SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

1、北京雷根生物技术有限公司SDS-PAGE凝胶配制试剂盒产品简介：聚丙烯酰胺凝胶电泳（Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，简称SDS-PAGE），其作用原理在于聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开,主要用于分离蛋白质和寡核苷酸。Leagene SDS-PAGE凝胶配制试剂盒不仅可用于配制SDS-PAG

2、E凝胶，也可用于配制非变性(native)PAGE凝胶，30T试剂盒一般可以配制3040块，60T试剂盒一般可以配制6080块，具体配制的量应根据器具大小决定。产品组成：主要成分：主要由30% Acr-Bis(29:1)、1.5M Tris-HCl(pH8.8)、10% SDS、AP、TEMED、1M Tris-HCl(pH6.8)组成。自备材料：1、 制胶器具 2、 蒸馏水 3、 微量移液器操作步骤（仅供参考）：1、 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE北京雷根生物技术有限公司的分离胶(下层胶)：不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围：SD

3、S-PAGE分离胶浓度6%胶 8%胶 10%胶 12%胶 15%胶成分6%胶 蒸馏水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,pH8.8 10%SDS 10%过硫酸铵 TEMED5 2.6 1.0 1.3 0.05 0.05最佳分离范围 50-150kD 30-90kD 20-80kD 12-60kD 10-40kD配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）10 5.3 2.0 2.5 0.1 0.115 7.9 3.0 3.8 0.15 0.1520 10.6 4.0 5.0 0.2 0.2 0.01625 13.2 5.0 6.3 0.25 0.25 0.023

4、0 15.9 6.0 7.5 0.3 0.3 0.02440 21.2 8 10 0.4 0.4 0.03250 26.5 10.0 12.5 0.5 0.5 0.040.004 0.008 0.012成分8%胶 蒸馏水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,pH8.8 10%SDS 10%过硫酸铵 TEMED5 2.3 1.3 1.3 0.05 0.05配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）10 4.6 2.7 2.5 0.1 0.115 6.9 4.0 3.8 0.15 0.1520 9.3 5.3 5.0 0.2 0.2 0.01225 11.5 6.7

5、 6.3 0.25 0.25 0.01530 13.9 8.0 7.5 0.3 0.3 0.01840 18.5 10.7 10 0.4 0.4 0.02450 23.2 13.3 12.5 0.5 0.5 0.030.003 0.006 0.009成分10%胶 蒸馏水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,pH8.8 10%SDS 10%过硫酸铵 TEMED5 1.9 1.7 1.3 0.05 0.05配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）10 4.0 3.3 2.5 0.1 0.115 5.9 5.0 3.8 0.15 0.1520 7.9 6.7 5.0

6、 0.2 0.2 0.00825 9.9 8.3 6.3 0.25 0.25 0.0130 11.9 10 7.5 0.3 0.3 0.01240 15.9 13.3 10 0.4 0.4 0.01650 19.8 16.7 12.5 0.5 0.5 0.020.002 0.004 0.006成分15%胶 蒸馏水30%Acr-Bis(29:1) 1.5M Tris,pH8.8 10%SDS 10%过硫酸铵 TEMED5 1.1 2.5 1.3 0.05 0.05配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积（ml）10 2.3 5 2.5 0.1 0.115 3.4 7.5 3.8 0.1

7、5 0.1520 4.6 10 5.0 0.2 0.2 0.00825 5.7 12.5 6.3 0.25 0.25 0.0130 6.9 15.0 7.5 0.3 0.3 0.01240 9.2 20.0 10 0.4 0.4 0.01650 11.5 25.0 12.5 0.5 0.5 0.020.002 0.004 0.006注：如果配制非变性胶，参考上述配方，不加10%SDS即可配制成非变性PAGE胶。2、 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶)成分5%胶 蒸馏水 1M Tris,pH8.8 10%SDS 10%过硫酸铵 TEMED1 0.68 0.13

8、 0.01 0.01 0.001配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积（ml）2 1.4 0.33 0.25 0.02 0.02 0.0023 2.1 0.5 0.38 0.03 0.03 0.0034 2.7 0.67 0.5 0.04 0.04 0.0046 4.1 1.0 0.75 0.06 0.06 0.0068 5.5 1.3 1.0 0.08 0.08 0.00810 6.8 1.7 1.25 0.1 0.1 0.0130%Acr-Bis(29:1) 0.17注意事项：1、 过硫酸铵配制成10%溶液后，应当-20保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。有效避免失效的方法是分成呈小份，-20保存，用23次，剩余的弃用。 2、 TEMED易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。 3、 配制聚丙烯凝胶的过程中，如果室温较低，可以置于37放置，加速凝固。 4、 30%Acr-Bis(29:1