标本检测的进一步证明。除点突变致氨基酸置换导致蛋白构造的改动外，尚发现耐药病人rpoB 409位的插入突变，为一个6bp的片段。 麻风菌产生耐药的机制目前研讨发现与氧氟沙星耐药相关的麻风菌突变大多位于基因gyrA片段。 基因gyr编码

5、DNA旋转酶，其中gyrA编码A亚基，gyrB编码B亚基，氧氟沙星等氟喹诺酮类药物可结合DNA旋转酶的A亚基从而抑制DNA的复制。：基因gyrA片段上密码子突变部位在89位、91位，92、95位，突变在结核菌的研讨中已显示能够与耐药有关。国际上Kim及You等人两项研讨各发现一例氧氟沙星耐药病例，为gyrB片段的205位密码子AspAsn突变。 麻风疑似耐药的临床表现1、细菌指数不阴转或反而升高；2、近期复发停药1年内复发或反复复发多次；3、化疗后依然见到完好染色菌；4、皮损长期存在，衰退不明显；5、治疗中或疗后发生麻风降级反响，皮损增多，分散。麻风菌耐药的检测方法小鼠足垫接种法MFP 该方法

6、缺陷包括耗时太长普通需6-12月、标本获取后至接种时间不可太长普通小于72小时、需求一定量的活菌方可生长普通至少5104/ml等。 因此限制了其大范围的运用，但是MFP仍是最经典的麻风药敏检测方法，通常在新方法的研讨中作为方法对照。麻风菌耐药的检测方法放射性呼吸测定 该方法的原理是活的麻风杆菌能氧化14C标志的棕榈酸释放14C标志的CO2，因此可检测出麻风菌的活力及在不同药物作用下活力的改动，从而在2周内检测出药敏结果，然而该方法需求菌量较多，且需求精细的仪器设备，亦限制了其运用。麻风菌耐药的检测方法分子生物学方法 由于发现了耐药与某些基因的突变有相关性，因此可用分子生物学检测基因突变方式来检

7、测耐药。而分子生物学检测方法较其它方法更为简便省时，对样本运输亦无特殊要求，因此该类方法逐渐开展起来。 将PCR扩增阳性的产物进展测序，直接检测扩增片段的一切核苷酸序列，将其与野生敏感菌株该片段比对后那么可寻觅突变的有无以及突变位置。全球麻风菌耐药的情势 MDT针对不同的治疗靶点，以确保至少有一种药物对病人体内的麻风菌可起到杀伤作用。然而，由于种种缘由，发现MDT治疗终了后仍有部分病人BI值继续不降或下降缓慢甚至上升，提示治疗不敏感/抵抗的存在，且能够与耐药有关。 WHO全球控制工程的数据显示2019-2021年全球的复发病例数维持在2000-3000例/年之间，而报告复发病例的国家数由201

8、9-2019年的40余个激增至2021年的122个后，2019年初病例数为3120例， 提示在各国对复发病例的逐渐注重下，发现的复发病例数亦有上升的趋势。全球麻风菌耐药的情势 中国近10年来的复发病例数维持在约150例/年，虽然目前发现复发的主要缘由为耐久菌的繁衍和/或再感染，但是国内存在以下几种能够的导致耐药的危险。 中国氨苯砜买不到，但是利福平四处都有买，导致潜在的患者自行利福平单疗。 上个世纪产生的氨苯砜耐药菌株的流行传代，在一些患者中可导致潜在的利福平单疗。 结合化疗的不规那么，导致利福平外的药物血浓度降低，导致实践上的利福平单疗。 全球麻风菌耐药的情势 由于结核杆菌的耐药情势，麻风耐

9、药亦引起国内外学者的注重。2019年的WHO麻风全球规划在印度阿格拉召开的会议上，初次回想了麻风耐药的问题及目前在耐药检测手段。 2019年之前仅三个国家搜集MB复发及耐药监测数据，包括哥伦比亚2019-2019、印度尼西亚2000-2019及缅甸2019-2019，发现的MB复发病例分别为28、21、20例，其中缅甸仅10例进展了耐药检测。 全球麻风菌耐药的情势 2019年10月WHO在越南河内举行了第一次全球麻风耐药监测会议，参与国家为巴西、埃塞俄比亚、印度、马里、缅甸、越南六个国家，会议报告在监测点共69例复发，其中检测58例。会议提出要扩展耐药监测点和参比实验室数量，改良监测的质量指南

10、。 2021年10月WHO在法国巴黎举行的第二次全球麻风耐药监测会议，中国第一次参与监测会，会上还有巴西、哥伦比亚、印尼、巴基斯坦、菲律宾、乌干达、印度、缅甸、越南共报告887例复发病人，其中213例完成耐药检测。 全球麻风菌耐药的情势 2019年11月WHO在日本东京举行第三次全球麻风耐药监测会议添加一个监测点为也门，109例MB复发病人中有88例完成耐药检测。 2019年WHO在印度海德拉巴举行第四次全球麻风耐药监测会议。会议以为MDT方案依然有效，目前监测网络含实验室数量要扩展。启动新抗麻风药物研讨。鼓励发表与复发有关的临床和其他科研文章，鼓励在新患者中寻觅原发性耐药，但是与复发病人的资

11、料要分开。氨苯砜耐药菌株流行情况 2000-2019年期间三个国家的MB复发病人的耐药检测结果示，有8例氨苯砜耐药突变。 2021年的各国耐药监测显示有12例氨苯砜耐药突变。 2019年有9例氨苯砜耐药突变，一例位于中国。 我国另有2例治疗抵抗病人发现有氨苯砜耐药突变研讨暂未发表。 翁小满等于7例复发病例中发现2例为氨苯砜耐药菌株， 35例新发病人中并未发现氨苯砜耐药。 温艳等于35例复发病例中发现12例氨苯砜耐药菌株，用巢式PCR-结合DNA测序，检测31例复发或疑似复发病人的41份石蜡标本，发现8份存在氨苯砜耐药菌株。因此氨苯砜耐药仍主要发生于复发的麻风病人， 氨苯砜耐药菌株流行情况 20

12、19年菲律宾的耐药监测发现6例未治疗的新发病人存在folp1突变株，5例居住于同一乡村研讨暂未发表，提示氨苯砜耐药菌株能够在人群中传播。 中国未见到新发病人中有原发性氨苯砜耐药。利福平耐药菌株流行情况 2000-2019年期间三个国家的MB复发病人中有6例利福平耐药突变。 2021年的各国耐药监测显示有9例利福平耐药突变，而中国57例复发病人中仅10例做了利福平耐药突变检测，并未发现阳性病例。 2019年8个国家中仅哥伦比亚发现1例利福平耐药突变，我国有1例复发病人发现有利福平耐药突变研讨暂未发表。 翁小满、温艳等人的两次研讨示复发及新发病人中均未发现利福平耐药株。 王红斌等用巢式PCR-测序

13、法检测麻风患者的皮损标本，23例患者其中7例复发未发现利福平耐药相关的rpoB基因突变。 利福平耐药相关的基因突变在中国能够尚少见，仍需大量的样本检测来寻觅并验证。氧氟沙星耐药菌株流行情况 2000-2019年期间三个国家的MB复发病人中未发现有耐药突变。 2021年的各国耐药监测显示2例氧氟沙星耐药突变，均位于印度，中国尚未发现氧氟沙星耐药株。 2019年数据显示9个国家亦未发现耐药突变菌株。 Kim、You等两项在韩国进展的研讨各发现一例氧氟沙星耐药株。麻风耐药研讨进展 近期结核菌研讨发现克拉霉素耐药能够与23SrRNA的错义突变有关，但Kim、You等两项在韩国进展的研讨暂未发现23Sr

14、RNA突变的麻风杆菌。 其它药物如氯法齐明尚未发现耐药突变位点、 米诺环素尚未在麻风中确定耐药株， 摘要摘要 麻风菌耐药研讨主要集中于寻觅耐药突变位点，其中氨苯砜、利福平、氧氟沙星等耐药已被证明与folP1、rpoB、gyrA三个基因中的不同位点的错义突变相关， 克拉霉素、氯法齐明在麻风中尚未发现耐药突变位点， 米诺环素尚未确定耐药株。 耐药检测方法包括：小鼠足垫接种法、放射性呼吸测定及分子生物学方法,分子生物学 目前WHO全球耐药监测主要集中于MB复发病例。 在中国，已发现氨苯砜、利福平耐药相关的folP1、rpoB、gyrA突变菌分别为25例和1例。展望 虽然近年来国内外研讨显示耐药病例数的数量及所占比例仍较小，而国内那么仅发现氨苯砜耐药麻风菌株，但国内耐药情况能否因监测制度不完善或检测手段不敏感等问题呈现低估形状尚不明确，且国外已有多项研讨显示多重耐药菌存在。自创于结核杆菌的耐药情势对疾病防控的宏大影响，麻风耐药问题也需引起中国麻风任务者的注重。随着分子生物学技术的提高，将为监测和控制麻风耐药菌株的流行、指点临床用药等提供协助。关于在我国加强麻风耐药监测的呼吁 一旦出现广泛福平耐药菌株流行，由于麻风化疗的特点，将导致麻风控制的成果前功尽弃，