黄连等六味中药对双歧杆菌和大肠杆菌体外生长的影响

1、黄 连 等 六 味 中 药 对 双 歧 杆 菌 和 大 肠 杆 菌 体 外 生 长 的 影 响 孙力军 1, 陈玲玲 1, 李春保 2(11安徽技术师范学院工程技术系 , 安徽凤阳 233100;21南京农业大学食品学院 摘 要 : 将六味治疗腹泻的常用中药黄连 、 黄柏 、 秦皮 、 白头翁 、 地锦草 、 马齿苋煎汁后 , 各按 5%用量加入 营养肉汤和 20%PT YG 液体培养基中 , 再分别接种双歧杆菌和大肠杆菌 , 于适宜的条件培养后 , 进行菌落计数 。 结果发现 :黄连对双歧杆菌的生长略有抑制 , 但幅度较小 ; 其余各药对双歧杆菌均无明显的抑制作用 ; 而六味中药 对大肠杆菌

2、的生长均有明显的抑制作用 。 关键词 : 中药 ; 大肠杆菌 ; 双歧杆菌 ; 生长 中图分类号 :S853174 文献标识码 :A 文章编号 :1000-6354(2004 01-0007-02 一般认为 , 当有害菌在肠道内大量增殖占绝对优势时 , 会使益生菌的生长受抑制 , 结果造成肠道菌群异常而引起腹 泻 1。 人们已根据黄连 、 黄柏 、 秦皮 、 白头翁 、 地锦草 、 马齿苋 等六味中药对肠道致病菌有良好的抑制作用 , 研制出各种制 剂治疗肠道疾病 2。但这六味中药是否会对双歧杆菌等肠 道益生菌产生影响 , 目前的研究报道还较少 。并且 , 过去对 病原菌的抑菌试验多采用平皿法

3、, 而少见试管法 。为此 , 笔 者采用试管法 , 观察了上述六味中药对大肠杆菌和双歧杆菌 在体外生长的影响 , 以期更加全面地对中药治疗腹泻的机理 进行进一步地探索 。1 材料与方法1. 1 材料1. 1. 1 中药 黄连 (Coptis Chinensis Franch 、 黄柏 (Phel 2 lodendron Chinense Schneid 、 秦皮 (Cortex Fraxini Caulis 、 白 头翁 (amenone 、 地锦草 (Herba Euphorbiae Hunif usae 、 马齿 苋 (Portulaca Oleracea L. , 由本院中药实验室提供

4、。1. 1. 2 菌种 大肠杆菌 (E. Coli 、 短双歧杆菌 (B. B reve 、 青春双歧杆菌 (B. adolescentis 为本实验室保存菌种 , 均经中 国科学院微生物研究所鉴定 。1. 1. 3 培养基 PT YG 培养基 、 营养肉汤 , 按有关文献配 制 3,4。 20%PTYG 培养基 , 是将 PT YG 培养基组分按 20%量配制 。1. 1. 4 仪器 超净工作台、 高压蒸汽灭菌锅 (上海核子实验仪 器厂 ; 恒温培养箱、 SY Q 型厌氧培养箱 (上海跃进实验器械厂 。 1. 2方法 1. 2. 1 中药的制备 将黄连 、 黄柏 、 秦皮 、 地锦草 、 白

5、头翁 、 马齿苋六味中药 , 用纱布分别包扎 , 分别加水煎汁浓缩至浓 度为 1g/ml , 放入 4 冰箱备用 。另将秦皮 、 黄连 、 黄柏 、 白 头翁按质量比 (8 3 6 8 配合成方 , 煎成白头翁汤 (即经验配 方 2, 浓缩至含药 1g/ml 。1. 2. 2 对大肠杆菌生长影响试验 将六味药汁和白头翁汤 按 015ml 剂量分别加入装有 9ml 营养肉汤培养基的试管各 5支中 , 另取 5支营养肉汤对照管 , 于 115 、 30min 灭菌后 , 将大肠杆菌培养液 015ml 接种于各试管 , 于 37 温箱中培 养 1824h 。 后利用营养琼脂培养基作大肠杆菌菌落计数

6、。 1. 2. 3对双歧杆菌生长影响试验 先将双歧杆菌于 PT YG 培养基中增菌培养 , 活菌浓度控制在 1×108/ml 。将六味药 汁和白头翁汤按 015ml 剂量分别加入装有 9ml 20%PT YG 液体培养基的试管中 。另取 20%PT YG 液体培养基对照 管 , 于 115 、 30min 灭菌后 , 将短双歧杆菌 、 青春双歧杆菌 增菌液 015ml 分别接种于上述试管中 , 每种作 5个平行管 , 于厌氧培养箱中 37 培养 48h 后 , 以 PT YG 培养基作平板 菌落计数 。2 结果结果见表 1。 从表 1中可知 , 六味中药对大肠杆菌的生长均 有明显的抑

7、制作用 , 其中以黄连的抑菌作用最为明显 , 黄柏次 之 , 其余几味相差不大。 另外 , 白头翁汤中各药均对大肠杆菌有 明显抑制作用 , 但四药合方后对大肠杆菌的抑制作用并未有明 显增强。 黄连对双歧杆菌的生长略有抑制 , 但幅度较小 ; 其它几 味中药对双歧杆菌的生长没有明显的影响。表 1 中药对大肠杆菌和双歧杆菌生长的影响 (CFu/ml 菌 株 对 照 黄 连 黄 柏 秦 皮 白头翁 马齿苋 地锦草 白头翁汤 大肠杆菌 1. 6×1091. 1×1069. 8×1061. 7×1072. 5×1072. 2×1072. 3&#

8、215;1071. 2×107短双歧杆菌 2. 4×1071. 2×1071. 8×1071. 8×1072. 0×1072. 1×1072. 2×1071. 8×107青春双歧杆菌 4. 3×1077777777收稿日期 :2003-07-26作者简介 :孙力军 (1965- , 男 , 硕士 , 副教授 , 长期从事微生物生态 乳酸细菌的研究。 3 讨论3. 1 据报道 , 通过平皿试验得知 , 白头翁汤合剂中四药的抗 菌作用以黄连 、 秦皮为强 , 黄柏次之 , 而白头翁最弱 2。但本 试

9、验所得结果为黄连最强 , 依次为黄柏 、 秦皮 、 白头翁 。 由于时间仓促 , 我们没有验证六味中药平皿抑菌试验的结果 , 因 此 , 还有待于比较两方法的差异 , 查明两方法得出不同结果 的原因 。 此外 , 由于条件所限 , 本实验仅采用 5%的加药量 , 其它浓度加药量效果如何 , 仍有待于进一步研究 。3. 2 有研究报道 , 白头翁汤中各药无协同或拮抗作用 , 且白头翁汤中去掉黄连后仍有较好的抑菌作用 2。本次体外实 验结果也显示 :白头翁汤对大肠杆菌的抑制作用与单药相比 未见有显著增强 , 而临床经验证明使用白头翁汤比仅使用其 中一种药的疗效要好 , 原因可能是天然药物所含的多种

10、成分 与机体发生复杂的反应 , 结果造成临床效果与体外实验结果 的差异 。3. 3 据资料记载 , 一些中药 (如黄芪 、 党参 、 枸杞 可以促进肠道益生菌 (如双歧杆菌 、 乳杆菌 的生长 , 充当益生元的作 用 。 它们通过促进双歧杆菌生长 , 抑制大肠杆菌生长而治疗 腹泻 6,8。 但本实验结果显示 :此六味中药在体外可明显抑 制大肠杆菌生长 , 但并不同时促进双歧杆菌的生长 , 除黄连 对双歧杆菌略有抑制外 , 其它几味中药对双歧杆菌生长均无 影响 。 这说明此六味中药治腹泻是通过直接抑制大肠杆菌 的生长而起疗效的 , 对双歧杆菌并无多大影响 。由此可知 , 以上六味中药用于治疗腹泻

11、可避免将肠道有益 、 有害菌一同 杀死 , 而引起肠道菌群失调 , 这也是中药治腹泻的优势 。3. 4 双歧杆菌和大肠杆菌不是孤立地生长于肠道中 , 它们与众多肠道菌一起存在于肠道的微生物区系中 , 这些微生物 与动物机体有共同作用 , 如机体厌氧和供氧条件的变化会引 起菌群之间数量的变化 。 因此 , 上述两菌在机体内处于一种 复杂的生态环境中 , 体外实验结果不能完全反映体内菌群变 化 。 若要确切 、 详细了解体内实际效果 , 仍需进一步研究 。 参考文献 :1康 白 . 双歧杆菌 M . 大连 :大连海事出版社 ,1998,5. 2王本祥 . 现代中药理学 M . 吉林 :中国医药科技

12、出版社 ,1995,56461.3凌代文 . 乳酸菌分类鉴定及实验方法 M . 北京 :中国轻 工出版社 ,1999,76130.4陈天寿 . 微生物培养基的制造和应用 M . 北京 :中国农 业出版社 ,1995,238263.5杨洁彬 . 乳酸菌 -生物学基础及应用 M . 北京 :中国轻 工出版社 ,1996,89102.6薛恒平 . 中草药添加剂的研究 J . 兽药及饲料添加剂 ,1999,4(6 :1215.7夏稷子 . 千里光等五种中草药的体外抑菌试验 J . 中国 微生态学杂志 ,1997, (4 :50.8田碧文 . 阿胶 、 五味子 、 刺五加 、 枸杞对双歧杆菌生长的影 响

13、 J . 中国微生态学杂志 ,1996,8(2 :1113.E ffects of six Chinese herbal medicines on Bif idobacteria and E. coli in viroSUN Li -jun 1,CHEN Ling -ling 1(11Department of technology and engineering ,Anhui Techinical Teachers College ,Feng Y ang ,Anhui ,233100,China Abstract :effects of six Chinese herbal Medicine

14、s was studied on Bif idobacteria and E. coli in vit ro. The two bacteria were inoc 2ulated to a liquid medium with six Chinese herbal medicines ,cultivated in o ptimal conditions for several hours ,then the bacteria were counted. The result indicated that The six Chinese herbal medicines have si gni

15、ficant effect of inhibition on E. coli and has no inhibi 2tion on Bif idobacteria except that Coptis Chinensis Franch has a little inhibition.K ey w ords :Chinese herbal medicines ; E. coli ; Bif idobacteria ;growth几 种 草 药 煎 液 对 雏 鸡 生 长 发 育 的 效 果 观 察何 华 西(湖南环境生物职业技术学院 , 湖南衡阳 421005 摘 要 : 本试验通过选用大青叶 、 马鞭草 、 扛板归 、 枸骨 、 牡荆等五种药用植物的全草各等量进行水煮 , 取其 药液喂鸡与空白组进行对比试验 , 结果使用两个疗程后 , 饮药水的雏鸡育雏期成活率和出笼率高于不给草药组 ; 给草药组的饲料药物成本比不给草药组的低 。 关键词 : 草药 ; 雏鸡 ; 效果 中图分类号 :S853174 文献标识码 :A 文章编号 :1000-6354(2004 01-0008-03 衡阳地区的许多农村