03药物分析方法的设计和验证

1、第三章第三章 药物分析方法的设计和验证药物分析方法的设计和验证第一节第一节 药物分析方法的分类和设计药物分析方法的分类和设计一、分类一、分类按按取样量分取样量分常量分析（常量分析（0.11g或或10100mL）微量分析微量分析半微量半微量 (10100mg或或110mL)微量微量 (0.110mg或或10uL1mL)超微量超微量(0.1mg或或10uL)重量分析法重量分析法滴定或滴定或容量分析法容量分析法化学分析法化学分析法（mC+nRCmRn）仪仪器器分分析析法法光光谱谱分分析析色谱分析色谱分析电化学分析电化学分析热分析热分析吸收吸收(UV，IR，AA，NMR)发射发射(荧光荧光,火焰火焰)

2、质谱质谱旋光旋光折光折光-LC，GC，TLC，CE-电位、电流电位、电流-TGA，DTA，DSC按测定原理与操作方法按测定原理与操作方法分分（一）应（一）应与被测组分的与被测组分的含量相适应含量相适应二、分析方法选择原则二、分析方法选择原则常量组分常量组分容量法容量法重量法重量法原料药含原料药含量测定量测定干燥失重、干燥失重、灼炽残渣灼炽残渣检查检查Rd千分之几千分之几微量组分微量组分仪器分析法仪器分析法制剂含量制剂含量溶出度或均匀溶出度或均匀度检查度检查Rd百分之几百分之几实例实例:配位滴定法测定复方氢氧化铝片中铝、镁配位滴定法测定复方氢氧化铝片中铝、镁问题：问题：还可选用哪种方法？还可选用

3、哪种方法？（二）应考虑被测组分性质（二）应考虑被测组分性质被测组分性质被测组分性质测定方法测定方法常用原则：常用原则：纯度高样品纯度高样品-容量分析法容量分析法酸或碱性酸或碱性-酸碱滴定法酸碱滴定法氧化性或还原性氧化性或还原性-氧化还原滴定法氧化还原滴定法金属阳离子金属阳离子-配位滴定法配位滴定法卤素阴离子卤素阴离子-银量法银量法复杂样品复杂样品-色谱法色谱法有一定挥发性有一定挥发性-GC非挥发性非挥发性-LC，TLC1、非水酸量法、非水酸量法-弱酸性药物弱酸性药物2、紫外分光光度法、紫外分光光度法-药物结构中有共轭体系且吸光系数大药物结构中有共轭体系且吸光系数大3、三氯化铁比色法、三氯化铁比

4、色法-药物结构中有酚羟基结构药物结构中有酚羟基结构4、HPLC-UV-成分较多且相互影响且紫外吸收的药物成分较多且相互影响且紫外吸收的药物5、TLC-药物中杂质限度检查药物中杂质限度检查苯溴马隆苯溴马隆实例分析实例分析小结：小结：最佳方法最佳方法-测定的目的与对象测定的目的与对象原料药含量测定原料药含量测定-非水酸量法非水酸量法制剂含量或溶出度检查制剂含量或溶出度检查-UV杂质检查或鉴别杂质检查或鉴别-TLC赋形剂干扰赋形剂干扰-LC（三）应与测定的具体要求相适应（三）应与测定的具体要求相适应1、成品分析或仲裁分析、成品分析或仲裁分析-准确度要求高准确度要求高2、中间体分析或环境分析、中间体分

5、析或环境分析-快速简便快速简便3、微量分析或痕量分析、微量分析或痕量分析-灵敏度要求高灵敏度要求高（四）应考虑干扰物质的影响（四）应考虑干扰物质的影响干扰物存在干扰物存在-选择分离方法（选择分离方法（TLC、HPLC）结论结论结构性质结构性质含量含量干扰物干扰物现有设备现有设备测定技术测定技术测定要求测定要求（准确度、专属性、灵敏度、时效准确度、专属性、灵敏度、时效）测定成本测定成本合适测定方法合适测定方法方法选择考虑因素方法选择考虑因素第二节第二节 药物分析方法的验证药物分析方法的验证准确度准确度(accuracy)精密度精密度(precision)（重复性、中间精密度、重现性）（重复性、中

6、间精密度、重现性）专属性专属性(specificity)检测限检测限(limit of detection,LOD)定量限定量限(limit of quantitation,LOQ)线性线性(linearity)范围范围(quantitation range)耐用性耐用性(ruggedness)验证内容验证内容一、误差及其分类一、误差及其分类（一）绝对误差和相对误差（一）绝对误差和相对误差（二）系统误差和随机误差（二）系统误差和随机误差1、系统误、系统误差差（1）方法误差）方法误差（2）仪器和试剂误差）仪器和试剂误差（3）操作误差）操作误差2、随机误差、随机误差-多次平行测定多次平行测定解决方

7、法解决方法对照或空白试验对照或空白试验校正仪器校正仪器3、测量结果检验、测量结果检验-方差分析方差分析 （t检验、检验、G检验、检验、F检验）检验）（一）准确度（一）准确度（Accuracy)1、定义定义 表示分析结果与真实值的接近程度。表示分析结果与真实值的接近程度。 用绝对误差或相对误差表示用绝对误差或相对误差表示.2、评价方法、评价方法 加样回收率（相对误差）衡量加样回收率（相对误差）衡量%100)(加样值测定值回收值R一、准确度和精密度一、准确度和精密度（二）精密度（二）精密度（precision)1、定义：、定义：平行测量的各次测量值（实验值）之间互平行测量的各次测量值（实验值）之间

8、互相接近程度。相接近程度。2、评价方法、评价方法（1）偏差（）偏差（deviation)xxdi（2）平均偏差）平均偏差nxxniid1（5）相对标准偏差）相对标准偏差（RSD or CV）%100 xSRSD%100 xddR（3）相对平均偏差）相对平均偏差（Relative average deviation)12nxxSi（4）标准偏差）标准偏差（standard deviation)（三）重复性、中间精密度、重现性（三）重复性、中间精密度、重现性（1）重复性重复性 同室同人同仪器对同样品的某物理量同室同人同仪器对同样品的某物理量重复重复测定的测定的结果相互接近程度。结果相互接近程度。（

9、2）中间精密度）中间精密度 同室不同人、不同设备、不同时间对同一样品的某同室不同人、不同设备、不同时间对同一样品的某一物理量重复测定结果的精密度。一物理量重复测定结果的精密度。（3）重现性）重现性 不同人不同室不同仪器对同样品的某物理量测定不同人不同室不同仪器对同样品的某物理量测定结果的精密度。结果的精密度。三、准确度和精确度的关系三、准确度和精确度的关系 精密度是准确度的保证。测量值的准确度表示测量结精密度是准确度的保证。测量值的准确度表示测量结果的正确性；测量值的精密度表示测量结果的重现性、果的正确性；测量值的精密度表示测量结果的重现性、重复性。重复性。第三节第三节 药物分析中的有效数字药

10、物分析中的有效数字一、有效数字一、有效数字（一）定义：一）定义：分析中，实际能测量到的数字。分析中，实际能测量到的数字。 根据测定方法和使用仪器的准确程度来确定，只有最根据测定方法和使用仪器的准确程度来确定，只有最后一位欠准，欠准度为后一位欠准，欠准度为1。2、有效位数确定、有效位数确定（1）0在数据中位置不同，作用不同。在数据中位置不同，作用不同。例：例：1.002-4位，位，0.0980-3位，位，2.0103-2位位例例: 电子分析天平读数电子分析天平读数0.3526 滴定管体积读数滴定管体积读数22.25例：例：9.48-4位位（4）若数值的首位大于）若数值的首位大于8，有效位数可多取

11、，有效位数可多取一位一位。（3）pH、logK等数值的有效位数取决于小数部分等数值的有效位数取决于小数部分数字的位数。数字的位数。例例 2.533 +11.352 2 -3和和2（2）数据中的倍数或分数，可视为无限多位有效数）数据中的倍数或分数，可视为无限多位有效数字字例例 pH=3.02-2位位二、运算规则二、运算规则（一）加减法一）加减法以以小数点后位数最少小数点后位数最少的数据为准（的数据为准（误差最大误差最大）。）。8 .513 . 04 . 11 .50281. 045. 11 .50（二）乘除法二）乘除法 以以有效数字最少有效数字最少的那个测量值为准的那个测量值为准（相对误差最大相对误差最大）。）。例：例：0.231 20.243.2=14.9618 15三、药物含量测定结果的表达法三、药物含量测定