色谱分析在物质分离中的应用--答辩稿ppt课件

1、色谱分析在海洋真菌活性成色谱分析在海洋真菌活性成分挑选中的运用分挑选中的运用论文框架论文框架研讨背景研讨背景研讨课题研讨课题论文要点论文要点结论结论1234研讨背景研讨背景色谱技术是分析化学领域最重要的分别分析手段。随着色谱研讨任务的迅猛开展，各种新的色谱方法和检测技术日趋成熟，色谱联用技术因其具有高速、高效、高分辨、微量检测及分析自动化的性能和技术优势，而显示出宽广的运用前景。u在线光谱分析uHPLC/UVuHPLC/MSuHPLC/NMRu常规光谱分析uUVuMSuNMR真菌代谢产物是非常复杂的混合物，其所含化合物可达数百种之多。对其中每一个成分进展分别、纯化及构造鉴定是一项既耗钱又耗力的

2、任务。液相色谱/光谱紫外、质谱及核磁共振联用新技术主要就是针对这种情形，为了节约时间、经费和无谓的反复性劳动而出现的。研讨课题研讨课题l 研讨内容本论文实验主要是针对一株海洋真菌的培育条件进展优化，然后进展初步的柱色谱分别与纯化，配以TLC HPLC/UV检测，盼望得到含有目的化合物的真菌培育条件。l课题意义海洋微生物代谢产物多样且具有药物活性、且微生物培育方便。利用这些丰富的海洋天然产物可用来消费高活性的海洋药物。本次研讨为后续的专性研讨提供有利的根底保证。论文要点论文要点l 实验方法l 菌株的培育条件优化l 真菌代谢产物的化学挑选l 结果与分析l 结论菌株培育条件优化菌株培育条件优化l 培

3、育基配制：培育基配制：l PDB培育基：葡萄糖培育基：葡萄糖20g/L，酵母粉，酵母粉3g/L，蛋白胨蛋白胨5g/L，味精，味精5g/L,pH6.0，50%陈陈海水煮土豆海水煮土豆200g/L，蒸馏水定容至，蒸馏水定容至1L。 l H1培育基：山梨醇培育基：山梨醇20g/L，麦芽糖，麦芽糖20g/L，味精味精10g/L，色氨酸，色氨酸0.5g/L，酵母粉，酵母粉3g/L，K2HPO40.5g/L，MgSO47H2O 0.3g/L,50%陈海水配制陈海水配制,pH6.5，蒸馏水，蒸馏水定容至定容至1L。 l 寡营养培育基寡营养培育基GMPY：葡萄糖：葡萄糖6.7g/L，蛋白胨，蛋白胨5g/L，酵

4、母粉，酵母粉3g/L，甘，甘露醇露醇20 g/L，自来水配制，自来水配制，pH7.0，蒸馏，蒸馏水定容至水定容至1L。l 大米培育基大米培育基RICE：大米：大米100 g/L，蛋白胨蛋白胨0.3g/L，海水，海水130 mll 培育方法：培育方法：l 液体培育基选用摇床动态培育，固体培液体培育基选用摇床动态培育，固体培育基选用静态培育，于生化培育箱中育基选用静态培育，于生化培育箱中28光照条件下分别静置培育光照条件下分别静置培育l 摇床培育在摇床培育在4、6、8、10、12、14天灭菌；天灭菌；固体静态培育在固体静态培育在7、10、14、17、21、25、30天灭菌。天灭菌。菌株培育条件优化

5、菌株培育条件优化真菌代谢产物的分别提纯真菌代谢产物的分别提纯u真菌代谢产物的分别纯化经过柱层析色谱的梯真菌代谢产物的分别纯化经过柱层析色谱的梯度洗脱来实现度洗脱来实现化学检测化学检测TLC检测检测HPLC/UV检测仪器为Dionex HPLC仪(P680 HPLC 蠕动泵,UVD 340U紫外可见发光二极管阵列检测器,C18柱(5m,8.0250mm)结果与分析结果与分析u培育条件优化培育条件优化结果与分析结果与分析u真菌代谢产物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选TLC 检测检测结果与分析结果与分析u真菌代谢产物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选u TLC 检测检测结果与分析结果与分析u真菌代谢产

6、物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选HPLC检测检测结果与分析结果与分析u真菌代谢产物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选uHPLC/UV检测检测u目的化合物五种规范物质的化学构目的化合物五种规范物质的化学构造和色谱图造和色谱图真菌代谢产物的化学挑真菌代谢产物的化学挑选选262.2 nm15.173min261.5 nm17.902min260.8 nm19.228min261.1 nm18.890min262.2 nm18.812min目的化合物A1-A5的化学构造的碳骨架根本一致，属于同一类物质，这决议了五种物质根本一致的紫外吸收曲线。但是五种物质的1、2、3位取代基稍有不同，所以保管时间和紫外

7、吸收的最大吸收波长稍有差别。结果与分析结果与分析u真菌代谢产物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选u四种培育基的四种培育基的HPLC/UV分析分析uRICE培育基中主要色谱峰培育基中主要色谱峰结果与分析结果与分析u真菌代谢产物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选uPBD培育基中主要色谱峰培育基中主要色谱峰结果与分析结果与分析u真菌代谢产物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选uGMPY培育基中主要色谱峰培育基中主要色谱峰结果与分析结果与分析u真菌代谢产物的化学挑选真菌代谢产物的化学挑选uH1培育基中主要色谱峰培育基中主要色谱峰结论结论u真菌培育条件优化u真菌在培育一周左右时，次级代谢最为旺盛u培育时间对于真菌的次级代谢产物的种类影响不大，对于产物产量稍有影响。u真菌的培育基成分即培育基的营养物质配比对于真菌的次级代谢产物丰富度和成分含量均有显著影响。RICE培育基所产生的代谢产物种类和产量最大。结论结论u目的化合物的化学挑选目的化合物的化学挑选uRICE和和PDB培育基培育条件下，各检