三聚氰胺的检测液相法ppt课件

1、三聚氰胺的检测液相法三聚氰胺的检测液相法三聚氰胺三聚氰胺 物理与化学性质物理与化学性质三聚氰胺三聚氰胺分子式：分子式： C3H6N6分子量：分子量：126.15 英文名：英文名：Melamine三聚氰胺三聚氰胺- -构造式构造式三聚氰胺三聚氰胺俗称蜜胺、蛋白精，又叫俗称蜜胺、蛋白精，又叫2 ,4 ,6- 2 ,4 ,6- 三氨基三氨基-1,3,5-1,3,5-三嗪、三嗪、1,3,5-1,3,5-三嗪三嗪-2,4,6-2,4,6-三胺、三胺、2,4,6-2,4,6-三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰三氨基脲、三聚氰酰胺、氰脲三酰胺。胺。是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，是一是一种三嗪类含氮杂环有机化合

2、物，是一种重要的有机化工原料。种重要的有机化工原料。三聚氰胺三聚氰胺三聚氰胺性状为纯白色单斜棱晶体，无味，密度三聚氰胺性状为纯白色单斜棱晶体，无味，密度1.573g/cm3 (16)1.573g/cm3 (16)。在水中溶解度随温度升高而增大在水中溶解度随温度升高而增大, ,在在2020时，约时，约为为3.3 g/L3.3 g/L，即微溶于冷水，溶于热水，极微溶于，即微溶于冷水，溶于热水，极微溶于热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇热乙醇，不溶于醚、苯和四氯化碳，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等。三聚氰胺三聚氰胺遇强酸或强碱水溶液水解，

3、胺基遇强酸或强碱水溶液水解，胺基逐渐被羟基取代，先生成三聚氰酸逐渐被羟基取代，先生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸二酰胺，进一步水解生成三聚氰酸一酰胺，最后生成三聚氰酸。一酰胺，最后生成三聚氰酸。三聚氰胺三聚氰胺 检测检测过程过程检测检测_ _选择方法选择方法原料乳与乳制品中三聚氰胺的检原料乳与乳制品中三聚氰胺的检测方法：测方法：GB/T22388-2019GB/T22388-2019饲料中三聚氰胺的测定：饲料中三聚氰胺的测定：NY/T2.29-2019NY/T2.29-2019检测检测_ _试剂试剂甲醇：色谱纯。甲醇：色谱纯。乙腈：色谱纯。乙腈：色谱纯。氨水氨水: :浓度浓度25%-

4、28%25%-28%。三氯乙酸溶液三氯乙酸溶液10g/L10g/L：称取：称取10g10g三氯三氯乙酸加水至乙酸加水至1L1L。乙酸铅溶液乙酸铅溶液(22g/L):(22g/L):称取称取22g22g乙酸铅乙酸铅, ,用约用约300mL300mL水溶解后定容至水溶解后定容至1L1L。氨水甲醇溶液：量取氨水甲醇溶液：量取5ml5ml氨水，溶解于氨水，溶解于100ml100ml甲醇中。甲醇中。20%20%甲醇溶液：甲醇溶液：200ml200ml甲醇参与甲醇参与800ml800ml一级水中一级水中，混匀。，混匀。方法所用试剂，除另有规定外，均为分析纯方法所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂，水为蒸

5、馏水或同等纯度水，溶液为水溶试剂，水为蒸馏水或同等纯度水，溶液为水溶液。液。检测检测_ _规范品规范品三聚氰胺规范品纯度三聚氰胺规范品纯度99%99%。检测检测_ _规范品规范品规范贮藏液规范贮藏液准确称取准确称取100mg100mg准确到准确到0.1mg0.1mg三聚氰三聚氰胺规范品于胺规范品于100mL100mL容量瓶中，用容量瓶中，用20%20%甲甲醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成醇水溶液溶解并定容至刻度，配制成浓度为浓度为1.0mg/mL1.0mg/mL的规范贮藏液，于的规范贮藏液，于44避光保管。避光保管。检测检测_ _规范品规范品规范品中间液规范品中间液准确汲取规范贮藏液准确汲取规

6、范贮藏液5.00mL5.00mL于于50mL50mL容量瓶中，用容量瓶中，用20%20%甲醇水溶液定容甲醇水溶液定容至刻度，配制成浓度为至刻度，配制成浓度为100 g/mL 100 g/mL 的溶液，于的溶液，于44避光保管。避光保管。检测检测_ _规范品规范品规范品任务液规范品任务液准确汲取规范中间液准确汲取规范中间液0.50mL0.50mL、 1.00mL1.00mL、 2.00mL 2.00mL、 5.00mL 5.00mL、 10.00mL10.00mL于于5 5个个100 mL 100 mL 容量瓶中，容量瓶中，用用20%20%甲醇水溶液定容至刻度甲醇水溶液定容至刻度. .于于44避

7、光保管。避光保管。检测检测_ _规范品规范品三聚氰胺三聚氰胺储备液1000中间液100工作液0.51.02.05.010单位g/mL检测检测_ _规范品规范品规范任务液浓度可根据所测样品规范任务液浓度可根据所测样品中的详细含量调整。中的详细含量调整。假设只做单点标样，请选择与样假设只做单点标样，请选择与样品浓度最接近的一个点。品浓度最接近的一个点。检测检测_ _规范品谱图规范品谱图min051015202530mAU -10-50510 VWD1 A, Wavelength=240 nm (三聚氰胺2010100920-0标样.D) 10.224检测检测_ _规范品曲线规范品曲线Amountu

8、g/ml02Area0255075100125150175 Compound #1, VWD1 ACorrelation: 1.00000 Rel. Res%(1): -3.1214e-1 Area = 34.9472733*Amt +0.5840483检测检测_ _样品预处置样品预处置原理：原理：样品沉淀脂肪和蛋白质，调样品沉淀脂肪和蛋白质，调PHPH至中至中性，过滤后进高效液相色谱仪，经性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分别后，根据保管时间和反相色谱分别后，根据保管时间和峰面积进展定性和定量。峰面积进展定性和定量。检测检测_ _样品预处置样品预处置准确称取准确称取6 610g10g样品

9、于样品于50ml50ml容量瓶中。容量瓶中。参与三氯乙酸溶液约参与三氯乙酸溶液约20ml20ml，要徐徐参与，要徐徐参与，并摇动容量瓶，超声提取，并摇动容量瓶，超声提取10-2010-20分钟，分钟，参与参与2ml2ml乙酸铅溶液，用三氯乙酸溶液稀乙酸铅溶液，用三氯乙酸溶液稀释至刻度。释至刻度。静置静置3030分钟，用滤纸过滤，滤液如不分钟，用滤纸过滤，滤液如不需净化经滤膜需净化经滤膜(0.45m)(0.45m)过滤，滤液供过滤，滤液供液相测定用。液相测定用。检测检测_ _样品预处置样品预处置如需净化，按以下步骤操作如需净化，按以下步骤操作: :小柱活化：依次用小柱活化：依次用3mL3mL甲醇

10、和甲醇和3mL3mL水水活化小柱。活化小柱。上样：准确汲取上样：准确汲取10mL10mL可根据实验可根据实验情况调整滤液转移至固相萃取柱情况调整滤液转移至固相萃取柱中。中。检测检测_ _样品预处置样品预处置净化：再用净化：再用3mL3mL水和水和3mL3mL甲醇分别甲醇分别洗涤，抽至近干。洗涤，抽至近干。洗脱：用洗脱：用6mL6mL氨化甲醇溶液洗脱，氨化甲醇溶液洗脱，搜集全部洗脱液。搜集全部洗脱液。控制流速在控制流速在1mL/min1mL/min以内。以内。检测检测_ _样品预处置样品预处置洗脱液于洗脱液于5050下用氮气吹干，残下用氮气吹干，残留物用留物用1mL1mL流动相或流动相或20%2

11、0%甲醇水溶甲醇水溶液溶解，涡旋混合液溶解，涡旋混合1min1min，供液相，供液相测定用。测定用。检测检测_ _色谱条件色谱条件色谱柱：色谱柱：C18C18或或C8C8柱，或同等性能柱，或同等性能的柱子；的柱子；4.6mm4.6mm250mm250mm，5m5m。流动相：称取流动相：称取2.02g2.02g庚烷磺酸钠和庚烷磺酸钠和2.10g2.10g柠檬酸于柠檬酸于1L1L容量瓶中，用水容量瓶中，用水溶解并稀释至刻度。取该溶液溶解并稀释至刻度。取该溶液900ml900ml参与参与100ml100ml乙腈，混匀。乙腈，混匀。检测检测_ _色谱条件色谱条件流速：流速：1mL/min1mL/min

12、。进样量：进样量：10L10L。检测器：紫外检测器，波长检测器：紫外检测器，波长240nm240nm。根据保管时间定性，外标峰面积法根据保管时间定性，外标峰面积法定量。定量。检测检测_ _样品谱图样品谱图min00.511.522.533.544.5mAU 020040060080010001200 VWD1 A, 波长=230 nm (D:液相液相安捷伦2010.5前2007.8.10-2008.8.10防腐剂2008080214-0安塞蜜标样.D) 2.802安赛蜜min051015202530mAU -2-1012345 VWD1 A, Wavelength=240 nm (三聚氰胺20

13、10100920-1酸奶样品.D) 10.697检测检测_ _调理流动相调理流动相水相乙腈水相乙腈=90=901010 适宜大多数的样品。适宜大多数的样品。适当添加水相的比例可推迟出峰适当添加水相的比例可推迟出峰时间，使分别度变大。时间，使分别度变大。结果结果计算计算检出限检出限结果结果_ _计算计算原理：外标法原理：外标法 C标标A样样D单点法公式：单点法公式： X A标标 m C样样D多点法公式：多点法公式： X m 结果结果_ _计算计算式中：式中： X - X - 样品的含量，样品的含量，mg/kgmg/kg； C C标标 - - 规范运用液浓度，规范运用液浓度，g/mlg/ml； C C样样 - - 样品浓度，样品浓度，g/mlg/ml； D - D - 样品稀释液总体积，样品稀释液总体积，mLmL； m - m - 样质量量，样质量量，g g； A A样样 - - 样品的峰面积；样品的峰面积； A A标标 - - 标样的峰面积。标样的峰面积。结果结果_ _允许差允许差在反复性条件下获得的两次独立在反复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超越算术测定结果的绝对差值不得超越算术平均值的平均值的10%10%。结果结果_ _检出限检出限液相法检出限液相法检出限:2mg/kg:2mg/kg计算结果计算结果22时，应给出详细值；时，应给出详细值；计算结果计算结果2